构建全身性Polr2i敲除转基因鼠的sgRNA和方法技术

本发明专利技术公开了构建全身性Polr2i敲除转基因鼠的sgRNA和方法。发明专利技术人通过独创性的设计，得到了一条可以有效敲除Polr2i基因，同时不影响其上下游基因Tbcb和Ovol3的正常功能。本发明专利技术使用CRISPR

【技术实现步骤摘要】
构建全身性Polr2i敲除转基因鼠的sgRNA和方法


[0001]本专利技术涉及转基因领域，具体涉及一种构建全身性Polr2i敲除转基因鼠的sgRNA和方法。

技术介绍

[0002]CRISPR
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Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats Cas9)是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御，可用来对抗入侵的病毒及外源DNA。CRISPR
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Cas9是继ZFN、TALENs等基因编辑技术推出后的第三代基因编辑技术，已经广泛应用于基因编辑领域，是现有基因编辑和基因修饰里面效率最高、最简便、成本最低、最容易上手的技术之一。
[0003]CRISPR
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Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的sgRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列，并引导Cas9蛋白酶进行有效切割DNA双链，形成双链断裂，通过非同源末端连接(Non
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homologous end joining，N本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.构建全身性Polr2i敲除转基因鼠的sgRNA，其核苷酸序列为：CCTGCTGGTAATCGCAATTCCGG。2.用于构建全身性Polr2i敲除转基因鼠的CRISPR
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Cas9体系，其特征在于，其使用的sgRNA如权利要求1所述。3.一种构建全身性Polr2i敲除转基因鼠的方法，包括如下步骤：将sgRNA 、Cas9注入鼠受精卵中，所述sgRNA如权利要求1所述；注射后的受精卵移植到假孕母鼠输卵管，获得并筛选验证阳性F0代鼠；阳性F0通过与野生型鼠交配获得F1代杂合子鼠。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，sgRNA 、Cas9通过显微注射法注入鼠受精卵中。5.根据权利要求3所...

【专利技术属性】
技术研发人员：‑，
申请(专利权)人：广州赛业百沐生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：