一种尿囊素铝中尿素含量的测定方法技术

本发明专利技术涉及一种尿囊素铝中尿素含量的测定方法，所述方法，步骤如下：步骤1：取尿囊素铝原料药1000mg，精密称定，置100mL量瓶中，加甲醇适量，超声30min，放至室温，定容至刻度，摇匀；步骤2：取尿囊素对照品10mg，精密称定，置100mL量瓶中，加甲醇适量，超声30min，放至室温，定容至刻度，摇匀，作为尿囊素对照品溶液；步骤3：取尿素对照品10mg，精密称定，置25mL量瓶中，加甲醇超声溶解，放冷定容，作为尿素对照品溶液(0.4mg/ml)；步骤4：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；步骤5：根据色谱图计算供试品中尿素的含量。中尿素的含量。中尿素的含量。

【技术实现步骤摘要】
一种尿囊素铝中尿素含量的测定方法


[0001]本专利技术属于分析化学方法领域,具体涉及一种利用采用HPLC
‑
UV法进行主要有关杂质尿素的含量测定。由于原料药尿囊素铝中尿素含量低于1％，故利用尿素与尿囊素铝溶解性差异，尿囊素铝难溶于有机溶剂，尿素易溶于有机溶剂，通过有机溶剂富集的方式对有关物质尿素进行含量测定。
技术背景
[0002]尿囊素铝(Aldioxa)，化学名称为二羟基
‑
(5氧
‑4‑
脲基
‑2‑
咪唑啉基)氧铝，白色结晶性粉末，无臭，无味，在水、乙醇、乙醚中几乎不溶，在稀盐酸或稀硝酸中略溶，常因部分水解而发生浑浊。原料药尿囊素铝为尿囊素与异丙醇铝熔融、缩合、水解后的反应产物，临床主要用于治疗胃及十二指肠溃疡。
[0003]尿囊素铝原料药的现有药品标准收载滴定法含量测定项，无相关物质检查研究。现有药典标准规定尿囊素铝按干燥品计算，含尿囊素(C4H6N4O3)应为65.3％～74.3％，含铝(Al)应为11.1％～13.0％。
[0004]本实验依照《中国药典》2015年版四部指导原则、《化学药物质量标准建立的规范化过程技术指导原则》、《化学药物杂质研究技术指导原则》等的有关要求，采用HPLC
‑
UV法，建立了尿囊素铝原料药含量测定及有关物质检查方法，并进行方法学考察，对药典规定的质量标准进行了完善与提高，为尿囊素铝原料药的质量控制及生产工艺改进提供理论依据。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是，采用HPLC
‑
UV法进行主要有关杂质尿素的含量测定。由于原料药尿囊素铝中尿素含量低于1％，故利用尿素与尿囊素铝溶解性差异，尿囊素铝难溶于有机溶剂，尿素易溶于有机溶剂，通过有机溶剂富集的方式对有关物质尿素进行含量测定。
[0006]为了实现本专利技术的上述目的,本专利技术提供了如下技术方案：
[0007]一种尿囊素铝中尿素含量的测定方法，所述方法，步骤如下：
[0008]步骤1：取尿囊素铝原料药1000mg，精密称定，置100mL量瓶中，加甲醇适量，超声30min，放至室温，定容至刻度，摇匀；
[0009]步骤2：取尿囊素对照品10mg，精密称定，置100mL量瓶中，加甲醇适量，超声30min，放至室温，定容至刻度，摇匀，作为尿囊素对照品溶液；
[0010]步骤3：取尿素对照品10mg，精密称定，置25mL量瓶中，加甲醇超声溶解，放冷定容，作为尿素对照品溶液(0.4mg/ml)；
[0011]步骤4：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；
[0012]步骤5：根据色谱图计算供试品中尿囊素和尿素的含量；
[0013]其中的高效液相色谱仪的色谱条件如下：
[0014]色谱柱：TSK gel Amide
‑
80(250
×
4.6mm,5μm)；流动相：乙腈
‑
水(90:10)；检测波长：210nm；流速：0.8mL/min；柱温：30℃；进样量：10μL。
[0015]本专利技术所述测定方法是经过筛选得到的，筛选过程如下：
[0016]专属性试验
[0017]精密量取空白溶剂(水)及上述对照品和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，结果见图1。
[0018]结果表明，空白溶剂无干扰，供试品溶液主峰的保留时间和对照品溶液一致，本法专属性较强。
[0019]系统适用性
[0020]分别精密称取尿囊素对照品和尿素对照品适量，加水溶解稀释制成每1mL中约含尿囊素80μg、尿素50μg的混合溶液作为系统适用性溶液。另精密称取尿囊素对照品和尿素对照品适量，分别加水配制成浓度约为100μg/mL、50μg/mL的溶液，作为定位溶液。分别精密量取水和上述溶液各10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见表1和图2。
[0021]表1系统适用性试验结果
[0022][0023]结果表明：出峰顺序依次为尿素和尿囊素，分离度为8.46，主峰理论塔板数为6934，本法系统适用性良好。
[0024]线性关系及检测限定量限考察
[0025]精密称取尿囊素对照品10.03mg，置100mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。分别精密吸取储备液0.5ml、1.0mL、2.0mL、4.0mL、6.0ml、8.0mL于10mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀；精密吸取5μg/ml线性溶液0.5ml、1ml至2ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀；分别精密吸取1.25μg/ml、2.5μg/ml线性溶液1ml至2ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀；精密吸取1.25μg/ml线性溶液1ml至2ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。
[0026]分别精密量取上述溶液及储备液各10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，以对照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，计算回归方程及相关系数，结果见表2及图3。
[0027]表2
[0028][0029]结果表明：尿囊素在0.6269μg/mL～100.3μg/mL范围内，峰面积与浓度成正比，线性回归方程为y＝12.36x+1.2869，相关系数R2为1，线性关系良好。
[0030]尿囊素检测限及定量限数据见表3，图4至5。
[0031]表3含量测定检测限与定量限
[0032][0033]结果表明：本法灵敏度较高。
[0034]进样精密度试验
[0035]配制对照品溶液，作为进样精密度溶液，精密量取10μL，注入液相色谱仪，重复进样6次，记录色谱图，计算6次进样主峰峰面积与保留时间的RSD，考察进样精密度，结果见表4。
[0036]表4进样精密度试验结果
[0037][0038]结果表明：连续6次进样，主峰保留时间RSD为0.20％，峰面积RSD为0.52％，均小于2.0％，仪器进样精密度较好。
[0039]溶液稳定性
[0040](1)供试品溶液稳定性
[0041]配制供试品溶液，在室温放置0h、2h、4h、6h、8h、12h、24h，分别精密量取10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见表5，考察主峰峰面积变化情况。
[0042]表5含量测定样品溶液稳定性结果
[0043][0044]结果表明：供试品溶液在室温下放置24h，样品峰面积无明显变化，RSD为1.21％(小于2.0％)，供试品溶液在室温下至少24h内稳定。
[0045](2)对照品溶液稳定性
[0046]对照品溶液在室温放置0h、2h、4h、6h、8h、12h、24h，分别精密量取10μL注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见表6，考察主峰峰面积变化情况。
[0047]表6对照品溶液稳定性结果
[0048][0049]结果表明：对照品溶液在室温下放置24h，主峰峰本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种尿囊素铝中尿素含量的测定方法，其特征在于，所述方法，包括以下步骤：步骤1：取尿囊素铝原料药，置量瓶中，加甲醇适量，超声，放至室温，定容至刻度，摇匀；步骤2：取尿素对照品，置量瓶中，加甲醇超声溶解，放冷定容，作为尿素对照品溶液；步骤3：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5
‑
20μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；步骤4：根据色谱图计算供试品中尿素的含量；其中的高效液相色谱仪的色谱条件如下：色谱柱：TSK gelAmide
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80(250
×
4.6mm,5μm)；流动相：乙腈
‑
水(90:10)；检测波长：210nm；流速：0.8mL/min；柱温：30℃；进样量：10μL。2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述方法，步骤如下：步步骤1：取尿囊素铝原料药1000mg，精密称定，置100mL量瓶中，加甲醇适量，超声30min，放至室温，定容至刻度，摇匀；步骤2：取尿素对照品10mg，精密称定，置25mL量瓶中，加甲醇超声溶解，放冷定容，作为尿素对照品溶液(0.4mg/ml)；步骤3：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；步骤4：根据色谱图计算供试品中尿囊素和尿素的含量；其中的高效液相色谱仪的色谱条件如下：色...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓霞，吴凌云，於江华，
申请(专利权)人：无锡济煜山禾药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：