一种植物源脱氧胆酸中间体的制备方法技术

一种植物源脱氧胆酸中间体的制备方法，包括以下步骤：步骤1、以(20S)

【技术实现步骤摘要】
一种植物源脱氧胆酸中间体的制备方法


[0001]本专利技术属于化工
，具体涉及到一种植物源脱氧胆酸中间体的制备方法。

技术介绍

[0002]脱氧胆酸，化学式为C
24
H
40
O4，化学名称为3α,12α
‑
二羟基
‑
5β
‑
胆烷
‑
24
‑
酸，是次级胆汁酸之一，它是肠道细菌的代谢副产物，其结构式如下：
[0003][0004]脱氧胆酸注射液是2015年4月29日由美国食品药品监督管理局(FDA)批准全球首个局部溶脂药，该药用于治疗和改善成人中度至重度颏下脂肪的凸起或丰满(双下巴)。
[0005]WO2017211820公开了以植物来源的植物甾醇发酵产物(20S)
‑9‑
羟基
‑3‑
酮基孕甾
‑4‑
烯
‑
20
‑
羧酸甲酯为起始原料制备脱氧胆酸的方法，路线如下所示：
[0006][0007]但在实际制备中发现，从起始物开始制备A3的过程中存在以下问题：
[0008]1)、起始物SM在氢化反应制备A1时存在3，9位不能完全连接的物质及较大比例的5α位氢异构的杂质，结构如下：
[0009][0010]2)、化合物A1在进行消除反应制备A2过程不可避免的生成
△
8,9
位双键的副产物，结构如下：
[0011][0012]3)、化合物A2在进行化学还原反应制备A3过程中不可避免的生成3β羟基杂质，结构如下：
[0013][0014]该路线的副产物杂质多，至少有三种异构体存在，纯化困难，若要获得高质量的中间体，则需要多次精制，从而导致收率降低，成本较高，也不利于工业化放大。
[0015]因此，本领域需要设计一种新的植物源脱氧胆酸中间体的制备方法。

技术实现思路

[0016]本专利技术的目的是提供一种植物源脱氧胆酸中间体的制备方法，以解决
技术介绍
中提出的以植物来源的植物甾醇发酵产物(20S)
‑9‑
羟基
‑3‑
酮基孕甾
‑4‑
烯
‑
20
‑
羧酸甲酯为起始原料制备脱氧胆酸的方法中，因副产物杂质多而导致收率降低、成本较高的问题。
[0017]本专利技术的技术方案是一种植物源脱氧胆酸中间体的制备方法，包括以下步骤：
[0018]步骤1、以(20S)
‑9‑
羟基
‑3‑
酮基孕甾
‑4‑
烯
‑
20
‑
羧酸甲酯为起始原料，在无机酸和冰醋酸的作用下，脱水合成化合物B1；
[0019][0020]步骤2、化合物B1在反应溶剂的作用下加氢还原生成化合物A2；
[0021][0022]步骤3、化合物A2在3α
‑
羟基类固醇脱氢酶作用下还原酮基为化合物A3
[0023][0024]在一种具体的实施方式中，所述步骤1中的无机酸包括硫酸和磷酸中的一种，优选无机酸为硫酸；所述步骤1中的反应温度为0～60℃，优选步骤1中的反应温度为30～40℃。
[0025]在一种具体的实施方式中，所述步骤2中的反应溶剂包括四氢呋喃、无水乙醇、甲醇和二氯甲烷中的一种或两种，优选反应溶剂为无水乙醇。
[0026]在一种具体的实施方式中，所述步骤2中还添加了有机碱，所述步骤2中的有机碱包括吡啶、1
‑
甲基咪唑、三乙胺和4
‑
二甲氨基吡啶中的一种或两种。
[0027]在一种具体的实施方式中，所述步骤2中的反应温度为0～40℃，优选步骤2中的反应温度为30～35℃；所述步骤2中的氢气压力为0～0.4Mpa，优选步骤2中的氢气压力为0.2～0.4MPa。
[0028]在一种具体的实施方式中，所述步骤3中的3α
‑
羟基类固醇脱氢酶的使用形态为纯化酶或者细胞破碎后的酶液；所述步骤3中还原采用了助溶剂，助溶剂包括叔丁醇、异丙醇和二甲基亚砜中的一种。
[0029]在一种具体的实施方式中，所述步骤3中，反应溶液的PH值为6.5～8.0，反应温度为28～35℃，使用氢氧化钠水溶液调节pH值，氢氧化钠水溶液浓度为2％～10％。
[0030]在一种具体的实施方式中，所述步骤1具体包括：
[0031]在反应容器中加入无机酸、冰醋酸和起始物(9α,20S)
‑9‑
羟基
‑3‑
酮基孕甾
‑4‑
烯
‑
20
‑
羧酸甲酯，控温反应1～4h，TLC检测反应至完全；将反应液加入到冰水浴中，搅拌一段时
间后过滤，用水淋洗至中性，将得到的滤饼湿品用二氯甲烷溶解，用氢氧化钠调PH值至中性，分液，收集有机层，减压浓缩，甲醇置换，最终浓缩至粘稠状态，过滤，滤饼干燥后得到化合物B1。
[0032]在一种具体的实施方式中，所述步骤2具体包括：在高压罐中加入反应溶剂，搅拌下加入起始物B1和钯碳，在氢气加压条件下反应一段时间，TLC检测反应至完全，过滤除钯碳，然后减压浓缩，用水置换，水析出料，水淋洗，滤饼干燥后得到化合物B1。
[0033]在一种具体的实施方式中，所述步骤3具体包括：
[0034]在反应瓶中加入水，搅拌下加入化合物A2和助溶剂，调节pH值，待化合物A2全部溶清后，调节反应温度，加入葡萄糖、3α
‑
羟基类固醇脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、辅酶I；搅拌均匀后，调节pH后反应2～4小时，TLC监控化合物A2无明显剩余或不再减少；
[0035]将反应液进行真空浓缩至稠状，加入水，降温至5℃以下搅拌一段时间，过滤，得含蛋白的粗品；粗品用二氯甲烷和甲醇溶解，室温搅拌溶解，过滤，滤液浓缩至一定体积后用甲醇置换，降温至0～10℃，过滤，烘干得化合物3。
[0036]本专利技术的有益效果包括：
[0037]本专利技术以(20S)
‑9‑
羟基
‑3‑
酮基孕甾
‑4‑
烯
‑
20
‑
羧酸甲酯(SM)为起始原料，先进行9位α羟基消除，本路线反应过程中合成的化合物B1无
△
8,9
位双键的异构体，产品质量较好，收率较高，便于工业化放大。
[0038]在对中间体B1进行加氢反应时，本专利技术通过控制氢气压力选择性还原
△
4,5
位氢，而
△
9,11
位双键不受影响，同时选择合适的溶剂和温度减少5α
‑
H副产物生成，进而主要生成5β
‑
H的目标产物A2。
[0039]在对中间体A2的3
‑
酮基还原过程中，本专利技术使用自构建的3α
‑
羟基类固醇本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种植物源脱氧胆酸中间体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、以(20S)
‑9‑
羟基
‑3‑
酮基孕甾
‑4‑
烯
‑
20
‑
羧酸甲酯为起始原料，在无机酸和冰醋酸的作用下，脱水合成化合物B1；步骤2、化合物B1在反应溶剂的作用下加氢还原生成化合物A2；步骤3、化合物A2在3α
‑
羟基类固醇脱氢酶作用下还原酮基为化合物A32.根据权利要求1所述的植物源脱氧胆酸中间体的制备方法，其特征在于，所述步骤1中的无机酸包括硫酸和磷酸中的一种，优选无机酸为硫酸；所述步骤1中的反应温度为0～60℃，优选步骤1中的反应温度为30～40℃。3.根据权利要求1所述的植物源脱氧胆酸中间体的制备方法，其特征在于，所述步骤2中的反应溶剂包括四氢呋喃、无水乙醇、甲醇和二氯甲烷中的一种或两种，优选反应溶剂为无水乙醇。4.根据权利要求1所述的植物源脱氧胆酸中间体的制备方法，其特征在于，所述步骤2中还添加了有机碱，所述步骤2中的有机碱包括吡啶、1
‑
甲基咪唑、三乙胺和4
‑
二甲氨基吡啶中的一种或两种。5.根据权利要求1所述的植物源脱氧胆酸中间体的制备方法，其特征在于，所述步骤2中的反应温度为0～40℃，优选步骤2中的反应温度为30～35℃；所述步骤2中的氢气压力为0～0.4Mpa，优选步骤2中的氢气压力为0.2～0.4MPa。6.根据权利要求1所述的植物源脱氧胆酸中间体的制备方法，其特征在于，所述步骤3中的3α
‑
羟基类固醇脱氢酶的使用形态为纯化酶或者细胞破碎后的酶液；所述步骤3中还原
采用了助溶剂，助溶剂包括叔丁醇、异丙醇和二甲基亚砜中的一种。7.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾春玲，李斌，刘红，羊向新，许新华，
申请(专利权)人：湖南科瑞生物制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：