一种脂肪组织运输保存液制造技术

本发明专利技术提供了一种脂肪组织运输保存液。具体地，所述运输保存液包括：(a)DMEM,high glucose,no phenol red 60

【技术实现步骤摘要】
一种脂肪组织运输保存液


[0001]本专利技术涉及生物
，具体地，本专利技术涉及一种用于低温长时间保存脂肪组织的运输保存液。

技术介绍

[0002]脂肪组织因其在能量调控、炎症反应和免疫应答方面的作用已被认为是一个内分泌器官。此外，它还是具有多向分化潜能的多功能细胞的来源之一，而这种多功能细胞就存在于脂肪组织的血管基质部分中。脂肪组织中的血管基质部分(SVF,stromal vascular fraction)是脂肪组织经胶原酶消化、过滤、离心除去成熟脂肪细胞后得到的。SVF易于从脂肪组织中提取并含有丰富的、可塑性极强的脂肪组织来源的间充质干细胞(Adipose tissue
‑
derived mesenchymal stem cells,ASC)。
[0003]从人类乳房和内脏脂肪组织中得到的SVF已有报道其含有内皮细胞、非特征性的基质细胞、血液细胞和组织型巨噬细胞。此外，SVF还是造血祖细胞和中胚层干细胞(可以分化为成骨的、成软骨的以及肌源性、神经源细胞系)的来源之一。SVF可以促进血管再生、形成、诱导分化,通过SVF自体纯化活细胞的注射,能提高脂肪成活率。
[0004]新鲜的脂肪组织样本可保证提取的间充质干细胞具有良好的生物活性、细胞性状及增殖能力。但样本采集地点(如医院)与样本生产地点通常处于不同地点，因此需将脂肪组织样本在采集后保存于运输保存液中并于一定温度环境下运输转运至生产场地进行保存及生产。
[0005]关于脂肪组织样本的保存，在室温中保存一般不超过24h，或在低温冻存后再复温，但低温冷冻运输一般使用干冰或者液氮维持细胞冷冻，虽然细胞活性能长期得到保存，但对运输条件要求非常苛刻，并且运输成本高昂，在实际应用中难以广泛采用。而低温(0～10℃)处理可降低细胞正常生理过程中产生的氧自由基和脂质过氧化物，送到的样品无需特别处理(ready
‑
to
‑
use)。并且，低温运输与冷冻运输相比，非常廉价。
[0006]因此本领域迫切需要开发保存时间长、且保存效果好的脂肪组织低温运输保存液。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是提供一种保存时间长、且保存效果好的脂肪组织低温运输保存液。
[0008]本专利技术第一方面，一种脂肪组织运输保存液，包括：
[0009](a)DMEM,high glucose,no phenol red 60
‑
90重量份；
[0010](b)DMEM/F
‑
12,hepes,no phenol red 10
‑
30重量份；
[0011](c)杀菌剂50
‑
200ng/mL；和
[0012](d)L
‑
谷氨酰胺2
‑
10mmol/L。
[0013]在另一优选例中，所述运输保存液中，所述组分(a)
‑
(d)占所述保存液总重量的
80
‑
100wt％，较佳地，85
‑
99wt％，更佳地95
‑
98.5wt％。
[0014]在另一优选例中，所述运输保存液中，组分(a)与组分(b)的重量比为3.5
‑
4.5:1，较佳地，3.8
‑
4.2:1。
[0015]在另一优选例中，组分(a)为70
‑
85重量份，较佳地，75
‑
82重量份。
[0016]在另一优选例中，组分(b)为15
‑
25重量份，较佳地，18
‑
22重量份。
[0017]在另一优选例中，组分(c)的浓度为80
‑
120ng/mL，较佳地，90
‑
110ng/mL，更佳地，95
‑
105ng/mL。
[0018]在另一优选例中，组分(d)的浓度为3
‑
6mmol/L，较佳地，3.5
‑
4.5mmol/L。
[0019]在另一优选例中，所述杀菌剂为庆大霉素硫酸盐。
[0020]在另一优选例中，所述运输保存液中，组分(a)
‑
(d)之外，余量为水。
[0021]在另一优选例中，所述运输保存液中水占所述保存液总重量的0
‑
20wt％，较佳地1
‑
5wt％。
[0022]本专利技术第二方面，提供了一种在运输过程中保存脂肪组织的方法，包括步骤：
[0023]在2
‑
8℃下，将脂肪组织在如本专利技术第一方面所述的运输保存液中进行保存。
[0024]在另一优选例中，所述保存的温度为4
‑
6℃进行保存。
[0025]在另一优选例中，所述保存是指在3.5
‑
4.5℃进行保存。
[0026]在另一优选例中，所述保存的时间为0.1
‑
84h。
[0027]在另一优选例中，所述保存的时间为24
‑
75h。
[0028]在另一优选例中，所述保存的时间为48
‑
72h。
[0029]在另一优选例中，所述保存的时间为64
‑
72h。
[0030]在另一优选例中，保存时所述脂肪组织与运输保存液的体积比为1～2:1～2；较佳地，1～1.5:1。
[0031]本专利技术第三方面，提供了一种如本专利技术第一方面所述的组织运输保存液的制备方法，包括步骤：按比例混合组分(a)、(b)、(c)和(d)，混合均匀，从而制得所述组织保存液。
[0032]应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
具体实施方式
[0033]本专利技术人经过广泛而深入的研究，通过大量筛选和测试，提供了一种脂肪组织运输保存液。本专利技术通过特定组分的复配，使得样本可在运输液中2～8℃运输保存72h以上，且不影响基质血管组分(Stromal Vascular Fraction，SVF)细胞的提取率。在此基础上完成了本专利技术。
[0034]术语
[0035]除非另有定义，否则本文中所用的全部技术术语和科学术语均具有如本专利技术所属领域普通技术人员通常理解的相同含义。
[0036]如本文所用，在提到具体列举的数值中使用时，术语“约”意指该值可以从列举的值变动不多于1％。例如，如本文所用，表述“约100”包括99和101和之间的全部值(例如，99.1、99.2、99.3、99.4等)。
[0037]如本文所用，术语“含有”或“包括(包含)”可以是开放式、半封闭式和封闭式的。换言之，所述术语也包括“基本上由
…
构成”、或“由
…...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脂肪组织运输保存液，其特征在于，包括：(a)DMEM,high glucose,no phenolred 60
‑
90重量份；(b)DMEM/F
‑
12,hepes,no phenolred 10
‑
30重量份；(c)杀菌剂50
‑
200ng/mL；和(d)L
‑
谷氨酰胺2
‑
10mmol/L。2.如权利要求1所述的运输保存液，其特征在于，所述运输保存液中，所述组分(a)
‑
(d)占所述保存液总重量的80
‑
100wt％，较佳地，85
‑
99wt％，更佳地95
‑
98.5wt％。3.如权利要求1所述的运输保存液，其特征在于，组分(a)为70
‑
85重量份，较佳地，75
‑
82重量份。4.如权利要求1所述的运输保存液，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈双全，徐栋，
申请(专利权)人：无锡赛比曼生物科技有限公司，
类型：发明
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