血栓弹力图活化凝血检测试剂及其应用制造技术

本发明专利技术涉及体外凝血检测技术领域，具体涉及血栓弹力图活化凝血检测试剂及其应用。本发明专利技术提供的活化凝血检测试剂采用纳米级粉末高岭土，与脑磷脂配合，能有效启动内源性凝血激活途径，采用结冷胶与二价金属镁离子，形成的三维网络结构具有良好的承托力和极低的粘性，使试剂保持良好的流动性及悬浮能力，能减少有效成分的沉淀，有效避免活化凝血检测试剂在长期保存及运输过程中出现失效的问题。期保存及运输过程中出现失效的问题。

【技术实现步骤摘要】
血栓弹力图活化凝血检测试剂及其应用


[0001]本专利技术涉及体外凝血检测
，具体涉及血栓弹力图活化凝血检测试剂及其应用。

技术介绍

[0002]血栓弹力图(thromboela
‑
stogram，TEG)是血栓弹力仪描绘出的特殊图形，可以准确、整体地评估体外血液凝固情况。利用TEG指导成分输血、判断促凝和抗凝等药物的疗效、评估患者血栓发生几率以及为预防手术后的血栓发生等提供科学、客观可靠的数据支持。
[0003]德国教授Harter于1948年首先描述了血栓弹力图。2000年开始，我国三甲医院开始引入血栓弹力仪，并在麻醉科、ICU、体外循环和器官移植等科室率先使用。到了2007年6月，血栓弹力图仪进入《医疗机构临床检验项目目录》和《全国医疗服务价格项目规范(试行2001年版)》目录中。血栓弹力图仪中的不锈钢盛血杯以4
°
45'角度来回转动，当杯壁与杯中圆柱体中间的血液标本呈液态时，杯的来回转动不能带动圆柱体，通过传感器反映到描图纸上的信号是一条直线，当血液开始凝固时，杯与圆柱体之间因纤维蛋白黏附性而产生阻力，杯的转动带动圆柱体同时运动，随着纤维蛋白的增加阻力也不断增大，杯带动圆柱体的运动也随之变化，圆柱体运动切割磁力线产生电流，电流转换为数字信号，此信号通过传感器描绘到描图纸上形成特有的血栓弹力图。
[0004]目前全自动血栓弹力图活化凝血检测试剂多为大瓶装，但由于检测时间久，在检测过程中激活剂高岭土会发生部分沉降，造成检测试剂不均匀，影响检测结果。例如现有的一种全自动血栓弹力图活化凝血检测试剂的激活剂包括高岭土、磷脂和叠氮钠等，虽然能够降低成本，短期内稳定性良好，却无法保证长时间稳定性良好及试剂的均匀性，同时也无法避免高岭土的沉淀。因此亟需开发出一种稳定性好、不易沉淀、均匀性好的全自动血栓弹力图活化凝血检测试剂。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供血栓弹力图活化凝血检测试剂及其应用，本专利技术提供了一种可以使高岭土长时间悬浮，避免有效试剂沉淀的活化凝血检测试剂及其在血栓弹力图试验中的应用。
[0006]本专利技术提供了活化凝血检测试剂，包括0.1％～0.6％(w/v)Tris、0.01％～0.05％(w/v)高岭土、0.1％～2％(v/v)脑磷脂、0.1％～0.5％(w/v)稳定剂、0.01％～2％(w/v)金属离子和0.05％(w/v)防腐剂；
[0007]所述w/v为质量体积比，单位为g/mL；
[0008]所述稳定剂选自结冷胶、琼脂、卡拉胶、黄原胶中至少一种；
[0009]所述金属离子选自Mg
2+
、Zn
2+
、Mn
2+
中至少一种。
[0010]进一步的，本专利技术提供的所述活化凝血检测试剂稳定性好、不易沉淀、均匀性好，所述活化凝血检测试剂与血栓弹力图仪配合使用，进行相关指标的检测。
[0011]在一些实施例中，本专利技术通过设计试验对活化凝血检测试剂的组分和浓度进行筛选，结果表明活化凝血检测试剂的组分为Tris、高岭土、脑磷脂、稳定剂、金属离子和防腐剂，浓度为0.1％～0.6％(w/v)Tris、0.01％～0.05％(w/v)高岭土、0.1％～2％(v/v)脑磷脂、0.1％～0.5％(w/v)稳定剂、0.01％～2％(w/v)金属离子和0.05％(w/v)防腐剂时，检测效果更好。
[0012]具体的，本专利技术提供的活化凝血检测试剂包括0.3％(w/v)Tris、0.035％(w/v)高岭土、1％(v/v)脑磷脂、0.2％(w/v)稳定剂、0.15％(w/v)金属离子和0.05％(w/v)防腐剂。
[0013]本专利技术提供的所述活化凝血检测试剂中，所述稳定剂为结冷胶，所述金属离子为Mg
2+
。
[0014]具体的，稳定剂包括结冷胶、琼脂、卡拉胶、黄原胶、海藻酸钠、阿拉伯胶、果胶、瓜尔豆胶、槐豆胶、明胶、吐温。本专利技术通过实验证明低酰基结冷胶依靠其游离基团能够与二价金属离子形成特殊的凝胶，因此与适量的Mg
2+
结合能够形成三维网络结构，既具有良好的承托力，又具有假塑性和极低的黏性，使试剂保持良好的流动性及悬浮能力。
[0015]本专利技术提供的所述活化凝血检测试剂，其pH值为7.0～8.5。
[0016]具体的，在一些实施例中，所述活化凝血检测试剂的pH值为7.3。
[0017]本专利技术提供的所述活化凝血检测试剂，所述金属离子具体为：
[0018]所述Mg
2+
来自MgCl2、MgSO4、Mg(NO3)2中至少一种；
[0019]所述Zn
2+
来自ZnCl2、ZnSO4、Zn(NO3)2中至少一种；
[0020]所述Mn
2+
来自MnCl2、MnSO4、Mn(NO3)2中至少一种，本专利技术对此不作限定。
[0021]本专利技术提供的所述活化凝血检测试剂，所述高岭土为纳米级粉末高岭土。
[0022]具体的，内源性凝血激活剂包括高岭土、鞣花酸和硅藻土。本专利技术采用的纳米级粉末高岭土，与结冷胶搭配，可以使细小的高岭土微粒长时间混悬在介质中，进而提高试剂的稳定性和均匀性，避免试剂中有效成分的沉淀。
[0023]本专利技术提供的所述活化凝血检测试剂，所述防腐剂为硫酸庆大霉素。
[0024]具体的，防腐剂包括叠氮钠、硫柳汞、卡松、庆大霉素、Proclin300。本专利技术所采用的硫酸庆大霉素是一种氨基糖苷类药物，对铜绿假单胞菌、变形杆菌属、大肠杆菌、克雷白菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属、奈瑟菌、金黄色葡萄球菌有较强的抗菌活性。
[0025]本专利技术提供的所述活化凝血检测试剂具体包括水、0.3％(w/v)Tris、0.035％(w/v)高岭土、1％(v/v)脑磷脂、0.2％(w/v)结冷胶、0.15％(w/v)氯化镁和0.05％(w/v)硫酸庆大霉素。
[0026]具体的，在一些实施例中，所述活化凝血检测试剂的组分为水、0.3％(w/v)Tris、0.035％(w/v)高岭土、1％(w/v)脑磷脂、0.2％(w/v)结冷胶、0.15％(w/v)氯化镁和0.05％(w/v)硫酸庆大霉素时，对血液样本的检测结果优于其他组分的活化凝血检测试剂，并且稳定性更高，均匀性更好。
[0027]本专利技术还提供了所述活化凝血检测试剂在制备凝固法活化凝血检测试剂盒中的应用。
[0028]本专利技术还提供了凝固法活化凝血检测试剂盒，其包括所述的活化凝血检测试剂以及氯化钙，所述氯化钙的浓度为0.1～1mol/L，优选浓度为0.2mol/L。
[0029]本专利技术提供的方案中，高岭土和脑磷脂能有效启动内源性凝血激活途径，从而进行精确的血栓弹力图检测。结冷胶和Mg
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两种稳定剂结合形成三维网络结构，既具有良好的承托力，又具有假塑性和极低的黏性，使试剂保持良好的流动本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.活化凝血检测试剂，其特征在于，包括0.1％～0.6％(w/v)Tris、0.01％～0.05％(w/v)高岭土、0.1％～2％(v/v)脑磷脂、0.1％～0.5％(w/v)稳定剂、0.01％～2％(w/v)金属离子和0.05％(w/v)防腐剂；所述稳定剂选自结冷胶、琼脂、卡拉胶、黄原胶中至少一种；所述金属离子选自Mg
2+
、Zn
2+
、Mn
2+
中至少一种。2.根据权利要求1所述的活化凝血检测试剂，其特征在于，包括0.3％(w/v)Tris、0.035％(w/v)高岭土、1％(v/v)脑磷脂、0.2％(w/v)稳定剂、0.15％(w/v)金属离子和0.05％(w/v)防腐剂。3.根据权利要求1或2所述的活化凝血检测试剂，其特征在于，所述稳定剂为结冷胶，所述金属离子为Mg
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。4.根据权利要求1或2所述的活化凝血检测试剂，其特征在于，其pH值为7.0～8.5。5.根据权利要求1所述活化凝血检测试剂，其特征在于，所述M...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢永华，柴小岩，
申请(专利权)人：上海太阳生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：