【技术实现步骤摘要】
用于多功能和有效的基因表达的RNA复制子
[0001]本申请是申请号为201780019155.1的专利技术名称为“用于多功能和有效的基因表达的RNA复制子”的中国专利申请的分案申请,原申请是2017年03月13日提交的PCT国际申请PCT/EP2017/055808于2018年09月21日进入中国国家阶段的申请。
[0002]本专利技术包括可以通过甲病毒来源的复制酶复制的RNA复制子。RNA复制子包含通过复制酶进行复制所需的序列元件,但这些序列元件不编码任何蛋白质或其片段,例如甲病毒非结构蛋白或其片段。因此,在根据本专利技术的RNA复制子中,通过复制酶进行复制所需的序列元件和蛋白质编码区是解偶联的。根据本专利技术,通过与天然甲病毒基因组RNA相比移除至少一个起始密码子实现解偶联。RNA复制子可包含编码目的蛋白(例如药学活性蛋白)的基因。复制酶可以由RNA复制子或单独的核酸分子编码。
技术介绍
[0003]多年来在生物医学研究中已经研究了用于预防和治疗目的的包含编码一种或更多种多肽之外来遗传信息的核酸分子。现有技术方 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.RNA复制子,其包含5
’
复制识别序列,其中所述5
’
复制识别序列的特征在于其包含与天然甲病毒5
’
复制识别序列相比至少一个起始密码子的移除。2.根据权利要求1所述的RNA复制子,其中所述5
’
复制识别序列包含与甲病毒5
’
末端处约250个核苷酸同源的序列,并且优选包含与甲病毒5
’
末端处约300至约500个核苷酸同源的序列。3.根据权利要求1或2所述的RNA复制子,其中所述5
’
复制识别序列包含与甲病毒的保守序列元件1和保守序列元件2同源的序列。4.根据权利要求3所述的RNA复制子,其中保守序列元件2包含来自甲病毒的非结构蛋白的开放阅读框的片段。5.根据权利要求1至4中任一项所述的RNA复制子,其中所述5
’
复制识别序列包含与来自甲病毒的非结构蛋白的开放阅读框或其片段同源的序列,其中所述与来自甲病毒的非结构蛋白的开放阅读框或其片段同源的序列的特征在于其包含与天然甲病毒序列相比至少一个起始密码子的移除。6.根据权利要求5所述的RNA复制子,其中所述与来自甲病毒的非结构蛋白的开放阅读框或其片段同源的序列的特征在于其包含非结构蛋白的开放阅读框的至少天然起始密码子的移除。7.根据权利要求5或6所述的RNA复制子,其中所述与来自甲病毒的非结构蛋白的开放阅读框或其片段同源的序列的特征在于其包含非结构蛋白的开放阅读框的天然起始密码子之外的一个或更多个起始密码子的移除。8.根据权利要求1至7中任一项所述的RNA复制子,其包含一个或更多个核苷酸变化,所述核苷酸变化补偿通过移除至少一个起始密码子而引入的一个或更多个茎环内的核苷酸配对破坏。9.根据权利要求1至8中任一项所述的RNA复制子,其不包含编码截短的甲病毒非结构蛋白的开放阅读框。10.根据权利要求1至9中任一项所述的RNA复制子,其包含3
’
复制识别序列。11.根据权利要求1至10中任一项所述的RNA复制子,其包含编码目的蛋白的第一开放阅读框。12.根据权利要求11所述的RNA复制子,其中由所述第一开放阅读框编码的所述目的蛋白能够由所述RNA复制子作为模板来表达。13.根据权利要求11或12所述的RNA复制子,其包含控制亚基因组RNA产生的亚基因组启动子,所述亚基因组RNA包含编码目的蛋白的所述第一开放阅读框。14.根据权利要求13所述的RNA复制子,其中由所述第一开放阅读框编码的所述目的蛋白能够由所述RNA复制子和亚基因组RNA表达。15.根据权利要求11或12所述的RNA复制子,其包含控制亚基因组RNA产生的亚基因组启动子,所述亚基因组RNA包含编码目的蛋白的第二开放阅读框。16.根据权利要求15所述...
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