一种柑橘转基因芽快速成苗的方法技术

本发明专利技术公开了一种柑橘转基因芽快速成苗的方法，包括如下步骤：以柑橘实生苗为砧木，取转基因芽嫁接至柑橘实生苗；采用不透水的软质嫁接夹夹持并紧固嫁接部位；将透明管竖直罩在嫁接苗外部，然后再设置保湿罩，保持保湿罩内适宜温度与湿度。本发明专利技术采用软质嫁接夹紧固嫁接部位，操作步骤简单且不易导致嫩芽脱落，从而提高转基因芽的成活率。此外，采用透明管和保湿罩进行双重保湿，有利于转基因芽在适宜的温度和湿度下进行培育，进一步提高育苗的成活率。本发明专利技术公开的育苗方法不需要在无菌的环境中进行，即在常规环境中即可实现育苗，操作简单，育苗周期短，育苗成本低，嫁接成活率高，对以柑橘产业优质高效可持续发展为目标、以定向遗传改良为方向的柑橘基因工程育种和分子设计育种意义重大。计育种意义重大。计育种意义重大。

【技术实现步骤摘要】
一种柑橘转基因芽快速成苗的方法


[0001]本专利技术涉及育苗
，具体涉及一种柑橘转基因芽快速成苗的方法。

技术介绍

[0002]柑橘既是世界第一大水果，也是我国第一大水果。应用优良砧木品种对柑橘产业高效优质可持续发展至关重要。
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蒲江香橙
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(Citrus junos cv.
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PujiangXiangcheng
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)是近年从野生柑橘资源香橙(Citrus junos)中发掘的优新柑橘砧木品种(川审果2016017)，用作柑橘砧木，根系发达，嫁接亲和性好，接穗品种早结，丰产，稳产，果实品质优良，遗传性状稳定，并且抗寒，抗涝，耐碱性土壤等。但是目前
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蒲江香橙
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并没涉及转基因芽的嫁接育苗。
[0003]目前，已报道的柑橘遗传转化体系主要存在转基因芽生根困难、移栽成活率低、难以快速成苗等问题，一定程度上限制了柑橘基因工程育种进程。虽然试管微芽嫁接技术能解决柑橘转基因芽生根率和移栽成活率低的问题，但是传统微芽嫁接通常在无菌环境进行培养，且为了便于无菌操作需切除砧木的一部分根部，而砧木自身恢复生长及移栽入土需要一定时间。因此，该方法技术不仅对材料培养条件要求高，且难以快速获得转基因植株。目前虽然也有研究在室外进行嫁接成苗，但通常采用绑缚膜或者套管固定砧穗，绑缚固定时操作繁琐，并不适用微芽嫁接部位的包覆与固定，而采用套管固定则存在嫩芽易脱落等缺点。
[0004]因此，目前迫切需要一种周期短、成本低、操作简便、成活率高、能促进柑橘转基因芽快速生长的微嫁接体系，以解决现有技术中柑橘转基因芽生长较慢、难以快速成苗、嫁接操作繁琐等问题，且为深入发掘与利用
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蒲江香橙
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优良抗逆性状基因提供材料和技术储备。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种柑橘转基因芽快速成苗的方法，解决了现有柑橘转基因芽的育苗方法存在的上述问题。本专利技术采用软质嫁接夹紧固嫁接部位，以及采用透明管和保湿罩结合使用实现双重保湿，从而提高了转基因芽育苗的成功率。
[0006]本专利技术公开了一种柑橘转基因芽快速成苗的方法，包括如下步骤：
[0007]1)以柑橘实生苗为砧木，取转基因芽嫁接至柑橘实生苗；
[0008]2)采用不透水的软质嫁接夹夹持并紧固嫁接部位；
[0009]3)将透明管竖直罩在嫁接苗外部，然后再设置保湿罩，保持保湿罩内适宜温度与湿度。
[0010]本专利技术的有益效果：首先，本专利技术采用软质嫁接夹紧固嫁接部位，操作步骤简单且不易导致嫩芽脱落，从而提高转基因芽的成活率；其次，本专利技术采用透明管和保湿罩进行双重保湿，有利于转基因芽在适宜的温度和湿度下进行培育，进一步提高育苗的成活率；最后，本专利技术公开的育苗方法不需要在无菌的环境中进行，即在常规环境中即可实现育苗且
具有较高的成活率。
[0011]采用一端开口的透明管罩于所述嫁接苗上且所述透明管不碰到嫁接苗，可有效保证嫁接结合处周围的高湿微环境，从而提高嫁接成活率。
[0012]本专利技术对以柑橘产业优质高效可持续发展为目标、以定向遗传改良为方向的柑橘基因工程育种和分子设计育种意义重大。
[0013]作为一种可能的优选设计，所述软质嫁接夹采用不透水材质制成，且所述软质嫁接夹上具有开口。不仅不会对幼嫩的嫁接苗造成伤害，而且采用不透水的材质，可有效避免接穗失水干死；所述软质嫁接夹上具有开口，可适当透气以免接穗腐烂。
[0014]作为一种可能的优选设计，所述保湿罩上开设有通气孔。使得整个嫁接苗处于相对湿度达85％～90％的环境中，保证透光、透气及温湿度需要，进一步提高成活率。透明的保湿罩可重复使用、节能环保，可以防风、防尘、防病菌虫害侵染、防止外力碰撞导致芽脱落。
[0015]作为一种可能的优选设计，所述砧木来源于生长了2～3个月、半木质化且直立健壮的
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蒲江香橙
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实生苗。具有良好的生长能力，能为柑橘转基因芽提供所需养分。
[0016]作为一种可能的优选设计，所述
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蒲江香橙
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实生苗由其种子在20～28℃，光/暗周期16h/8h条件下置于基质中培养得到。可缩短砧木的培养时间。
[0017]作为一种可能的优选设计，所述基质由营养土、蛭石以及珍珠岩按照体积比2～4:1:1混合而成。
[0018]作为一种可能的优选设计，所述柑橘转基因芽的叶片数量大于2且具有茎结构。
[0019]作为一种可能的优选设计，所述接穗的底部呈“V”字形。增大与砧木的接触面积。
[0020]作为一种可能的优选设计，所述透明管的长度高于所述嫁接苗的高度5～8cm且其直径大于所述嫁接苗的最宽宽度1～3cm。
[0021]作为一种可能的优选设计，所述砧木的嫁接口距离土表面的高度为3～6cm。
附图说明
[0022]图1为柑橘转基因芽快速成苗的整个育苗过程各阶段的展示图。
具体实施方式
[0023]为了使本专利技术所要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0024]由于已报道的柑橘遗传转化体系主要存在转基因芽生根困难、移栽成活率低、难以快速成苗等问题，一定程度上限制了柑橘基因工程育种进程。虽然试管微芽嫁接技术能解决柑橘转基因芽生根率和移栽成活率低的问题，但是为了便于无菌操作需切除砧木的一部分根部，而砧木自身恢复生长及移栽入土需要一定时间。因此，该方法技术不仅对材料培养条件要求高，且难以快速获得转基因植株。一些研究者将柑橘抗性芽嫁接在田间的老熟砧木上，采用绑缚膜或者套管固定砧穗，存在砧木材料培养周期长、难以避免不利天气对嫁接成活率的影响、绑缚固定时操作繁琐、采用套管固定时嫩芽易脱落等缺点。
[0025]针对试管微芽嫁接技术不仅对材料培养条件要求高，且难以快速获得转基因植株
的问题，本专利技术提供一种柑橘转基因芽快速成苗的方法。以柑橘实生苗为砧木，以柑橘转基因芽为接穗，采用大小合适的软质嫁接夹固定砧穗，得到嫁接苗；并且在嫁接苗上罩一个透明管形成高湿微环境；最后盖上透气和透明的保湿罩进行双重保湿。不仅提高了嫁接苗的成活率，而且培养条件不苛刻(常规育苗条件即可)，还能缩短整个育苗的周期，值得推广使用。
[0026]本专利技术提供一种柑橘转基因芽快速成苗的方法。一种柑橘转基因芽快速成苗的方法，包括如下步骤：
[0027]1)以柑橘实生苗为砧木，取转基因芽嫁接至柑橘实生苗；
[0028]2)采用不透水的软质嫁接夹夹持并紧固嫁接部位；
[0029]3)将透明管竖直罩在嫁接苗外部，然后再设置保湿罩，保持保湿罩内适宜温度与湿度。
[0030]本专利技术中，透明管罩于嫁接苗上可以形成高湿微环境，有利于嫁接苗保持充足的水分，可以提高本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种柑橘转基因芽快速成苗的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)以柑橘实生苗为砧木，取转基因芽嫁接至柑橘实生苗；2)采用不透水的软质嫁接夹夹持并紧固嫁接部位；3)将透明管竖直罩在嫁接苗外部，然后再设置保湿罩，保持保湿罩内适宜温度与湿度。2.根据权利要求1所述的柑橘转基因芽快速成苗的方法，其特征在于，所述软质嫁接夹采用不透水材质制成，且所述软质嫁接夹上具有开口。3.根据权利要求1所述的柑橘转基因芽快速成苗的方法，其特征在于，所述保湿罩上开设有通气孔。4.根据权利要求1
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3任一项所述的柑橘转基因芽快速成苗的方法，其特征在于，所述砧木为生长了2～3个月、半木质化且直立健壮的
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蒲江香橙
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实生苗。5.根据权利要求4所述的柑橘转基因芽快速成苗的方法，其特征在于，所述

【专利技术属性】
技术研发人员：王小蓉，柴久凤，谢锐，何文，罗亮，王燕，陈清，王浩，吴志伟，杨绍凤，
申请(专利权)人：四川博浩宇农业科技有限公司四川天府新区乡村振兴研究院，
类型：发明
国别省市：