一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液制造技术

本发明专利技术公开了一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液，包含复方电解质注射液、葡萄糖氯化钠注射液、维生素和氨基酸。本发明专利技术的保存液，能够用于低温下保存脂肪间充质干细胞，有效保持脂肪间充质干细胞的活率，满足临床需求。床需求。

【技术实现步骤摘要】
一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液


[0001]本专利技术涉及生物
，具体地，涉及一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液。

技术介绍

[0002]脂肪间充质干细胞(简称MSCs)是从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。有以下优点：取材相对容易、量大、免疫原性低，以及容易过伦理。是目前备受关注可在体外培养扩增一类具有多向分化潜能的成体干细胞，可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经细胞以及肌肉细胞等多种组织细胞。
[0003]细胞治疗需要大量细胞才能满足临床需求，所以在生产中要建大量细胞库用以冻存，生产按照临床需求用细胞保存液复苏、洗涤制备终产品，并在2
‑
8℃冷链运输至运输中心。
[0004]冻存后的细胞相对于新鲜细胞来说，脆弱易破碎，而复苏细胞至终产品期间步骤多，时间长，若缺合适的细胞保存液难以确保MSCs的活率，从而影响产品质量和细胞治疗效果。为确保MSCs临床效果，具有较高的细胞活率、良好的生存能力亟需在本领域开发一种能够有效在低温保存脂肪间充质干细胞的保存液。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液。
[0006]本专利技术的第一方面，提供一种细胞保存液，包含：
[0007]复方电解质注射液；
[0008]葡萄糖氯化钠注射液；
[0009]维生素；
[0010]氨基酸。
[0011]在另一优选例中，所述维生素选自维生素A、维生素B、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K中的一种或两种以上的组合。
[0012]在另一优选例中，所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸中的一种或两种以上的组合。
[0013]在另一优选例中，所述维生素为水溶性维生素，每250ml细胞保存液中，含1/48～1/24支水溶性维生素。
[0014]在另一优选例中，每支水溶性维生素包含：硝酸硫胺2
‑
5mg，核黄素磷酸钠4
‑
6mg，烟酰胺30
‑
50mg，盐酸吡多辛4
‑
6mg，泛酸钠15
‑
18mg，维生素c钠100
‑
135mg，生物素50
‑
80ug，叶酸0.2
‑
0.6mg，维生素B12 3
‑
8ug。
[0015]在另一优选例中，每支水溶性维生素包含：硝酸硫胺3.1mg，核黄素磷酸钠4.9mg，烟酰胺40mg，盐酸吡多辛4.9mg，泛酸钠16.5mg，维生素c钠113mg，生物素60ug，叶酸0.4mg，
维生素B12 5.0ug。
[0016]本专利技术中，水溶性维生素符合卫生部药品标准(二部)第五册第44页“注射用水溶性维生素”的标准要求。
[0017]在另一优选例中，所述的细胞保存液中，所述氨基酸的体积占所述保存液总体积的0.2％
‑
3％，较佳为0.2％
‑
2.5％。
[0018]在另一优选例中，每250ml氨基酸包含：丙氨酸2
‑
5g、精氨酸1
‑
4g、天冬氨酸0.4
‑
0.8g、胱氨酸0.01
‑
0.08g、谷氨酸0.8
‑
1.5g、甘氨酸1
‑
2g、组氨酸0.8
‑
1.5g、亮氨酸1
‑
2g、异亮氨酸0.8
‑
1.5g、甲硫氨酸0.8
‑
1.5g、苯丙氨酸1
‑
2g。
[0019]在另一优选例中，每250ml氨基酸包含：丙氨酸3.05g、精氨酸2.10g、天冬氨酸0.63g、胱氨酸0.05g、谷氨酸1.05g、甘氨酸1.48g、组氨酸1.2g、亮氨酸1.48g、异亮氨酸1.05g、甲硫氨酸1.05g、苯丙氨酸1.48g。
[0020]在另一优选例中，每1000ml复方电解质注射液中包含：氯化钠4
‑
6g、葡萄糖酸钠4
‑
6g、醋酸钠3
‑
5g、氯化钾0.2
‑
0.5g、氯化镁0.2
‑
0.5g。
[0021]在另一优选例中，每1000ml复方电解质注射液中包含：氯化钠5.26g、葡萄糖酸钠5.02g、醋酸钠3.68g、氯化钾0.37g、氯化镁0.30g。
[0022]在另一优选例中，复方电解质占保存液的体积比为80％～98％(V/V)，较佳为85％～96％(V/V)。
[0023]在另一优选例中，每100ml葡萄糖氯化钠注射液中含4
‑
6g葡萄糖，含0.85
‑
0.95g氯化钠。
[0024]在另一优选例中，所述葡萄糖氯化钠注射液的体积占所述保存液总体积的1％
‑
15％。
[0025]在另一优选例中，所述葡萄糖氯化钠注射液中葡萄糖含量5％，氯化钠含量0.9％。
[0026]在另一优选例中，所述葡萄糖氯化钠注射液的体积占所述保存液总体积的2％
‑
14％，较佳为3％
‑
12％。
[0027]本专利技术的第二方面，提供一种脂肪间充质干细胞混合物，所述脂肪间充质干细胞混合物包含脂肪间充质干细胞和第一方面所述的保存液。
[0028]在另一优选例中，所述脂肪间充质干细胞为复苏后的脂肪间充质干细胞。
[0029]在另一优选例中，所述脂肪间充质干细胞与保存液的比例为：1～5
×
107个细胞：1
‑
3mL保存液。
[0030]在另一优选例中，所述脂肪间充质干细胞中，占总细胞数量95％以上的细胞具有表面抗原CD90，
[0031]占总细胞数量95％以上的细胞具有表面抗原CD73；
[0032]占总细胞数量95％以上的细胞具有表面抗原CD105；
[0033]具有表面抗原HLA
‑
DR的细胞占总细胞数量的0
‑
0.5％；
[0034]具有表面抗原CD45的细胞占总细胞数量的0
‑
5％；和/或
[0035]具有表面抗原CD14的细胞占总细胞数量的0
‑
5％。
[0036]本专利技术的第三方面，提供一种细胞低温保存方法，所述方法包括步骤：将细胞悬浮于第一方面所述的细胞保存液中，然后在低温下进行保存。
[0037]在另一优选例中，所述低温是指2
‑
8℃。
[0038]在另一优选例中，所述细胞为脂肪间充质干细胞。
[0039]在另一优选例中，所述脂肪间充质干细胞为复苏后的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种细胞保存液，其特征在于，包含：复方电解质注射液；葡萄糖氯化钠注射液；维生素；氨基酸。2.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，所述维生素为水溶性维生素，每250ml细胞保存液中，含1/48～1/24支水溶性维生素。3.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，所述的细胞保存液中，所述氨基酸的体积占所述保存液总体积的0.2％
‑
3％。4.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，每1000ml复方电解质注射液中包含：氯化钠4
‑
6g、葡萄糖酸钠4
‑
6g、醋酸钠3
‑
5g、氯化钾0.2
‑
0.5g、氯化镁0.2
‑
0.5g。5.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，每100ml葡萄糖氯化钠注射液中含4
‑
6g葡萄糖，含0.85
...

【专利技术属性】
技术研发人员：王飞，赵荻骏，叶青，徐栋，张露亿，吴军峰，余舒倩，张丽，
申请(专利权)人：无锡赛比曼生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：