新型冠状病毒抗原的检测试剂盒及应用、新型冠状病毒抗原的检测方法技术

本申请提供了一种新型冠状病毒抗原的检测试剂盒，包括捕获抗体、生物素标记的检测抗体、SARS

【技术实现步骤摘要】
新型冠状病毒抗原的检测试剂盒及应用、新型冠状病毒抗原的检测方法


[0001]本申请涉及医学生物领域，特别涉及新型冠状病毒抗原的检测试剂盒及应 用、新型冠状病毒抗原的检测方法。

技术介绍

[0002]新型冠状病毒(SARS
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CoV
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2)引发新型冠状病毒肺炎COVID
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19，是目前 已知的第7种可以感染人的冠状病毒。新型冠状病毒的检测对防控新型冠状病 毒肺炎有着至关重要的影响。
[0003]目前新型冠状病毒的检测方法主要是血清抗体检测和病毒核酸检测。病毒 特异性抗体一般在病毒入侵人体后约5天
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15天产生，无法在早期进行血清抗体 检测，且血清抗体检测存在严重的假阴性和假阳性结果；与此同时，新型冠状 病毒核酸检测剂盒的质量参差不齐，核酸检测稳定的可靠性比较差，核酸检出 率低，许多病例要重复2
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3次检测，但依然出现不少假阳性结果和假阴性结果。 因此，如何提高新型冠状病毒的早期检测率以及准确率，对于新型冠状病毒肺 炎的防控具有重要意义。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本申请提供了一种新型冠状病毒抗原的检测试剂盒，其检测限 低，能够在感染早期进行新型冠状病毒的检测，并且检测准确度高，可以实现 快速检测，有利于新型冠状病毒肺炎的防控。
[0005]第一方面，本申请提供了一种新型冠状病毒抗原的检测试剂盒，包括捕获 抗体、生物素标记的检测抗体、SARS
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CoV2 N蛋白标准品、酶标亲和素、显色 液和终止液，所述捕获抗体包括抗SARS
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CoV2 N蛋白捕获抗体，所述抗SARS
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CoV2 N蛋白捕获抗体的重链可变区的序列包括如SEQ ID NO：1所示的氨 基酸序列，轻链可变区的序列包括如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。
[0006]本申请提供的新型冠状病毒抗原的检测试剂盒能够对新型冠状病毒进行定 性、定量检测；基于抗原抗体相互作用，捕获抗体与待测样本之间进行结合， 以及待测样本与检测抗体之间进行结合，而酶标亲和素和生物素能够特异性结 合，从而形成“捕获抗体
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待测样本
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生物素标记的检测抗体
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酶标亲和素”复合 物，通过进行显色反应，从而可以对待测样本进行定性检测；进一步的，通过 采用特定序列的抗SARS
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CoV2 N蛋白捕获抗体作为捕获抗体，其能够特异性且 高效地与抗原结合，降低新型冠状病毒的检测限，提升线性检测范围，更有利 于该检测试剂盒的使用。
[0007]可选的，所述检测抗体为北京义翘神州科技股份有限公司的货号为 40143
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R040的兔抗SARS
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CoV2 N蛋白抗体。
[0008]可选的，所述SARS
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CoV2 N蛋白标准品为泰州市百英生物科技有限公司的 货号为B232004的N蛋白标准品。
[0009]可选的，所述新型冠状病毒抗原的检测试剂盒的最低检测限为46.8pg/mL。 本申请提供的新型冠状病毒抗原的检测试剂盒的检测限低，在新型冠状病毒达 到46.8pg/mL时即可检测到，从而有利于新型冠状病毒肺炎的防控。
[0010]可选的，所述新型冠状病毒抗原的检测试剂盒的线性范围为 93.74pg/mL
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1200pg/mL。本申请提供的新型冠状病毒抗原的检测线性范围广，准 确度高，可以应用于不同场景的新型冠状病毒的检测中。
[0011]可选的，所述检测试剂盒还包括洗涤液，所述洗涤液为含有吐温的磷酸盐 缓冲液。
[0012]可选的，所述检测试剂盒还包括封闭液，所述封闭液为含有牛血清白蛋白 和/或脱脂牛奶的磷酸盐缓冲液。采用上述封闭液能够有效地将检测孔中未包被 有捕获抗体的结合位点封闭起来，提高检测的准确度。
[0013]可选的，所述酶标亲和素包括过氧化物酶标记的亲和素。进一步的，所述 酶标亲和素包括辣根过氧化物酶标记的亲和素。更进一步的，所述酶标亲和素 包括辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素。
[0014]可选的，所述显色液包括3,3',5,5'
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四甲基联苯胺(TMB)溶液。在过氧化物 酶的作用下，TMB溶液的颜色发生变化，从而可以根据TMB溶液是否发生变色， 以及变色前后溶液的吸光度，从而对待测样本中的新型冠状病毒进行定性、定 量检测。
[0015]可选的，所述终止液包括硫酸溶液。通过加入硫酸溶液可以破坏酶标亲和 素中酶分子的活性，从而停止酶分子与显色液之间的显色反应，保证检测结果 的准确性。
[0016]本申请提供的新型冠状病毒抗原的检测试剂盒的检测限低，能够在感染早 期对新型冠状病毒进行检测，从而可以有效防控新型冠状病毒肺炎，同时该检 测试剂盒能够对新型冠状病毒准确检测，避免假阳性和假阴性现象，并且检测 迅速，有利于其应用。
[0017]第二方面，本申请提供了第一方面所述的新型冠状病毒抗原的检测试剂盒 在不以疾病诊断和/或治疗为目的的新型冠状病毒抗原的检测中的应用。
[0018]本申请提供的新型冠状病毒抗原的检测试剂盒可以用于不以疾病诊断和/或 治疗为目的的新型冠状病毒抗原的检测中，如对环境中新型冠状病毒抗原进行 检测，从而判断环境是否安全，有利于新型冠状病毒肺炎的防控。
[0019]第三方面，本申请提供了一种不以疾病诊断和/或治疗为目的的新型冠状病 毒抗原的检测方法，包括采用第一方面所述的新型冠状病毒抗原的检测试剂盒 检测新型冠状病毒抗原。
[0020]可选的，所述检测方法包括：
[0021]将所述捕获抗体分散至磷酸盐缓冲液，得到捕获抗体溶液，将所述生物素 标记的检测抗体分散至磷酸盐缓冲液，得到检测抗体溶液；
[0022]将所述捕获抗体溶液加入至检测孔中，以使所述捕获抗体包被在所述检测 孔内；
[0023]将预处理后的待测样本加入至所述检测孔中孵育，然后进行清洗；
[0024]将所述检测抗体溶液加入至所述检测孔中孵育，然后进行清洗；
[0025]向所述检测孔中加入所述酶标亲和素后，再加入显色液进行显色反应，之 后加入所述终止液终止所述显色反应；
[0026]根据所述检测孔的颜色变化进行定性检测，和/或测量所述检测孔的OD
450
值并与
标准曲线进行比较，获得所述待测样本中新型冠状病毒抗原的浓度。
[0027]进一步的，所述标准曲线的制作包括：
[0028]将所述捕获抗体包被在多个所述检测孔内；
[0029]将所述SARS
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CoV2 N蛋白标准品稀释，形成多个不同浓度的SARS
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CoV2 N 蛋白溶液，将所述多个不同浓度的SARS
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CoV2 N蛋白溶液分别加入至不同的所 述检测孔中，然后进行清洗；
[003本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新型冠状病毒抗原的检测试剂盒，其特征在于，包括捕获抗体、生物素标记的检测抗体、SARS
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CoV2 N蛋白标准品、酶标亲和素、显色液和终止液，所述捕获抗体包括抗SARS
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CoV2 N蛋白捕获抗体，所述抗SARS
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CoV2 N蛋白捕获抗体的重链可变区的序列包括如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，轻链可变区的序列包括如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的新型冠状病毒抗原的检测试剂盒，其特征在于，所述检测抗体为北京义翘神州科技股份有限公司的货号为40143
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R040的兔抗SARS
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CoV2 N蛋白抗体，所述SARS
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CoV2 N蛋白标准品为泰州市百英生物科技有限公司的货号为B232004的N蛋白标准品。3.如权利要求1所述的新型冠状病毒抗原的检测试剂盒，其特征在于，所述新型冠状病毒抗原的检测试剂盒的最低检测限为46.8pg/mL，线性范围为93.74pg/mL
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1200pg/mL。4.如权利要求1所述的新型冠状病毒抗原的检测试剂盒，其特征在于，所述酶标亲和素包括过氧化物酶标记的亲和素，所述显色液包括3,3',5,5'
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四甲基联苯胺，所述终止液包括硫酸溶液。5.如权利要求1
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4任一项所述的新型冠状病毒抗原的检测试剂盒在不以疾病诊断和/或治疗为目的的新型冠状病毒抗原的检测中的应用。6.一种不以疾病诊断和/或治疗为目的的新型冠状病毒抗原的检测方法，其特征在于，包括采用如权利要求1
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4任一项所述的新型冠状病毒抗原的检测试剂盒检测新型冠状病毒抗原。7.如权利要求6所述的新型冠状病毒抗原的检测方法，其特征在于，包括：将所述捕获抗体分散至磷酸盐缓冲液，得到捕获抗体溶液，将所述生物素标记的检测抗体分散至磷酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：万晓春，黄明，谭巧乐，李俊鑫，
申请(专利权)人：深圳宾德生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：