金银花口服液环烯醚萜类成分的含量测定方法技术

本发明专利技术涉及一种金银花口服液环烯醚萜类成分的含量测定方法，本发明专利技术以断马钱子酸为内参物，基于HPLC方法通过相对校正因子计算，对金银花口服液中6种环烯醚萜类成分，断马钱子酸、马钱苷酸、断氧化马钱苷酸、当药苷、断氧化马钱子苷和断马钱子苷进行定量分析。该方法稳定可靠、操作简便，可同时实现对金银花口服液中6种环烯醚萜类成分的定量分析，通过该方法，可以对金银花口服液及其原材料的相关成分进行有效监测，反映其质量水平。反映其质量水平。反映其质量水平。

【技术实现步骤摘要】
金银花口服液环烯醚萜类成分的含量测定方法


[0001]本专利技术涉及高效液相色谱分析及中药制剂分析质量控制领域，具体地，涉及一种金银花口服液中环烯醚萜类成分的含量测定方法。

技术介绍

[0002]一测多评法(QAMS)是一种通过只测定某个代表性成分(内参物，通常为典型成分且化学对照品可得)，实现对多个成分(对照品难以得到或难供应)的含量进行测定，使其计算值与实际值符合定量方法学要求的质量控制方法，具有分析效率高、检测成本低的特点。
[0003]金银花作为一种代表性的清热解毒中药，具有清热解毒、疏风解表的功效。金银花口服液是由真奥药业公司研发，由单味药材金银花提取浓缩制备而成，每1mL相当于金银花饮片90mg，主要治疗咽喉肿痛、发热口渴、风热感冒、中暑等症状的制剂。金银花中含有多种成分，除挥发油外，还有大量的环烯醚萜、酚酸、黄酮和皂苷等。近年研究发现，除了金银花的主要活性成分绿原酸等酚酸类成分外，环烯醚萜类作为重要的活性成分，也具有抗炎、抗病毒、抗菌、抗氧化、增强免疫等多种活性【中国中药杂志,2022,47(07):1730
‑
1738】。但目前尚缺少对环烯醚萜成分同时进行含量检测的简便快捷的方法。
[0004]现行2020版中国药典关于金银花的质量标准只将酚酸类(绿原酸、3，5
‑
二
‑
O
‑
咖啡酰奎宁酸和4，5
‑
二
‑
O
‑
咖啡酰奎宁酸)和木犀草苷作为含量测定指标，国家药品监督管理局对于金银花口服液的质量标准只以绿原酸作为含量测定指标，标准中的质量控制方法对于成分复杂的金银花口服液不能全面反映其质量。专利【CN102507769】公开了一种金银花药材及其制剂中绿原酸和三种异绿原酸的定量测定方法，其中未对环烯醚萜类进行定量。【CN106248817】和【CN106226415】均公开了一种测定金银花药材中环烯醚萜类成分含量的方法，表明环烯醚萜类是评价金银花及其制剂质量的重要成分。【药物分析杂志,2006,26(8):1039
‑
1042】对金银花药材中具有抗呼吸道病毒感染作用的10种环烯醚萜类成分进行了鉴定，但在该色谱条件下仅对其中4种分离程度较好的环烯醚萜类成分进行了定量，而未对鉴定出的主要成分如断氧化马钱苷酸、断马钱子苷、马钱苷酸进行定量。
[0005]一测多评法能够很好解决中药质量控制中缺乏对照品的问题，且能够较好完成不稳定成分的定量评价，而目前没有金银花药材及口服液中环烯醚萜类成分一测多评法的研究报道。活性成分的综合测定是中药质量控制研究的重点，建立药效成分的一测多评法是解决指标成分单一问题的关键手段之一。因此，将环烯醚萜类成分纳入金银花口服液的质量评价体系，对进一步提升其质量标准，稳定金银花类药品质量控制的水平具有重要的意义。

技术实现思路

[0006]针对上述现有单一成分和多指标含量测定方法的不足，本专利技术提供一种实用性高、操作简单、稳定可控、节约成本的基于一测多评法的金银花口服液中6种环烯醚萜类成分的含量测定方法，该方法以金银花口服液中含量较高的断马钱子酸作为内参物，通过建
立断马钱子酸与马钱苷酸、断氧化马钱苷酸、当药苷、断氧化马钱子苷和断马钱子苷之间的相对校正因子，通过只测定断马钱子酸的含量，用相对校正因子即可计算出另外5 种成分的含量。该方法不仅可以实现对金银花口服液样品中的特征性环烯醚萜类成分进行了有效分离，形成了能有效表征制剂有效成分的指纹图谱，还可以实现对环烯醚萜类成分的定量。通过本专利技术公开的方法可以对口服液中环烯醚萜类成分的工艺提取转移率和稳定性进行考察，为金银花口服液的质量监管提供了科学依据。
[0007]为实现上述技术目的，本专利技术采用如下技术方案：所检测的环烯醚萜类成分包括马钱苷酸、断马钱子酸、断氧化马钱苷酸、当药苷、断氧化马钱子苷和断马钱子苷。
[0008]本专利技术包括供试品的配置、供试品检测、内参物的设定，成分定量的计算的步骤所组成；
[0009]1)供试品溶液的配置，加入有机溶剂配置成供试品溶液；
[0010]2)进样，色谱条件：高效液相色谱仪，C18硅胶柱，250mm
×
4.6mm,5μm，流动相A为0.4％磷酸水，流动相B为乙腈，流速为0.5
‑
2mL/min，柱温20
‑
35℃，检测波长为210
‑
250nm，梯度洗脱，0～15min，10％～12％B；15～32min，12％～25％B；32～ 43min，25％～50％B；43～47min，50％～100％B，进样量1
‑
10μL。
[0011]3)计算，依据峰面积，以断马钱子酸为内参物，分别计算马钱苷酸、断氧化马钱苷酸、当药苷、断氧化马钱子苷和断马钱子苷的的相对校正因子，峰面积的相对校正因子校正即可得到金银花口服液中马钱苷酸、断氧化马钱苷酸、当药苷、断氧化马钱子苷和断马钱子苷的含量。
[0012]进一步地，在上述含量测定方法中，色谱条件为：C18硅胶柱，250mm
×
4.6mm,5μm，流动相为0.4％磷酸水(A)
‑
乙腈(B)，流速为1mL/min，柱温为25
‑
30℃，进样量为5 μL，检测波长240nm，梯度洗脱程序为：0～15min，10％～12％B；15～32min，12％～ 25％B；32～43min，25％～50％B；43～47min，50％～100％B。
[0013]进一步地，在上述含量测定方法中，所述C18硅胶柱为C18(2)
[0014]进一步地，在上述含量测定方法中，金银花口服液中马钱苷酸峰面积的计算公式为A 马钱苷酸
＝A
240
–
0.5608A
327
，其中A
马钱苷酸
为马钱苷酸的峰面积，A
240
为马钱苷酸240nm波长下的色谱峰面积，A
327
为其在327nm波长下的色谱峰面积。
[0015]进一步地，在上述含量测定方法中，以断马钱子酸为内参物，按权力要求2所述高效液相条件进行检测，相对校正因子计算公式为f
si
＝f
s
/f
i
＝(A
s
C
i
)/(C
s
A
i
)，其中A
s
为内参物峰面积，A
i
为待测成分峰面积，C
s
为内参物浓度，C
i
为待测成分浓度；马钱苷酸、断氧化马钱苷酸、当药苷、断氧化马钱子苷和断马钱子苷的相对校正因子分别为：0.9372、 0.9014、1.0450、0.8884、1.1641。
[0016]进一步地，在上述含量测定方法中，马钱苷酸、断马钱子酸、断氧化马钱苷酸、当药苷、断氧化马钱子苷和断马钱子本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种金银花口服液环烯醚萜类成分的含量测定方法，其特征在于，所述环烯醚萜类成分包括断马钱子酸、马钱苷酸、断氧化马钱苷酸、当药苷、断氧化马钱子苷和断马钱子苷。2.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，所述含量测定方法由供试品的配置、供试品检测、内参物的设定，成分定量的计算的步骤所组成；1)供试品溶液的配置，取金银花口服液加入有机溶剂配置成供试品溶液；2)进样，色谱条件：高效液相色谱仪，C18硅胶柱，250mm
×
4.6mm,5μm，流动相A为0.4％磷酸水，流动相B为乙腈，流速为0.5
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2mL/min，柱温20
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35℃，检测波长为210
‑
250nm，梯度洗脱，0～15min，10％～12％B；15～32min，12％～25％B；32～43min，25％～50％B；43～47min，50％～100％B，进样量1
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10μL；3)计算，依据峰面积，以断马钱子酸为内参物，分别计算马钱苷酸、断氧化马钱苷酸、当药苷、断氧化马钱子苷和断马钱子苷的的相对校正因子，峰面积的相对校正因子校正即可得到金银花口服液中马钱苷酸、断氧化马钱苷酸、当药苷、断氧化马钱子苷和断马钱子苷的含量。3.根据权利要求2所述的含量测定方法，其特征在于，色谱条件为：C18硅胶柱，250mm
×
4.6mm,5μm，流动相A为0.4％磷酸水，流动相B为乙腈，流速为1mL/min，柱温为25
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30℃，进样量为5μL，检测波长240nm，梯度洗脱程序为：0～15min，10％～12％B；15～32min，12％～25％B；32～43min，25％～50％B；43～47min，50％～100％B。4.根据权利要求2所述的含量测定方法，其特征在于，所述C...

【专利技术属性】
技术研发人员：李勋，
申请(专利权)人：真奥金银花药业有限公司，
类型：发明
国别省市：