一株降解粪臭素的橄榄不动杆菌AO-06及其应用制造技术

本发明专利技术涉及降解粪臭素的橄榄不动杆菌AO

【技术实现步骤摘要】
一株降解粪臭素的橄榄不动杆菌AO
‑
06及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物技术治理环境污染
，特别是一种降解粪臭素的橄榄不动杆菌AO
‑
06及其应用。

技术介绍

[0002]随着经济发展和民众生活水平的不断提高，我国畜牧业发展迅速。近年来，我国畜牧业逐渐向规模化方向发展，畜禽存栏与出栏量稳步提高；在满足居民对肉、蛋、奶的需求基础上，大量排放的粪污与恶臭愈演愈烈，恶臭治理已经成为畜禽、水产养殖、垃圾处理厂，污水处理厂行业面临的主要挑战。
[0003]3‑
甲基吲哚(C9H9N)，俗称粪臭素(3MI)，是一种典型的氮杂环芳香化合物。可溶于有机溶剂，难溶于水，具有双环结构，是色氨酸的主要代谢产物之一，属于吲哚衍生物。粪臭素是一种存在于动物粪便、甜菜根、蜜腺樟木、煤焦油中的天然物质，也是合成食品添加剂、农用化学品和工业化学品的重要前体。在人类和动物的肠道和粪便、猪粪、活性污泥、市政和工业废水以及水产养殖水中检测到相当数量的粪臭素。粪臭素，被认为是畜禽排放的三大有害臭味物质之一，具有强烈的粪臭气味，嗅阈值低于0.003mg/m3，在浓度极低的情况下仍可被人和畜禽感知。除了恶臭之外，粪臭素会对人和动物健康造成伤害：其可引起牛羊急性肺水肿和肺气肿；引起人神经内分泌功能和免疫功能病变，具有呼吸道细胞致畸致癌风险；粪臭素还被认为是一种吸引蚊子、苍蝇和甲虫的诱食剂，可促进昆虫传播疾病的传播。因此解决粪臭素环境污染具有重要意义。
[0004]目前采取的物理吸附法，化学氧化法有一定去3
‑
甲基吲哚效果，但物理吸附法成本高、能量消耗大、且容易受坏境影响，化学氧化法除有上述缺点外还易形成二次污染。生物降解法可有效解决上述问题，故而受到了越来越多的关注。从1968年Fujioka等发现某革兰氏阳性细菌能够将粪臭素氧化为2
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oxo
‑3‑
甲基
‑3‑
羟基吲哚开始，关于粪臭素降解细菌的报道有数十个，如厌氧环境下马来提名梭菌(Clostridium malenominatum)A
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3；硫还原条件下产甲烷菌群和氧限制条件下恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)LPC24等；好氧菌如乳酸菌(Lactobacillus brevis)，沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)WKU
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KDNS3，不动杆菌(Acinetobacter toweneri)NTA1
‑
2A和(Acinetobacter gullouiae)TAT1
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6，伯克霍尔德菌(Burkholderia sp.)IDO3，红球菌(Rhodococcus sp.)DMU1和Rhodococcus pyridinivorans Rp3等。现报道的菌株或是难以甚至无法降解高浓度的粪臭素，总的来看，这些菌株降解粪臭素耗时长、降解浓度偏低，获得对高浓度粪臭素具有高效快速降解能力的菌株仍然是畜禽粪便处理和环境治理的首要任务，短时间内完全降解3
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甲基吲哚；或是生长条件严格，无法用于实际生产，达不到高效降解的要求。因此，筛选新的高效降解粪臭素菌种依然必要。
[0005]除臭剂因其既可以通过喷洒去除面源恶臭，又可以处理集中收集的恶臭气体，在恶臭(异味)控制领域得到广泛应用。但是，目前市场上销售的除臭剂，或者已公开的除臭剂专利，大多是利用除臭剂的浓郁芳香掩盖恶臭，并未去除致臭化合物；部分除臭剂利用次氯
酸钠、过氧化氢/酸性/二价铁离子等强氧化性体系，通过激烈的化学反应去除致臭化合物，这种除臭剂通常价格较高，且长期使用会腐蚀设备，同时除臭剂中通常需要添加一些稳定剂以保证体系稳定性。此外，这些除臭剂对于含硫类等主要致臭化合物的去除效率通常只有80
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90％，而且还不适用于跟人体直接接触的面源恶臭控制场合，达不到健康环保的要求。因此，专利技术一种无副作用，无二次污染，降解粪臭素效果好，安全环保，进而大大改善环境质量的除臭制剂势在必行。

技术实现思路

[0006]针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种降解粪臭素的橄榄不动杆菌AO
‑
06及其应用，可有效解决粪臭素高效降解的问题。
[0007]本专利技术解决的技术方案是，本专利技术所述的橄榄不动杆菌AO
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06，其分类命名为橄榄不动杆菌AO
‑
06(Acinetobacter oleivorans)，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.24972，保藏日期为2022年5月26日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，该菌株的16S rDNA基因序列如SEQ ID NO.1所示。
[0008]所述的橄榄不动杆菌AO
‑
06在降解粪臭素中的应用。
[0009]所述的橄榄不动杆菌AO
‑
06在制备高效降解粪臭素的微生物环保菌剂中的应用。
[0010]所述的橄榄不动杆菌AO
‑
06微生物环保菌剂的制备方法，包括以下步骤：
[0011]1)种子液的制备：取平板上活化好的AO
‑
06菌株一环，接种到含已灭菌的100ml液体种子培养基的250ml三角瓶中，置全温摇床培养箱中，26
‑
35℃、140
‑
180r/min培养36
‑
48h，再接种到含150ml的液体种子培养基的500ml培养基中进行培养，26
‑
35℃、140
‑
180r/min培养36
‑
48h，经检测，此时种子液的活菌数大于等于1
‑2×
109CFU/ml，即制得种子液；
[0012]2)发酵液的制备：按10
‑
15％接种量将步骤1)中得到的种子液转接到含500ml的发酵培养基的1L三角瓶中，培养温度26
‑
35℃，转速140
‑
180r/min，pH自然，培养时间36
‑
48h，然后转到50L全自动发酵罐放大培养，发酵培养过程中的罐压维持在0.03
‑
0.05MPa；培养过程中通入无菌空气，培养温度为26℃
‑
35℃，转速为200
‑
300r/min，时间为25
‑
48h，经检测，此时菌液活菌数大于等于1
‑2×
109CFU/ml的发酵培养物即为微生物环保菌剂。
[0013]所述的步骤1)中，液体种子培养基组成为：蔗糖4.0g/L，胰蛋白胨8.0g/L，酵母粉4.0g/L，硫酸铵1.0g/L、磷酸二氢钾0.4g/L、硫酸锰0.05g/L、NaCl 6.0g/L，调节pH至7.0，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株降解粪臭素的橄榄不动杆菌AO
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06，其特征在于，其分类命名为橄榄不动杆菌AO
‑
06(Acinetobacter oleivorans)，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No .24972，该菌株的16S rDNA 基因序列如SEQ ID NO.1 所示。2.权利要求1所述的橄榄不动杆菌AO
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06在降解粪臭素中的应用。3.权利要求1所述的橄榄不动杆菌AO
‑
06在制备高效降解粪臭素的微生物环保菌剂中的应用。4.根据权利要求3所述的橄榄不动杆菌AO
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06在制备高效降解粪臭素的微生物环保菌剂中的应用，其特征在于，所述的微生物环保菌剂的制备方法，包括以下步骤：1）种子液的制备：取平板上活化好的AO
‑
06菌株一环，接种到含已灭菌的100ml液体种子培养基的250ml三角瓶中，置全温摇床培养箱中，26
‑
35℃、140
‑
180r/min培养36
‑
48h，再接种到含150ml的液体种子培养基的500ml培养基中进行培养，26
‑
35℃、140
‑
180r/min培养36
‑
48h，经检测，此时种子液的活菌数大于等于1
‑2×
109CFU/ml，即制得种子液；2）发酵液的制备：按10
‑
15%接种量将步骤1）中得到的种子液转接到含500ml的发酵培养基的1L三角瓶中，培养温度26
‑
3...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡虹，张秀江，向凌云，刘丽，冯菲，马焕，解复红，李寒冰，张志龙，
申请(专利权)人：河南省科学院，
类型：发明
国别省市：