一种中药组合物的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种由荆芥、防风、羌活、独活、川芎、柴胡、桔梗、枳壳、前胡、茯苓、甘草组成的中药组合物的检测方法。本发明专利技术的检测方法，包括如下步骤：(1)供试品溶液的制备；(2)混合对照品溶液的制备；(3)供试品溶液和混合对照品溶液的UPLC

【技术实现步骤摘要】
一种中药组合物的检测方法


[0001]本专利技术属于中药药物成分的分析
，具体涉及一种由荆芥、防风、羌活、独活、川芎、柴胡、桔梗、枳壳、前胡、茯苓、甘草制成的中药组合物中多种化学成分同时检测的方法。

技术介绍

[0002]荆防制剂是依据明代张时彻《摄生众妙方》所载荆防败毒散而研发的现代成方制剂，主要由荆芥、防风、羌活、独活、川芎、柴胡、桔梗、枳壳、前胡、茯苓、甘草组成。可用于风热、风寒、风湿等为病者，可用于治疗呼吸系统疾患、消化系统疾患、皮肤疾患等多种临床常见病(如感冒、疮疡、温毒、斑疹、水痘、肠风下血等)。
[0003]中药及其复方是在中医理论指导下进行应用研究的，其成分复杂，发挥药效的部位往往不是单一成分，而是群体疗效，所以任何一种单一成分或几种成分都是无法反应中药及其复方的整体疗效。因此，对中药及其复方进行宏观地综合分析将成为必然的趋势。
[0004]李云静等(李云静，何忠梅.HPLC波长切换联合梯度洗脱同时测定荆防败毒丸中10个成分的含量[J].药物分析杂志，2017，37(3)：414
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421.)采用HPLC法测定了荆防败毒丸中10种成分；刘雯等(刘雯，李峰，孙春亮等.HPLC同时测定荆防颗粒中6种成分[J].中国实验方剂学杂志，2016，22(17)：55
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58.)采用HPLC法测定了荆防颗粒中的6种成分；冯雪等(冯雪，高玉乔，范琼瑛等.采用LC
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ESI/MS方法同时测定荆防败毒口服液中4个有效成分含量[J].药物分析杂志，2017，37(8)：1489
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1496.)采用LC
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ESI/MS方法同时测定荆防败毒口服液中4个有效成分；中国专利CN113252837A一种荆防合剂的质量检测方法，公开了3种有效成分的高效液相检测方法。上述现有技术只检测了荆防制剂中的几个成分，难以反映出荆防制剂的多种药理作用的整体质量。目前未见荆防制剂全成分检测的报道，因此开发一种荆防制剂多种成分的检测方法，对于今后荆防制剂的药效物质基础研究和质量控制具有十分重要的意义。

技术实现思路

[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种由荆芥、防风、羌活、独活、川芎、柴胡、桔梗、枳壳、前胡、茯苓、甘草组成的中药组合物的检测方法，能够实现多种化学成分的同时检测。
[0006]所述检测方法，包含以下步骤：
[0007]供试品溶液制备：称取该组合物适量，置锥形瓶中，加适量甲醇，超声，过滤，取续滤液，即得供试品溶液；
[0008]对照品溶液制备：称取新橙皮苷、柚皮苷、绿原酸、紫花前胡苷、新绿原酸、升麻素苷、甘草苷、阿魏酸适量，甲醇溶解，即得混合对照品溶液。
[0009]检测：将上述供试品和对照品溶液分别注入液相色谱仪中检测。
[0010]本专利技术一实施例中，所述供试品溶液制备方法为：取样品适量，研细，精密称定
10.0g，置锥形瓶中，加入甲醇25mL，密塞，称定质量后，超声30min，放冷，并用甲醇补足减失的质量，摇匀，静置，0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得液质供试品溶液，避光，置于冰箱中4℃备用。
[0011]本专利技术一实施例中，所述对照品溶液制备方法为：分别精密称取各对照品适量，加甲醇配制成每1mL含新橙皮苷1.055mg，柚皮苷0.125mg，绿原酸0.135mg，紫花前胡苷0.125mg，新绿原酸0.132mg，升麻素苷0.122mg，甘草苷0.136mg，阿魏酸0.122mg的混合对照品溶液，置于4℃冰箱内备用。
[0012]所述检测步骤，按照如下色谱条件进行检测：
[0013]色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
[0014]流动相：体积浓度为0.05～0.15％甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，采用梯度洗脱方式；
[0015]流速：0.2～0.4ml/min；
[0016]柱温：25～35℃。
[0017]检测器：选自紫外
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可见分光检测器、蒸发光散射检测器、电雾式检测器、质谱检测器中的一种。
[0018]进一步地，所述色谱柱选自Waters ACQUITY UPLC HSS C18、YMC Triart C18、Welch UltimateXB
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C18、Welch Ultimate AQ
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C18、Welch Ultimate UHPLC XB
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C18、Welch Xtimate C18、Waters Symmetry C18、Agilent ZORBAX SB
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C18、Thermo Acclaim C18、Thermo Hypersil GOLD C18、WatersACQUITYUPLC BEH C18。
[0019]更进一步地，所述色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS C18。
[0020]进一步地，所述流动相A为体积浓度为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈，洗脱梯度为：0分钟时，流动相A的比例为100％～90％，流动性B的比例为0～10％；2分钟时，流动性A的比例为100％～90％，流动性B的比例为0～10％；25分钟时，流动性A的比例为65％～55％，流动性B的比例为35～45％；35分钟时，流动相A的比例为35％～25％，流动性B的比例为65％～75％。
[0021]更进一步地，所述洗脱梯度为：0分钟时，流动相A的比例为97％～93％，流动性B的比例为3～7％；2分钟时，流动性A的比例为97％～93％，流动性B的比例为3～7％；25分钟时，流动性A的比例为62％～58％，流动性B的比例为38～42％；35分钟时，流动相A的比例为32％～28％，流动性B的比例为68％～72％。
[0022]更进一步地，所述洗脱梯度为：0分钟时，流动相A的比例为95％，流动性B的比例为5％；2分钟时，流动性A的比例为95％，流动性B的比例为5％；25分钟时，流动性A的比例为60％，流动性B的比例为40％；35分钟时，流动相A的比例为30％，流动性B的比例为70％。
[0023]进一步地，所述流速为0.3ml/min。
[0024]进一步地，所述柱温为30℃。
[0025]进一步地，所述检测器为质谱检测器，检测条件为：
[0026]离子源：电喷雾离子源(HESI
‑
II)；
[0027]离子化模式：正负离子模式；
[0028]扫描模式：Full MS/dd
‑
MS2；
[0029]离子传输管温度：350℃～370℃；
[0030]鞘气压力：35arb～50arb；
[0031]辅助气压力：10arb～15arb；
[0032]喷雾电压：3000V～3500V。
[0033]更进一步地，质谱检测器检测条件为：
[0034]离子源：电喷雾离子源(本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种由荆芥、防风、羌活、独活、川芎、柴胡、桔梗、枳壳、前胡、茯苓、甘草组成的中药组合物的检测方法，其特征在于，用液相色谱法对中药组合物的化学成分进行检测，其中，所述液相色谱条件如下：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：体积浓度为0.05～0.15％甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，采用梯度洗脱：0分钟时，流动相A的比例为100％～90％，流动性B的比例为0～10％；2分钟时，流动性A的比例为100％～90％，流动性B的比例为0～10％；25分钟时，流动性A的比例为65％～55％，流动性B的比例为35～45％；35分钟时，流动相A的比例为35％～25％，流动性B的比例为65％～75％；流速：0.2～0.4ml/min；柱温：25～35℃。检测器：选自紫外
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可见分光检测器、蒸发光散射检测器、电雾式检测器、质谱检测器中的一种。2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱选自Waters ACQUITY UPLC HSSC18、YMC Triart C18、Welch Ultimate XB
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C18、Welch Ultimate AQ
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C18、Welch UltimateUHPLC XB
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C18、Welch Xtimate C18、Waters Symmetry C18、Agilent ZORBAX SB
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C18、Thermo Acclaim C18、Thermo Hypersil GOLD C18、Waters ACQUITY UPLC BEH C18。3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相A为体积浓度为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈，洗脱梯度为：0分钟时，流动相A的比例为97％～93％，流动性B的比例为3～7％；2分钟时，流动性A的比例为97％～93％，流动性B的比例为3～7％；25分钟时，流动性A的比例为62％～58％，流动性B的比例为38～42％；35分钟时，流动相A的比例为32％～28％，流动性B的比例为68％～72％。4.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述洗脱梯度为：0分钟时，流动相A的比例为95％，流动性B的比例为5％；2分钟时，流动性A的比例为95％，流动性B的比例为5％；25分钟时，流动性A的比例为60％，流动性B的比例为40％；35分钟时，流动相A的比例为30％，流动性B的比例为70％。5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流速为0.3ml/min；和/或，柱温为30℃。6.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测器为质谱检测器，检测条件为：离子源：电喷雾离子源(HESI
‑Ⅱ
)；离子化模式：正负离子模式；扫描模式：Full MS/dd
‑
MS2；离子传输管温度：350℃～370℃；鞘气压力：35arb～50arb；辅助气压力：10arb～15arb；喷雾电压：3000V～3500V。7.如权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述质谱检测器检测条件为：离子源：电喷雾离子源(HESI
‑Ⅱ
)；离子化模式：正负离子模式；
扫描模式：Full MS/dd
‑
MS2；和/或，离子传输管温度：350℃；和/或，鞘气压力：35arb；和/或，辅助气压力：10arb；和/或，喷雾电压：3500V。8.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，从该组合物中分离鉴定出如下化合物中的一种或多种：甘草香豆酮、异补骨脂素、升麻素、珊瑚菜素、日本前胡醇、狭蓬芹内酯、当归酮、香柑内酯、1
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甲氧基菜豆素、羌活醇、花椒毒素、异茴芹灵、异佛手柑内酯、甘草香豆素、异欧前胡素、白花前胡甲素、蛇床子素、白当归素、白花前胡乙素、...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁红宝，姜宇珺，袁晓梅，张全彩，
申请(专利权)人：山东新时代药业有限公司，
类型：发明
国别省市：