一种抗HPV68抗体及其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及医药领域，特别是涉及一种抗HPV 68抗体及其制备方法和用途，所述抗HPV 68抗体具有如下技术特征：<1>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR

【技术实现步骤摘要】
一种抗HPV 68抗体及其制备方法和用途


[0001]本专利技术涉及医药领域，特别是涉及一种抗HPV 68抗体及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]宫颈癌和宫颈癌前病变是威胁全世界妇女健康的一个重要因素。临床学、分子生物学和流行病学调查已经证明人乳头瘤病毒( human papillomavirus，HPV) 是宫颈癌和宫颈非典型增生的主要病因。目前HPV已经发现200多种亚型，根据致病性不同分为高危型包括HPV16、18、31、33、35、39、45等；低危型包括HPV6、11等。HPV 为无包膜的环状双链DNA病毒，其衣壳是由72 个主要衣壳蛋白Ll 蛋白五聚体构成的二十面体结构，1个病毒粒子上含有360 个Ll 蛋白单体。目前中国批准上市的宫颈癌疫苗有3种，包括：葛兰素史克（GSK）公司的HPV 2价疫苗Cervarix（亚型为HPV 16、18），默沙东公司HPV4价疫苗“佳达修
®”
（ GARDASIL
®
）和9价疫苗GARDASIL
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9（亚型为HPV 6、11、16、18、31、33、45、52、58）。世界卫生组织国际癌症研究署已明确的13种能够导致宫颈癌和高度痛前宫颈上皮内病变的HR
‑
HPV包括HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59和HPV68。其中仅HPV68在IARC致痛物分级中属于2A级，其余12种均属于I类致癌物。由于目前市售疫苗最多为9个亚型，因此越来越多的公司也在不断研发更多价型（如包括HPV68）的HPV疫苗。根据世界卫生组织（WHO）对HPV疫苗质量、安全性及有效性指导原则，以及国家食品药品监督管理局（CFDA）的相关规定，在多价HPV疫苗的研制和生产过程中，需要建立鉴别试验、抗原含量、吸附完全性和体外相对效力测定的方法，这些方法均可采用酶联免疫法（ELISA），因此ELISA法中单克隆抗体具有型别特别性以及较高中和活性对于HPV 疫苗的质量控制来说至关重要。

技术实现思路

[0003]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种抗HPV 68抗体及其制备方法和用途，用于解决现有技术中的问题。
[0004]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供一种抗HPV 68抗体，所述抗HPV 68抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述抗HPV 68抗体具有如下技术特征：<1>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR
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H1；<2>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR
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H2；<3>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR
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H3；<4>轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的CDR
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L1；<5>轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR
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L2；<6>轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR
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L3。
[0005]本专利技术另一方面提供一种分离的多核苷酸，编码所述抗HPV 68抗体的重链可变区和/或轻链可变区或全长氨基酸。
[0006]本专利技术还提供一种核酸构建体，含有所述的分离的多核苷酸。
[0007]本专利技术还提供一种抗体的表达系统，所述表达系统含有所述的核酸构建体或基因组中整合有外源的所述的多核苷酸。
[0008]本专利技术还提供所述的抗HPV 68抗体的制备方法，包括如下步骤：在适合表达所述抗HPV 68抗体的条件下，培养所述的抗体的表达系统，从而表达出所述抗HPV 68抗体，分离出所述抗HPV 68抗体。
[0009]本专利技术另一方面提供一种用于检测HPV 68抗原的试剂盒，包含所述抗HPV 68抗体或其免疫偶联物。
[0010]本专利技术另一方面提供所述抗HPV 68抗体、所述试剂盒在制备肿瘤诊断药物、肿瘤治疗药物、肿瘤预防药物的筛选产品或质控产品中的用途，或在制备诊断或治疗药物中的用途。。
[0011]如上所述，本专利技术的抗HPV 68抗体及其制备方法和用途，具有以下有益效果：本专利技术的人乳头瘤病毒68型（HPV 68）特异性的单克隆抗体与其它16种亚型HPV无交叉反应，用于HPV疫苗的鉴别试验具有高特异性的优点，具有中和抗体活性，可以准确检测HPV多价疫苗中HPV 68型有中和活性的抗原含量和吸附完全性，具有检测灵敏度高的优点，HPV疫苗质量控制方面将会得到广泛应用。
附图说明
[0012]图1显示为本专利技术的HPV68L1中和活性检验中假病毒对照图。
[0013]图2显示为本专利技术的免疫印迹法测定HPV 68 L1单抗图。
[0014]图3显示为抗体的亚型之间的交叉特异性鉴定结果之一。
[0015]图4显示为抗体的亚型之间的交叉特异性鉴定结果之一。
[0016]图5显示为抗体的亚型之间的交叉特异性鉴定结果之一。
[0017]图6显示为细胞上清液中和抗体效价。
[0018]图7显示为测定HPV 68 L1体外相对效力筛选单克隆抗体。
[0019]图8显示为测定HPV 68 L1体外相对效力筛选单克隆抗体。
[0020]图9显示为测定HPV 68 L1体外相对效力筛选单克隆抗体。
[0021]图10显示为单克隆抗体的EC50值汇总表（单位：μg/ml）。
[0022]图11显示为HPV 68 L1原液抗原体外相对效力测定图。
具体实施方式
[0023]本专利技术提供一种抗HPV 68抗体，所述抗HPV 68抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述抗HPV 68抗体具有如下技术特征中的一个或多个；<1>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR
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H1；<2>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR
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H2；<3>重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR
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H3；<4>轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的CDR
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L1；<5>轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR
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L2；<6>轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR
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L3。
[0024]所述抗HPV 68抗体识别人乳头瘤病毒68型L1蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗HPV 68抗体，所述抗HPV 68抗体包括重链可变区和轻链可变区，其特征在于，所述抗HPV 68抗体具有如下技术特征：<1> 重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR
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H1；<2> 重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR
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H2；<3> 重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR
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H3；<4> 轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的CDR
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L1；<5> 轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR
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L2；<6> 轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR
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L3。2.根据权利要求1所述的抗HPV 68抗体，其特征在于，所述抗HPV 68抗体的重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR
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H1、氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR
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H2和 氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR
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H3；和/或，所述抗HPV 68抗体的轻链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的CDR
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L1、氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR
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L2和 氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈琼，
申请(专利权)人：上海博唯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：