一株四乙酰植物鞘氨醇高产诱变菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株高产四乙酰植物鞘氨醇的季也蒙迈耶氏酵母诱变菌株及其应用。本发明专利技术产TAPS季也蒙迈耶氏酵母诱变菌株mSCU

【技术实现步骤摘要】
一株四乙酰植物鞘氨醇高产诱变菌株及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一株高产四乙酰植物鞘氨醇的季也蒙迈耶氏酵母诱变菌株及其应用。

技术介绍

[0002]四乙酰植物鞘氨醇（TAPS）是一种广泛存在于动植物、真菌、原核动物细胞膜的鞘脂类物质。TAPS在体外可刺激葡糖苷神经酰胺的合成，葡糖苷神经酰胺具有保护功能，有助于加强皮肤屏障功能，抑制炎症、抑制血管生成，淡化黑眼圈。TAPS溶解性良好，可与多种化妆品原料复配，适用于抗老、修护以及眼霜等产品。此外，植物鞘氨醇可以用作起始原料合成神经酰胺，因此TAPS还可转化为更具商业价值的其他产物，同时也可直接作为有效成分参与化妆品、护肤品的制作。
[0003]目前制备TAPS的途径包括化学合成及从天然来源物质分离纯化等，但化学及分离纯化合成TAPS极其昂贵且产量低，合成的TAPS不能用于食品以及化妆品，且难以大规模应用，逐渐被生物发酵法所替代，但是菌株的产量一直限制TAPS的发酵生产，因此获得一株高产TAPS的菌株尤为重要。
[0004]常压室温等离子体（atmospheric and room temperature plasma，ARTP）诱变系统指能够在大气压下产生温度在25～40℃之间、具有高活性粒子浓度的等离子体射流，通过照射使生物细胞壁、细胞膜的结构及通透性发生改变，进一步引起核酸损伤，最终产生可稳定遗传的变异体。ARTP通过高活性粒子可改变微生物核苷酸结构进而诱变得到目的细胞产物，使突变株具有良好稳定性，无需真空装置，操作简单。由于其能够在短时间内获得大量突变菌株，近几年其在微生物突变育种领域中引起人们越来越多的注意，已成为获得高得率菌株的有效方法。
[0005]本专利技术首次筛选了一株产TAPS的季也蒙迈耶氏酵母，并通过ARTP诱变技术选育得到了高产TAPS菌株，可获得更高的TAPS产量，目前未见该菌株在发酵生产四乙酰植物鞘氨醇（TAPS）方面的公开报道，同时，通过诱变获得的高产菌株，能应用于TAPS的规模化发酵生产，对四乙酰植物鞘氨醇（TAPS）的工业化生产具有广泛的应用价值和重要的商业开发意义。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一株高产四乙酰植物鞘氨醇的季也蒙迈耶氏酵母诱变菌株，该菌株通过筛选、ARTP诱变技术选育得到，将其应用于TAPS的生物发酵，可获得更高的TAPS产量，从而实现TAPS的规模化工业生产。
[0007]本专利技术的目的通过以下技术方案实现：本专利技术提供一株季也蒙迈耶氏酵母（Meyerozyma guilliermondii）mSCU
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JM06
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8，该菌株已于2021年09月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101），
保藏编号为CGMCC No.23507。
[0008]本专利技术是以采集自四川某酒厂酒窖中的窖泥，筛选到一株产TAPS的季也蒙迈耶氏酵母SCU
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JM06为起始菌株，利用常压室温等离子体（atmospheric and room temperature plasma，ARTP）对菌株进行诱变，经过3轮筛选获得1株高产TAPS的优秀诱变菌，即季也蒙迈耶氏酵母（Meyerozyma guilliermondii）mSCU
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JM06
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8，该菌株摇瓶发酵48h的TAPS产量可达659.96 mg/L，较出发菌株提高了400.33%；5L发酵罐发酵TAPS产量可达1070.86 mg/L，较出发菌株提高了495.97%。
[0009]本专利技术季也蒙迈耶氏酵母mSCU
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JM06
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8在琼脂培养基上生长良好，菌落形态为表现为圆形微凸、边缘光滑粘稠、湿润易挑起的奶白色菌落。菌株细胞均具有典型的酵母形态特征，细胞形态为圆形，生殖方式为出芽生殖。
[0010]本专利技术选育的季也蒙迈耶氏酵母mSCU
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JM06
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8，通过以18S
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ITS1和18S
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ITS4为引物对其18S rDNA进行PCR扩增，得到有572个碱基对（bp）组成的目的基因序列，如SEQUENCE LISTING 所示。菌株mSCU
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JM06
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8的18S rDNA序列经NCBI BLAST对比，其与MEGA
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X构建菌株的系统进化树中的Meyerozyma guilliermondii strain KAML05基因同源性相似度达 99%，可鉴定该菌株为季也蒙毕赤酵母（Meyerozyma guilliermondii）。
[0011]与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：1、本专利技术为首次筛选了一株产TAPS的季也蒙迈耶氏酵母，并通过ARTP诱变技术选育得到了能够稳定遗传的高产TAPS菌株，可获得更高的TAPS产量，从而实现TAPS的规模化工业生产。
[0012]2、本专利技术选育的季也蒙迈耶氏酵母mSCU
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JM06
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8菌株的摇瓶发酵四乙酰植物鞘氨醇（TAPS）产量可达659.96 mg/L，较出发菌株提高了400.33%；5L发酵罐发酵TAPS产量可达1070.86 mg/L，较出发菌株提高了495.97%。利用该菌株进行生物发酵，对四乙酰植物鞘氨醇（TAPS）的工业化生产具有广泛的应用价值和重要的商业开发意义。
[0013] 保藏说明菌种名称：季也蒙迈耶氏酵母拉丁名：Meyerozyma guilliermondii菌株编号：mSCU
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JM06
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8保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏机构简称：CGMCC地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101保藏日期：2021年09月29日保藏中心登记入册编号：CGMCC No.23507。
附图说明
[0014]图1为产TAPS出发菌株SCU
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JM06的细胞显微形态与菌落形态。
[0015]图2为产TAPS出发菌株SCU
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JM06的生长曲线。
[0016]图3 A为不同ARTP诱变时间下菌株的致死率曲线；B为对照组菌液平板涂布图；C为诱变90s菌液平板涂布图；D为诱变120s菌液平板涂布图；E为诱变180s菌液平板涂布图。
[0017]图4为出发菌株SCU
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JM06与诱变菌株mSCU
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JM06
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8摇瓶发酵48h的TAPS产量比较
图。
[0018]图5为诱变菌株mSCU
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JM06
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8的遗传稳定性检测曲线图。
[0019]图6 A为诱变菌株mSCU
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株高产四乙酰植物鞘氨醇的季也蒙迈耶氏酵母（Meyerozyma guilliermondii）mSCU
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JM06
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8，其特征在于：所述季也蒙迈耶氏酵母于2021年9月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23507。2. 权利要求1所述的季也蒙迈耶氏酵母（Meyerozyma guilliermondii）mSCU
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JM06
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8在发酵生产四乙酰植物鞘氨醇TAPS中的应用。3. 如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的季也蒙迈耶氏酵母（Meyerozyma guilliermondii）mSCU
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JM06
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8，采集自酒窖中的窖泥，为经过3轮诱变筛选得到，该菌株在TAPS发酵培养基中，28℃，180
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200r/min摇瓶培养48h，TAPS产量为659.96 mg/L。4. 如权利要求3所述的应用，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵建，王文杰，彭凌霄，彭洋，
申请(专利权)人：重庆传翀科技有限公司，
类型：发明
国别省市：