黄杆菌S3及其应用制造技术

本发明专利技术公开了黄杆菌（Xanthobacteraceae bacterium）S3及其应用，所述黄杆菌（Xanthobacteraceae bacterium）S3已于2022年5月27日保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏编号为CCTCC NO:M 2022743。本发明专利技术黄杆菌（Xanthobacteraceae bacterium）S3从水下苦草根系筛选而来，适应水下沉积环境的同时，可高效降解多环芳烃，在pH7.0，盐度为0，温度28.5℃的条件下，一周内可将1 mg/L的芘降解90.26%，在沉积物多环芳烃污染修复中有较好的应用前景。应用前景。

【技术实现步骤摘要】
黄杆菌S3及其应用


[0001]本专利技术属于生物工程和环境修复
，具体涉及了黄杆菌S3及其应用。

技术介绍

[0002]多环芳烃是煤、石油、木材、烟草等不完全燃烧时产生的挥发性碳氢化合物，随着工业的迅猛发展，环境中的多环芳烃浓度不断增加，对环境及食品安全存在重大的威胁。陆地、空气中的多环芳烃通过地表径流、大气沉降等各种方式进入河流及湖泊，最终沉积在底泥中，而湖泊、河流底泥作为多环芳烃最大的储库却缺少关注，大部分研究仍集中在地表。
[0003]多环芳烃的处理方式多样，包括加热、絮凝沉淀、吸附等物理方式，光氧化、试剂氧化等化学方式，从经济成本、环境友好方面考虑，微生物降解仍是一种很有前途的PAHs去除方式。目前已发现100多个属的细菌具有降解PAHs的能力，包括。但大部分微生物取样生境限于农田、工厂周边及污水处理厂等较为特殊且多环芳烃浓度较高的场所，筛选而来的大部分细菌对多环芳烃的高效降解作用仅限于实验室中，实际环境中的作用不尽人意。而湖泊、河流等水生环境同人类生活密切相关，嫌少研究关注到淡水水生环境沉积物中的多环芳烃降解及生物修复。
[0004]已有研究表明南方湖泊中常见的苦草对多环芳烃具有良好的降解作用，根系群落与苦草愈相近的沉水植物对多环芳烃的降解作用俞强。针对湖泊底泥中日益增加的多环芳烃浓度，寻找适应普通湖泊底泥环境，并对多环芳烃具有降解作用的微生物，成为生物修复沉积物重要的一环。

技术实现思路

[0005]专利技术目的：本专利技术所要解决的技术问题是提供了适应沉水植物苦草根际环境的可降解多环芳烃的菌株黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3及其应用。
[0006]技术方案：为了解决上述技术问题，本专利技术提供了黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3，所述黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3已于2022年5月27日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M 2022743，保藏地址为：中国武汉武汉大学，邮编：430072，本专利技术的黄杆菌是从苦草根际底泥中筛选而来，其适应底泥环境的同时，可降解多环芳烃的功能性降解菌。
[0007]本
技术实现思路
还包括黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3的培养方法，将黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3通过LB培养基培养避光振荡培养，pH为5～9，培养温度为25～40℃，盐度为0.1
‑
5％。
[0008]其中，所述pH为7，温度为37℃，盐度为0.1
‑
1％。
[0009]其中，所述培养基中还包括芘溶液。
[0010]本
技术实现思路
还包括所述的黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3在降解多环芳烃中的应用。
[0011]其中，所述多环芳烃为芘。
[0012]其中，所述芘浓度为1
‑
200mg/L。
[0013]所述应用的条件为：培养温度为25～40℃，pH为5～7，盐度为0～1.5％。
[0014]本
技术实现思路
还包括一种降解污染物芘的方法，包括以下步骤：
[0015]1)将黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3通过LB培养基培养至浑浊后，于无菌离心管中，离心后用基础盐培养基清洗，用基础盐培养基稀释混匀制备的菌液；
[0016]2)取芘溶液于灭菌的试管中，待丙酮挥发后，加入基础盐培养基，调节pH5～7与NaCl％为0～1.5％，高温灭菌后，加入步骤1)制备的菌液中，在25～40℃暗处培养1～28天。
[0017]其中，所述基础盐培养基包括磷酸氢二钠，磷酸二氢钾，硫酸铵，氯化镁，四水钙盐和微量元素。
[0018]其中，所述方法通过建立回归模型确定黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3的最佳芘降解条件，所述回归模型为：
[0019]Y(％)＝85.59
‑
5.47A
‑
6.47B
‑
21.80C
‑
4.60AB
‑
4.85AC+7.52BC+0.2662A2‑
5.19B2‑
32.09C2。
[0020]有益效果：与现有菌株相比，本次筛选出来的菌株的优点是：黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3从水下苦草根系筛选而来，适应水下沉积环境的同时，可高效降解多环芳烃，在pH7.0，盐度为0，温度28.5℃的条件下，一周内可将1mg/L的芘降解90.26％，在沉积物多环芳烃污染修复中有较好的应用前景。
附图说明
[0021]图1为S3菌株在不同盐度(a)、pH(b)和温度(c)条件下的生长曲线；
[0022]图2为反应各因素交互作用对S3菌株降解率影响的响应面曲线。
具体实施方式
[0023]下面通过具体的实施例对本研究进一步说明，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离实验原理的前提下，还可以做出若干变型和改进。
[0024]实施例1黄杆菌S3的筛选过程
[0025]1、培养基：
[0026]A.LB培养基(g/L)：酵母提取物5，胰蛋白胨10，NaCl 10，琼脂15，pH＝7.0
[0027]B.基础盐培养基(g/L)：磷酸氢二钠2.8，磷酸二氢钾1.0，硫酸铵0.5，氯化镁0.053，四水钙盐0.05，微量元素1mL
[0028]C微量元素(g/L)：EDTA0.5，硫酸亚铁0.2，七水硫酸锌0.01，四水氯化锰0.003，硼酸0.03，六水氯化钴0.02，二水氯化铜0.001，六水氯化镍0.002，二水硼酸钠0.003
[0029]D.筛选培养基(g/L)：在基础盐培养基中加入20g
·
L
‑1的琼脂粉制成平板，后均匀涂抹8mg/mL芘溶液(溶于丙酮)
[0030]所有培养基均用去离子水配制，0.1MPa，121℃灭菌15分钟，冷却后备用。
[0031]2、初筛方法如下：取采集到的苦草根际底泥10g，放入含400mg/L芘的基础盐培养基100mL，在摇床上进行培养20d；静置20min后，取1ml上清液，于9ml灭菌水中，混匀制成底泥菌悬液，后依次取1ml稀释液加入不同体积的无菌水中，分别制成0.01，0.001，0.0001，0.00001，0.000001不同稀释度的底泥溶液，各取100μL进行涂布或平板划线，30℃暗处培育
2
‑
3周。该方法获得具有在高浓度芘存活的菌株10株，其中能在筛选培养基中形成明显菌斑的菌株有6株。
[0032]为了进一步检查菌株降解多环芳烃芘的能力，将初筛中选取的6株可降解多环芳烃的菌株，接入含有唯一碳源芘的基础盐培养基中(5m本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3，其特征在于，所述黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3已于2022年5月27日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M 2022743。2.权利要求1所述的黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：将黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3通过LB培养基培养避光振荡培养，pH为5～9，培养温度为25～40℃，盐度为0.1
‑
5％。3.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述培养基中还包括芘溶液。4.权利要求1所述的黄杆菌(Xanthobacteraceae bacterium)S3在降解多环芳烃中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述多环芳烃为芘。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述芘浓度为1
‑
200mg/L。7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述应用的条件为：培养温度为25～40℃，pH为5～7，盐度为0～1.5％。8.一种降解污染物芘的方法，其特征在于，包括以...

【专利技术属性】
技术研发人员：李海普，葛焕英，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：