一种血液中小分子的分离及质谱检测方法技术

本发明专利技术属于小分子分析技术领域，具体涉及一种血液中小分子的分离及质谱检测方法。该分离方法包括：(1)根据血液中待分离小分子的分子量，选择多孔材料来填装成固相萃取小柱；(2)取血液上样；(3)洗脱分离；其中，多孔材料为交联聚合物组成的多孔物质，用于截留分子量≤2000道尔顿的小分子；待分离小分子的分子量≤2000道尔顿。该分离方法与其他多孔材料的分离相比，该方法涵盖多孔材料范围广；与其他市面上特定性质的SPE小柱相比，该方法适合血液中各类性质的小分子物质，具有通用性；与其他经典血液样品前处理比(如液液萃取)，该方法前处理干净，不容易堵塞色谱柱，并且降低了质谱检测中的基质效应，便于临床推广和应用。便于临床推广和应用。便于临床推广和应用。

【技术实现步骤摘要】
一种血液中小分子的分离及质谱检测方法


[0001]本专利技术属于小分子分析
，具体涉及一种血液中小分子的分离及质谱检测方法。

技术介绍

[0002]临床质谱检测中主要针对的是生物样品，其中血液样品中内源性小分子物质与人类疾病息息相关，但它们的检测易受内源性结合蛋白、基质等因素干扰。因此血样样品的预处理是体内药物分析的一个重要步骤，也是整个分离分析过程中最烦琐的一个环节，与原料药物和制剂相比，血样样品更为复杂。微量药物分布在大量生物介质中，被测物浓度低，样品中含有大量的内源性物质，不仅能与药物及其代谢物结合，而且常干扰测定，特别是蛋白质等生物大分子物质不仅会堵塞色谱柱和管路系统堵塞，还会在质谱检测时产生基质效应。因此，临床血样样品中小分子物质的检测必须去除大分子物质，才能为最后的测定创造良好的条件。
[0003]现有的检测血液中小分子的方法主要根据分析物的极性、溶解度和pKa等理化性质，选取适合的前处理方法。目前主要是固液萃取，液液萃取。市面上出现的HLB、WCX、PSS等固相萃取小柱大都是对某一类物质具有特定的分离富集作用，无法适本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血液中小分子的分离方法，其特征在于，包括：(1)根据血液中待分离小分子的分子量，选择多孔材料来填装成固相萃取小柱；(2)取血液上样；(3)洗脱分离；其中，多孔材料为交联聚合物组成的多孔物质，用于截留分子量≤2000道尔顿的小分子；待分离小分子的分子量≤2000道尔顿。2.根据权利要求1所述的血液中小分子的分离方法，其特征在于，多孔材料的填装量为血清上样量的5倍
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30倍。3.根据权利要求1所述的血液中小分子的分离方法，其特征在于，固相萃取小柱规格为1mL
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30mL。4.根据权利要求1所述的血液中小分子的分离方法，其特征在于，步骤(2)中血液加标后再上样。5.根据权利要求1至4中任一权利要求所述的血液中小分子的分离方法，其特征在于，血液中待分离小分子包括儿茶酚胺、类固醇激素和同型半胱氨酸中的一种或多种。6.根据权利要求1至4中任一权利要求所述的血液中小分子的分离方法，其特征在于，多孔材料包括葡聚糖凝胶或乙烯醇
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甲基丙烯酸酯共聚物中的一种或多种组合。7.根据权利要求1至4中任一权利要求所述的血液中小分子的分离方法，其特征在于，包括：(a)血液中待分离小分子为儿茶酚胺，多孔材料选择TOYOPEARL HW
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40多孔填料；和/或(b)血液中待分离小分子为类固醇激素，多孔材料选择Sephadex LH
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20多孔填料；和/或(c)血液中待分离小分子为同型半胱氨酸，多孔材料选择SEC
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120多孔填料。8.根据权利要求7所述的血液中小分子的分离方法，其特征在于，(a)中，儿茶酚胺包括以下小分子中的一种或多种：E、NE、DA、MN、NMN和3
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M...

【专利技术属性】
技术研发人员：周燕，邓顺艳，李敏，夏兵，
申请(专利权)人：中国科学院成都生物研究所，
类型：发明
国别省市：