一株解淀粉芽孢杆菌ZH804及其应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物发酵技术领域，具体公开了一株解淀粉芽孢杆菌ZH804及其应用。本发明专利技术的菌株具有提高基因活性，加速γ

【技术实现步骤摘要】
一株解淀粉芽孢杆菌ZH804及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物发酵
，尤其是涉及一株解淀粉芽孢杆菌ZH804 及其应用。

技术介绍

[0002]芽孢杆菌为自然界中常见的细菌，由于其能形成芽孢，故对外界有害因子具有很强的抵抗能力，如：耐高温、耐射线等。芽孢杆菌的分布很广，存在于土壤、水、空气以及动物肠道中。解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens或 B.amyloliquefaciens)为芽孢杆菌的一种，其是公知的好氧细菌，常常见于土壤样品，其承担世界上大部分α
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淀粉酶和蛋白酶的生产，目前对于解淀粉芽孢杆菌的研究大多集中于其产酶能力上，尤其是产中性蛋白酶的能力。
[0003]蛋白酶是催化蛋白质水解为多肽和氨基酸的酶，广泛存在于动植物和微生物中，在生物体中执行着不同的生理功能和代谢活性。按其反应的最适pH值，蛋白酶可被分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。蛋白酶在工业上被大量应用，据统计，在所有工业用酶制剂中，约有75％都是蛋白酶。目前商业生产的蛋白酶主要来源于动物、植物及微生物。由于动植物蛋白酶的原材料需求量巨大、分离提纯成本高昂，难以大规模生产。而微生物具有生长快速、所需空间少、调控性强等优点，成为蛋白酶生产的主要来源。其中，来源于芽孢杆菌的中性蛋白酶市场占比最高。在食品工业中，蛋白酶能够将原料中的蛋白质水解为肽类及氨基酸，从而提高原料利用率，加速发酵，改善食品品质口感等。正因如此，蛋白酶被越来越多地应用于食品发酵工业中。然而，发酵食品通常含盐量较高，因此对所添加蛋白酶的耐盐性也有较高要求。
[0004]在用于中性蛋白酶生产的同时，芽孢杆菌也广泛使用于生物絮凝剂的生产应用，其中γ
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聚谷氨酸就是主要一类，γ
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聚谷氨酸是一种具有强吸附性的黏性物质。γ
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聚谷氨酸的代谢主要与γ
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DL
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谷氨酰基水解酶活性相关，其中编码基因 pgdS是其中的关键控制基因。发酵液中γ
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聚谷氨酸过多会导致发酵液粘度大、溶氧低，细菌无法正常生长，蛋白酶分离纯化困难等问题。因此，需要通过合适的手段减少发酵中的γ
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聚谷氨酸以提高中性蛋白酶产量，降低中性蛋白酶分离纯化的难度，节约成本。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZH804及其应用。本专利技术从酱油生产曲料中筛选出产中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌，该菌株能够较好降低γ
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聚谷氨酸黏性物质的分泌，改善了菌株的发酵性能，使得发酵中的菌体的生物量及中性蛋白酶的产量有较大幅度提升，且生产的中性蛋白酶具有较好的耐盐性。
[0006]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：
[0007]第一目的，本专利技术提供了一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，
所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的γ
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dL
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谷氨酰基水解酶编码基因pgdS上游
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685bp处由A突变为C，突变后的γ
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dL
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谷氨酰基水解酶编码基因pgdS的上游基因序列如SEQ ID NO:2所示。
[0008]本专利技术筛选获得γ
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dL
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谷氨酰基水解酶编码基因pgdS上游位点突变的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，该菌株可以提高基因活性，γ
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dL
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谷氨酰基水解酶编码基因pgdS上游位点的突变使得γ
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dL
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谷氨酰基水解酶基因pgdS 在菌株中的表达量提高，γ
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dL
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谷氨酰基水解酶的产量增加，加速了γ
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聚谷氨酸黏性物质降解，降低γ
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聚谷氨酸黏性物质的分泌，改善了该菌株的发酵性能。并且，该菌株具有提高发酵过程中中性蛋白酶产量的优点，表明该菌株的产酶特性佳，菌株产生的中性蛋白酶也具有较好的耐盐性。
[0009]作为本专利技术所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的优选实施方式，所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZH804，所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) ZH804保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC NO：62511，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。
[0010]具体保藏信息如下：
[0011]保藏单位名称：广东省微生物菌种保藏中心；
[0012]保藏地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼；
[0013]保藏日期：2022年6月2日；
[0014]保藏编号：GDMCC NO：62511。分类命名：Bacillus amyloliquefaciens
[0015]本专利技术分离筛选得到的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZH804 具有提高基因活性，加速γ
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聚谷氨酸黏性物质降解，减少γ
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聚谷氨酸黏性物质分泌，降低发酵粘度，提高溶氧、提高生物量和减少产泡的优点，从而提高了发酵均一性和可操作性，同时也提高了发酵过程中性蛋白酶的发酵产量，获得的中性蛋白酶具有较佳的耐盐性。
[0016]优选地，本专利技术从酱油生产曲料中筛选出一株高产中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，并通过常压室温等离子体诱变技术对菌株进行诱变和驯化，最终获得解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZH804。
[0017]本专利技术筛选获得的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZH804可以降低发酵粘度，解决了发酵产泡严重等问题，有效提高了菌体的生物量和中性蛋白酶的产量。
[0018]第二目的，本专利技术提供了上述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) 在制备发酵产品中的应用。
[0019]作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)在发酵过程中提高中性蛋白酶含量的应用。
[0020]上述获得的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)进行发酵生产(例如是液态发酵)中可以获得高产量的中性蛋白酶。
[0021]第三目的，本专利技术提供了上述解淀粉本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的γ
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dL
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谷氨酰基水解酶编码基因pgdS上游
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685bp处由A突变为C，突变后的γ
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dL
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谷氨酰基水解酶编码基因pgdS的上游基因序列如SEQ ID NO:2所示。2.一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZH804，所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZH804保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC NO：62511，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。3.如权利要求1或2...

【专利技术属性】
技术研发人员：周其洋，周斌，刘翔，石勇军，廖艺楠，
申请(专利权)人：佛山市海天高明调味食品有限公司佛山市海天调味食品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：