一种生产、纯化RSPO1细胞因子方法技术

本申请提供一种生产RSPO1细胞因子的方法，该方法包括：培养过表达RSPO1细胞因子的稳转细胞系。本发明专利技术具备以下优点：本发明专利技术以PCDNA3.1为真核表达载体构建的，突破传统病毒载体构建的方法，在非病毒培养的实验室环境下就可以操作，操作简便、安全、生产周期短。本发明专利技术中生产的RSPO1蛋白不是融合蛋白保证了RSPO1蛋白分子量的稳定，本发明专利技术中生产的RSPO1蛋白经过两步纯化后，获得RSPO1蛋白浓度更高纯度更大。纯度更大。

【技术实现步骤摘要】
一种生产、纯化RSPO1细胞因子方法


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种生产、纯化RSPO1细胞因子方法。

技术介绍

[0002]干细胞的研究对于未来人类健康应用意义重大，在过去十年，干细胞研究领域取得的关键进展之一就是类器官体系的发展。类器官属于三维(3D)细胞培养物，其表面标志物及细胞结构与同源成体器官相同，同时由于类器官的三维结构，相较传统二维平面细胞结构，研究类器官，更能代表体内的器官细胞相互作用，故类器官的研究对人体组织修复，逆转衰老及个性化药物筛选等多个领域有着重要的意义。
[0003]然而，不同的组织需要含有特定生长因子的细胞培养基，其中RSPO1细胞因子作为WNT信号通路的一员，在类器官发育过程中必不可少，同时对于肠道干细胞的功能和肠上皮的再生至关重要。
[0004]市面上RSPO1蛋白产品多为融合蛋白，蛋白上带有一个绿色荧光蛋白并不纯净，且种属上多为人鼠共用，没有较为纯净的人源性RSPO1蛋白。

技术实现思路

[0005]因此，本专利技术要解决的技术问题在于克服现有技术中的RS本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生产RSPO1细胞因子的方法，其特征在于，该方法包括：培养过表达RSPO1细胞因子的稳转细胞系。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括将编码RSPO1细胞因子的序列克隆入真核表达载体，形成重组真核表达载体；重组真核表达载体转入宿主细胞中，形成稳转细胞系。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述RSPO1细胞因子的C端连接标签蛋白。4.根据权利要求1
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3任一所述的方法，其特征在于，所述标签蛋白为3xFLAG标签。5.根据权利要求2
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4任一所述的方法，其特征在于，所述真核表达载体为pcDNA3.1。6.根据权利要求2
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5任一所述的方法，其特征在于，所述宿主细胞为HEK293细胞。7.根据权利要求1
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6任一所述的方法，其特征在于，培养过表达RSPO...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘源，
申请(专利权)人：深圳贝蒂斯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：