【技术实现步骤摘要】
一种基于人的改造后的APOBEC3A的胞嘧啶碱基编辑器
[0001]本专利技术涉及一种基于人的改造后的APOBEC3A的胞嘧啶碱基编辑器,属于基因工程
技术介绍
[0002]当前基因编辑技术不断快速发展,通过改造特定的基因,可以研究基因功能、遗传病的发病机理、开发新药以及用于基因治疗和改良作物等。近年来,基于CRISPR
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Cas系统的各种衍生技术更是广泛应用在生命科学和医学领域,其中的单碱基编辑器(Base editor,BE)已成为基因编辑技术的重要组成部分。BE是在CRISPR
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Cas9系统的基础上设计的,将野生型的Cas9蛋白进行改造后与胞嘧啶脱氨酶或腺嘌呤脱氨酶连接,然后通过sgRNA(small guide RNA)的引导,在不产生DNA双链断裂(Double strandedbreak,DSB)的情况下直接进行单个碱基的编辑。BE主要分为两大类:胞嘧啶碱基编辑器(Cytosine Base Editor,CBE)和腺嘌呤碱基编辑器(Adenine Base Edi ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种来源于人的胞嘧啶脱氨酶突变体,其特征在于,所述突变体是在氨基酸序列如SEQ ID NO:1的亲本酶的基础上,在第26和27位氨基酸中间依次插入丝氨酸、缬氨酸和精氨酸三个氨基酸残基。2.编码权利要求1所述胞嘧啶脱氨酶突变体的基因。3.一种表达盒,其特征在于,包含权利要求2所述的基因。4.如权利要求3所述的表达盒,其特征在于,所述表达盒还含有启动子、nCas9(D10A)、尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂、核定位序列和终止序列;所述启动子启动权利要求2所述基因的表达,按连接顺序依次为启动子、权利要求2所述基因、nCas9(D10A)、尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂、核定位序列和终止序列。5.如权利要求3或4所述的表达盒,其特征在于,所述nCas9(D10A)的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示,尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示,所述核定位序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示,所述终止序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示。6.一种基于人的胞嘧啶脱氨酶的CBE单碱基编辑器,其特征在于,所...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈建欢,任春艳,郑亭亭,饶义剑,刘彦山,何雨珊,
申请(专利权)人:江南大学,
类型:发明
国别省市:
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