一种具有激活哺乳动物干细胞分化功能的菌株、组合物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种具有激活哺乳动物干细胞分化功能的菌株、组合物及其应用。本发明专利技术菌株生物活性高，酸性pH耐受力强，来源于人或小鼠等哺乳动物胃肠道微生物。干细胞实验测定显示，该菌株对干细胞进行干预后，干细胞明显分化。在动物伤口愈合能力测定实验中，该菌株可明显增强伤口愈合能力。此外，该菌株能够耐受胃肠道环境，可用于制备诱导干细胞分化的功能性菌剂、食品和药物，具有广泛的应用前景。具有广泛的应用前景。具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种具有激活哺乳动物干细胞分化功能的菌株、组合物及其应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体地涉及一种具有激活哺乳动物干细胞分化功能的菌株、组合物及其应用。

技术介绍

[0002][0003]干细胞治疗是一项具有引领性、突破性、颠覆性的生物技术，是一场新的医疗革命。干细胞具有多向分化的潜能，可定向分化产生某种特定细胞。利用干细胞的生物学特性，将衰老受损的组织细胞替换为健康的组织细胞，恢复其正常功能，进而重获年轻和健康。所以无论是从人类健康发展的角度，还是从疾病研究和治疗的角度，诱导干细胞分化的研究都具有重要意义。目前传统的干细胞疗法通常具有以下几类弊端：1)目前干细胞诱导分化治疗主要是通过从病人体内提取干细胞，因为干细胞含量非常低，所以分离纯化困难，另外提取干细胞对患者来说通常伴有一定的伤害。2)移植干细胞会产生相关的并发症比如感染、出血等。3)定向诱导干细胞分化的外源性刺激因子，可能会对人体产生很强的副作用。4)由于操作方式复杂，导致价格昂贵。

技术实现思路

[0004]本专利技术目的在于克服现有干细胞疗法中的不足之处，提供一种源于人体自身携带微生物具有刺激干细胞分化功能的菌株及其应用，该菌株具有诱导干细胞分化的能力、有良好酸性pH忍耐力、操作简单、安全高效。实现上述目的所采用的技术方案是：
[0005]一种具有激活哺乳动物干细胞分化功能的菌株，所述菌株为酵母菌，名称为：皮托假丝酵母，其拉丁名为Torulopsis pintolopesii、Candida pintolopesii或Kazachstania pintolopesii。
[0006]进一步地，所述菌株来源于人体或小鼠自身胃肠道的微生物，具有诱导干细胞分化的的特性。所述菌株在较低pH(2～5)下仍生长良好，具有较强的酸性能耐力。所述菌株从小鼠或人胃体内、体表、排泄物以及环境中菌群中筛选分离得到。
[0007]本专利技术提供上述菌株在制备用于促进干细胞分化的干细胞疗法相关产品/微生物制剂/发酵制品/保健食品/药品中的应用。
[0008]进一步地，所述应用中的该菌株可为活菌株、灭火菌株干菌株、菌株代谢物、菌株裂解物或菌株后生元中的一种或多种。
[0009]进一步地，所述应用中还包括其他任意微生物。
[0010]进一步地，所述应用中的制品为酵素、固体饮料、丸剂、片剂或微胶囊晶球中的任意一种。
[0011]进一步地，所述制品的剂型为包括片剂、胶囊剂、滴剂、口服液或冻干制剂中的一种或几种口服制剂。
[0012]进一步地，所述制品的剂型包括药学上可接受的载体，包括但不限于：填充剂、润湿剂、崩解剂、粘合剂或润滑剂中的一种或多种。
[0013]进一步地，所述制品的状态包括乳剂、油剂、胶剂、糊剂、粉末、滑石粉、洗液、蛋奶糊、泡沫、奶油、凝胶、软膏、悬浮液、气雾剂、蒸气剂、冷冻液体剂、喷雾剂或薄雾剂中的一种或多种。
[0014]本专利技术取得的优点和积极效果为：
[0015]本专利技术菌株来源于人或小鼠等哺乳动物胃肠道微生物，相比于传统干细胞疗法，操作简单、无伦理问题、无毒副作用，对推动干细胞疗法产品的开发及工业化生产具有积极的意义。细胞实验结果显示，该菌株或其分泌物能明显诱导干细胞分化。动物实验结果显示，该菌株或其分泌物能明显加强伤口愈合的速度。可用于制备诱导干细胞分化的功能性菌剂、食品和药物，具有广泛的应用前景。
附图说明
[0016]图1为本专利技术中优选实施例菌株的显微镜下图像；
[0017]图2为本专利技术中优选实施例菌株的发育进化树；
[0018]图3为本专利技术中优选实施例菌株对肠道干细胞影响图；
[0019]图4为本专利技术中优选实施例菌株对胰腺干细胞影响图；
[0020]图5为本专利技术中优选实施例菌株对脂肪间充质干细胞影响图；
[0021]图6为本专利技术中优选实施例菌株对老鼠伤口愈合能力影响图。
具体实施方式
[0022]下面详细叙述本专利技术的实施例，需要说明的是，本实施例是叙述性的，不是限定性的，不能以此限定本专利技术的保护范围。
[0023]本专利技术中所使用的原料，如无特殊说明，均为常规的市售产品；本专利技术中所使用的方法，如无特殊说明，均为本领域的常规方法。
[0024]本专利技术公开了一种具有激活哺乳动物干细胞分化功能的菌株及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。
[0025]下面结合附图与实施例，进一步阐述本专利技术，但本专利技术不局限于具体实施例：
[0026]实施例1
[0027]菌株筛选：
[0028]自然条件下获取所述菌株：将小鼠粪便与PBS以质量比为1:10的比例于无菌环境下装于无菌瓶中，震荡混匀。取1mL混合液，10倍系列稀释至10
‑4，每个浓度取100μL涂布于含AMP的琼脂糖选择培养基上，进行常规培养，并每隔12h进行观察，37℃条件下培养48
‑
60h直至长出单菌落。用灭菌后的枪头挑取酵母形态的单菌落，多次划线接种于含AMP的琼脂糖固体培养基上进行复筛，培养48h，长出单菌落后在显微镜下进行形态学观察，挑选具有椭圆形、球形等具有显著酵母菌特征的菌株。
[0029]实施例2
[0030]菌株鉴定：
[0031]根据实施例1获得的菌株，鉴定方法如下：
[0032]对获得的单菌株进行基因组的提取和PCR扩增，并将PCR扩增产物测序。所述菌株的18S rDNA基因序列进行NCBI BLAST比对，与GenBank数据库中的基因序列进行同源性比较，相似度97.98％，鉴定该菌株为皮托假丝酵母。
[0033]经过基因比对，结合对菌株进行形态学观察、生理生化测试，鉴定为皮托假丝酵母，并对该菌株进行生物学性质的研究。如图1、2为菌株显微镜下图像及进化图谱。
[0034]实施例3
[0035]所述菌株对干细胞分化能力的影响：
[0036]所述菌株以起始OD600＝0.2开始培养，恒温培养48h后，分离菌株及培养液，过滤获得所述菌株培养液。提取并培养肠道干细胞，在维持细胞干性(不能使其分化)的培养条件下进行培养，细胞稳定后，肠道干细胞随机分成参照组、实验组。实验组按5％的比例加入菌株培养液，放入37℃恒温培养箱培养48h。
[0037]实验数据表明，加入所述菌株培养液的实验组内干细胞发生明显分化，参照组内干细胞维持干性的状态，没有发生任何变化。说明，所述菌株或其培养液具有可以明显增强干细胞分化能力的作用，图3为所述菌株对肠道干细胞的影响图。
[0038]同样的操作方法，对胰腺干细胞、间充质干细胞进行测定，如图4、5所示。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有激活哺乳动物干细胞分化功能的菌株，其特征在于，所述菌株为皮托假丝酵母，其拉丁名为Torulopsis pintolopesii、Candida pintolopesii或Kazachstania pintolopesii。2.如权利要求1所述的具有激活哺乳动物干细胞分化功能的菌株，其特征在于，所述菌株的18S rRNA基因序列如Seq
‑
1所示。3.如权利要求1所述的具有激活哺乳动物干细胞分化功能的菌株，其特征在于，所述菌株从小鼠或人胃体内、体表、排泄物以及环境中菌群中筛选分离得到。4.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括如权利要求1～3任一项所述的菌株，所述菌株为干菌株、灭活菌株、菌株代谢产物、菌株裂解物或菌株后生元中的一种或多种。5.如权利要求1～3任一项该菌株或如权利要求4所述的组合物在制备微生物制剂/干细胞疗法制备产品/发酵制品/美容保健产品/功能性产品/药品中的应用。6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述微生物制剂为酵素、固体饮料、丸剂、片剂或微胶囊晶球中的任意一种或多种。7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述微...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁辰，盛韧，高艺洳，郑少钦，
申请(专利权)人：盛韧，
类型：发明
国别省市：