一种香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA及其前体与应用制造技术

本发明专利技术公开了一种香蕉枯萎病菌致病菌致病性相关milRNA及其前体与应用。所述milRNA及其前体的序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。本发明专利技术使用Split

【技术实现步骤摘要】
一种香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA及其前体与应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种香蕉枯萎病菌致病菌致病性相关milRNA及其前体与应用。

技术介绍

[0002]香蕉(Musa spp.)主要种植在热带地区，是一种重要的水果，也是继水稻、小麦、玉米之后的第四大粮食作物，但是香蕉种植业的发展受到香蕉枯萎病的严重影响。香蕉枯萎病由香蕉枯萎病菌——尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense，Foc)引起，分为4个生理小种，其中4号生理小种Foc4几乎能侵染所有的香蕉品种，致病性最强，危害性最广。目前对香蕉枯萎病的防治主要集中在两个方向上。一是采用化学药剂或者生物防治，防治效果并不理想；二是培育抗病香蕉品种，但随着病原菌的进化，抗病性逐渐丧失。明确香蕉枯萎病的致病分子机理有助于开发防治香蕉枯萎病菌的新策略。
[0003]microRNA(miRNA)是一种短链的核酸RNA，通过采用翻译抑制或者利用自身与生物基因结合产生靶向降解来调节转录后水平的基因表达，近年来在动植物体内被广泛发现。在真菌中发现的小分子RNA与动植物中存在的miRNA既具有相似性，又有所不同，称其为microRNA
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like RNA(milRNA)。目前已经有大量研究关注到miRNA在植物
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致病菌互作间发挥的作用，但香蕉与Foc4互作之间miRNA的研究主要聚焦在为响应Foc4侵染，香蕉根系miRNA的变化。2022年香蕉枯萎病菌中milR<br/>‑
87被报道在致病性中发挥作用，此外鲜有研究针对尖孢镰刀菌中的小分子RNA。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的之一在于克服现有技术的缺点与不足，提供了一种香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA。
[0005]本专利技术的另一目的在于提供上述香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA的前体。
[0006]本专利技术的再一目的在于提供上述香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA及其前体的应用。
[0007]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
[0008]一种香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA，命名为foc
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milR
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1，其核酸序列如下所示：TGGATGGATGCGTG。
[0009]上述香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA的前体，其核酸序列如下所示：
[0010]AGGGCTTGTCACCATGGTTTCTTTTGTTAATTTTCATTTGTCTGTTTCCTTTTGGCAT GAGCATTCCTTCATGTCTTGCGTTGTGGTGGTGAGACGGATATGGATGTATGGATGGATG GATGGATGGATGCGTGAGGTGGAAATCAGCGAGCAGG。
[0011]上述香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA或其前体作为靶点在如下情况之一中的应用：
[0012](1)在调控香蕉枯萎病致病菌致病性中的应用；
[0013](2)在调控香蕉枯萎病致病菌菌丝形态中的应用；
[0014](3)在调控香蕉枯萎病致病菌菌丝生长中的应用；
[0015](4)在调控香蕉枯萎病致病菌产孢量中的应用；
[0016](5)在制备抗香蕉枯萎病致病菌的杀菌剂中的应用；
[0017](6)在防治由香蕉枯萎病致病菌引起的植物病害中的应用。
[0018]上述香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA或其前体的抑制剂或阻断剂在如下情况之一中的应用：
[0019](1)在调控香蕉枯萎病致病菌致病性中的应用；
[0020](2)在调控香蕉枯萎病致病菌菌丝形态中的应用；
[0021](3)在调控香蕉枯萎病致病菌菌丝生长中的应用；
[0022](4)在调控香蕉枯萎病致病菌产孢量中的应用；
[0023](5)在制备抗香蕉枯萎病致病菌的杀菌剂中的应用；
[0024](6)在防治由香蕉枯萎病致病菌引起的植物病害中的应用。
[0025]进一步地，在所述的应用中，所述的香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA或其前体缺失能够使香蕉枯萎病致病菌致病性下降。
[0026]进一步地，在所述的应用中，所述的香蕉枯萎病致病菌为尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense，FOC)4号生理小种。
[0027]进一步地，在所述的应用中，所述的植物为芭蕉属植物；更进一步为巴西蕉或香蕉。
[0028]进一步地，在所述的应用中，所述的抑制剂或阻断剂为利用Split
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marker方法构建的香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA的前体的敲除载体。
[0029]一种治疗由香蕉枯萎病菌导致的植物病害的方法，通过阻断或抑制香蕉枯萎病菌中上述香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA或其前体的表达实现。
[0030]进一步地，所述的植物为芭蕉属植物；更进一步为巴西蕉或香蕉。
[0031]进一步地，阻断或抑制香蕉枯萎病菌中上述香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA或其前体的表达的试剂为利用Split
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marker方法构建的香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA的前体的敲除载体。
[0032]本专利技术通过高通量测序的方法寻找到尖孢镰刀菌侵染香蕉后显著性差异表达的foc
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milR
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1，并分析foc
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milR
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1在香蕉枯萎病菌致病过程中的作用机制。香蕉枯萎病菌致病相关foc
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milR
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1的鉴定及功能解析不仅为香蕉枯萎病防控提供了新的作用靶点，还为深入研究foc
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milR
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1在香蕉枯萎病菌中的作用机制奠定基础，具有重要的应用价值。
[0033]本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0034]本专利技术通过扩增香蕉枯萎病菌致病相关的foc
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milR
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1前体两侧的同源片段，同时融合潮霉素磷酸转移酶基因，构建foc
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milR
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1前体缺失突变体。试验证明，相比野生型菌株Foc4，缺失突变体的致病力显著降低。
[0035]本专利技术证实了foc
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milR
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1是香蕉枯萎病菌具有致病力所必需的，有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病机制，为开发杀菌剂提供靶标。
附图说明
[0036]图1为实施例1中筛选得到的14
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28nt的sRNA长度统计结果。
[0037]图2为预测的foc
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milR
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1前体二级结构图。
[0038]图3为实施例4foc
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milR
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1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA，其特征在于：命名为foc
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milR
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1，其核酸序列如下所示：TGGATGGATGCGTG。2.权利要求1中所述的香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA的前体，其核酸序列如下所示：AGGGCTTGTCACCATGGTTTCTTTTGTTAATTTTCATTTGTCTGTTTCCTTTTGGCAT GAGCATTCCTTCATGTCTTGCGTTGTGGTGGTGAGACGGATATGGATGTATGGATGGATG GATGGATGGATGCGTGAGGTGGAAATCAGCGAGCAGG。3.权利要求1中所述的香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA或权利要求2中所述的香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA的前体作为靶点的应用，其特征在于：所述的应用为在如下情况之一中的应用：(1)在调控香蕉枯萎病致病菌致病性中的应用；(2)在调控香蕉枯萎病致病菌菌丝形态中的应用；(3)在调控香蕉枯萎病致病菌菌丝生长中的应用；(4)在调控香蕉枯萎病致病菌产孢量中的应用；(5)在制备抗香蕉枯萎病致病菌的杀菌剂中的应用；(6)在防治由香蕉枯萎病致病菌引起的植物病害中的应用。4.权利要求1中所述的香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA或权利要求2中所述的香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA的前体的抑制剂或阻断剂的应用，其特征在于：所述的应用为在如下情况之一中的应用：(1)在调控香蕉枯萎病致病菌致病性中的应用；(2)在调控香蕉枯萎病致病菌菌丝形...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈谷，陈琪，李静宇，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：