靶向降解棕榈化酶抑制PD-L1的多肽-PROTAC及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种靶向降解棕榈化酶抑制PD

【技术实现步骤摘要】
靶向降解棕榈化酶抑制PD
‑
L1的多肽
‑
PROTAC及其应用


[0001]本专利技术涉及抗肿瘤药物
，具体涉及一种多肽
‑
PROTAC靶向降解棕榈化酶促进PD
‑
L1抑制及其应用。

技术介绍

[0002]PD
‑
L1是重要的免疫调节因子，能与PD
‑
1结合抑制T细胞的活化与增殖过程,进而介导癌细胞的免疫逃逸。作为肿瘤领域重要的免疫检查点，PD
‑
L1在塑造免疫抑制性肿瘤微环境中起着关键作用。PD
‑
L1可选择性的在肿瘤细胞表面高表达，并通过与激活的T细胞表面的PD
‑
1特异性结合，活化PD
‑
1/PD
‑
L1下游通路，传递负性调节信号，进而导致激活T细胞的凋亡和免疫活性的丧失。因此，PD
‑
1/PD
‑
L1通路是存在于肿瘤微环境中的介导免疫逃逸的关键分子，阻断该通路可以解除肿瘤细胞对T淋巴细胞的抑制，加强免疫系统对肿瘤的识别杀伤作用。
[0003]生物技术的快速发展也大大促进了新药的设计和发展速度，但是体内用药时，药物的多器官分布仍然是许多药物由实验室进入临床的一大难题。药物在其他组织或器官的非特异性分布不仅增大了体内用药的剂量，使药物成本提高，同时也对正常组织和器官造成损害，引发毒副作用。
[0004]蛋白水解靶向嵌合体(proteolysis
‑/>targetingchimeras,PROTAC)是一种异双功能分子，分子的一端连接结合靶蛋白的配体(POI)，一端连接E3连接酶的配体，中间通过合适的Linker相连。当多肽
‑
PROTAC结合E3连接酶，靶向结合目的蛋白形成三元复合物，给靶蛋白打上泛素化的标签，泛素化的蛋白被细胞内的蛋白酶体识别并降解。多肽
‑
PROTAC具有极高的靶向性，还具有类似于催化反应的作用机制，能够以很小的剂量获得极高的活性。
[0005]作为一项新技术，多肽
‑
PROTAC具有耐药性靶标的特殊敏感性，避免了化疗药物带来的耐药性。多肽
‑
PROTAC可以直接通过小分子抑制肿瘤细胞中特异性的受体功能，由于多肽
‑
PROTAC具有催化作用，这也增加靶表达和靶蛋白突变不敏感，因此只需要低剂量的多肽
‑
PROTAC就能发挥良好的作用，减少了药物的剂量和成本。

技术实现思路
：
[0006]针对现有技术的不足，本专利技术提供的技术方案如下：
[0007]第一方面，本专利技术提供一种靶向降解棕榈化酶抑制PD
‑
L1的多肽
‑
PROTAC，其特征在于：所述多肽
‑
PROTAC的氨基酸序列如所示SEQ ID No:1。
[0008]作为优选方案，所述多肽
‑
PROTAC的分子结构式为CRBN
‑
GSGS
‑
SEQ ID No:1。
[0009]进一步地，选用CRBN的配体为来那度胺、泊马度胺及其类似物为E3连接酶配体。
[0010]更进一步地，所述多肽
‑
PROTAC能有效靶向于目标蛋白，并降低细胞中PD
‑
L1的含量，实现对PD
‑
1/PD
‑
L1信号通路的阻断。
[0011]第二方面，本专利技术提供一种如上任一所述靶向降解棕榈化酶抑制PD
‑
L1的多肽
‑
PROTAC在筛选/制备免疫治疗药物中的应用。
[0012]特别地，本专利技术中化合物可用于制备抗肿瘤药物。本专利技术化合物研究示例为宫颈癌。
[0013]与现有技术相比，本专利技术具有如下优点及有益效果：
[0014]本专利技术选用CRBN的配体度胺、泊马度胺及其类似物为E3连接酶配体，通过linker将降解棕榈化酶抑制剂与两种不同的E3连接酶偶联，成功制备得到了靶向的靶向降解棕榈化酶的多肽
‑
PROTAC，能有效靶向于目标蛋白，并降低细胞中PD
‑
L1的含量，实现对PD
‑
L1的抑制，阻断PD
‑
1/PD
‑
L1免疫信号通路，消除免疫抑制作用，从而特异性杀灭PD
‑
L1阳性细胞，为肿瘤免疫治疗提供有效解决方案。同时具有较好的体内体外抗肿瘤活性，对正常细胞毒性较低，符合高效低毒的特征。
附图说明
[0015]图1为蛋白配体的结合强度预测结果；
[0016]图2为蛋白结构预测可视化结果。
[0017]图3为多肽3D结构模拟图。
[0018]图4为为多肽与蛋白质的结合模拟图
[0019]图5为目标蛋白及肽段的定量信息；
[0020]图6为外源添加peptide1的IP组的对照组信号差异。
[0021]图7为未添加peptide1的IP组的对照组信号差异
[0022]图8、图9、图10均为目标蛋白及肽段的积分峰面积。
[0023]图11为不同多肽
‑
PROTAC浓度对PD
‑
L1的降解结果。
[0024]图12为不同多肽
‑
PROTAC作用时间对PD
‑
L1的降解结果。
[0025]图13为不同多肽
‑
PROTAC浓度观察多肽
‑
PROTAC入胞情况的流式细胞术结果。
[0026]图14为不同多肽
‑
PROTAC作用时间观察多肽
‑
PROTAC入胞情况的流式细胞术结果。
[0027]图15为多肽
‑
PROTAC诱导PD
‑
L1蛋白降解的免疫荧光结果。
[0028]图16为多肽
‑
PROTAC作用于细胞的Ki
‑
67染色结果。
[0029]图17为多肽
‑
PROTAC作用于细胞的TUNEL结果。
具体实施方式
[0030]本专利技术的靶向降解棕榈化酶的多肽
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PROTAC，其结构式为CRBN
‑
GSGS
‑
SEQ ID No:1。
[0031]本专利技术的多肽
‑
PROTAC的氨基酸序列如所示SEQ ID No:1：DSFESEFNFNGAGD
‑
GSGS
‑
ALAPYIP
‑
RRRRRRRR。
[0032]本专利技术选用CRBN的配体主要是来那度胺、泊马度胺及其类似物为E3连接酶配体。
[0033]本专利技术的化合物可用于制备抗肿瘤药物。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种靶向降解棕榈化酶抑制PD
‑
L1的多肽
‑
PROTAC，其特征在于：所述多肽
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PROTAC的氨基酸序列如所示SEQ ID No:1。2.根据权利要求1所述的靶向降解棕榈化酶抑制PD
‑
L1的多肽
‑
PROTAC，其特征在于：所述多肽
‑
PROTAC的分子结构式为CRBN
‑
GSGS
‑
SEQ ID No:1。3.根据权利要求2所述的靶向降解棕榈化酶抑制PD
‑
L1的多肽
‑
P...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡红兵，戴梦源，姚时婕，时玉颖，王华，何灿，高阳，齐御文，王安瑾，刘淼，
申请(专利权)人：武汉大学中南医院，
类型：发明
国别省市：