用于治疗癌症的缺乏SIRPα的巨噬细胞制造技术

如本文所公开，SIRPα通过许多不同的癌症类型以及癌症对疗法的抗性而构成免疫逃避的一部分，并且降低SIRPα水平有助于抗原获取、加工和呈递，减少TME免疫抑制，且由此促进肿瘤特异性T细胞活化以消除肿瘤并产生由记忆性T细胞、循环抗体和浆细胞组成的适应性免疫反应，所有这些都能对原始癌症中的新抗原具有特异性。因此，公开了适用于治疗癌症的活化的SIRPα

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗癌症的缺乏SIRP
α
的巨噬细胞
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年4月24日提交的美国临时申请第63/015,013号的权益，所述临时申请以全文引用的方式并入本文中。
[0003]关于联邦赞助的研究或开发的声明
[0004]本专利技术是根据美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的授权号Al 106839和CA241271在政府支持下进行的。政府在本专利技术中享有某些权利。

技术介绍

[0005]在世界范围内，即使在各种治疗努力下，癌症仍然对人体健康有着重大威胁。考虑到免疫逃避是癌症的标志，已开发出新的免疫疗法，如免疫检查点阻断(ICB)、嵌合抗原受体(CAR)
‑
T、癌症疫苗接种和免疫调节的辐射疗法(RT)来对抗癌症；然而，由于反应率低并且这些治疗有效治疗的癌症类型有限，故这些努力尚未完全满足临床需要。因此，迫切需要额外的方法和治疗性创新来改进对避开免疫消除并对当前疗法具有抗性的癌症的治疗。

技术实现思路

[0006]如本文所公开，SIRPα通过许多不同的癌症类型以及癌症对RT、ICB和其它免疫调节疗法的抗性而构成免疫逃避的一部分。减少SIRPα表达或减少SIRPα介导的调节可以加强抗原获取、加工和呈递，减少肿瘤微环境(TME)免疫抑制，并由此促进肿瘤特异性T细胞活化以消除肿瘤并产生由T细胞、循环抗体和浆细胞组成的适应性免疫反应，所有这些都可以对原始癌症中的新抗原具有特异性。
[0007]因此，本文公开了活化的SIRPα
低
巨噬细胞，其用于治疗癌症。在一些实施例中，这些活化的SIRPα
低
巨噬细胞通过涉及以下的方法来制备：从受试者获得包含外周血单个核细胞(PBMC)的生物样品；从PBMC中分离单核细胞；在体外分化单核细胞以产生巨噬细胞；使巨噬细胞与SIRPα抑制剂接触；及使巨噬细胞与巨噬细胞活化剂接触，由此产生相对于未处理的巨噬细胞，SIRPα细胞表面表达显著降低(SIRPα
低
)并且对癌细胞的吞噬作用、促炎性反应和免疫原性抗原呈递的能力增加的巨噬细胞群体，其活化肿瘤特异性T细胞，由此产生包含活化的SIRPα
低
巨噬细胞的用于治疗癌症的药剂。
[0008]在一些实施例中，SIRPα抑制剂和巨噬细胞活化剂为依次施用。这可以按任一次序进行并且可以相隔数分钟、数小时或数天，例如相隔1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时、13小时、14小时、16小时、16小时、17小时、18小时、19小时、20小时、21小时、22小时、23小时或24小时。在其它实施例中，SIRPα抑制剂和巨噬细胞活化剂为同时或并行施用。
[0009]在一些实施例中，SIRPα抑制剂和巨噬细胞活化剂存在于同一组合物中。因此，在一些实施例中，方法涉及从生物样品中的外周血单个核细胞(PBMC)中分离单核细胞；在体外分化单核细胞以产生巨噬细胞；以及使巨噬细胞与SIRPα表达抑制剂和巨噬细胞活化剂接触，以产生相对于未处理的巨噬细胞，SIRPα细胞表面表达降低并且吞噬作用、促发炎和
抗原呈递的活性增加的活化的巨噬细胞群体(活化的SIRPα
低
巨噬细胞)。
[0010]在一些实施例中，所公开的组合物和方法与任何专职性抗原呈递细胞一起使用。专职性抗原呈递细胞(APC)是专门将抗原呈递到T细胞的免疫细胞。专职性APC的主要类型是树突状细胞(DC)、巨噬细胞和B细胞，但还可包括内皮细胞，且在一些实施例中是粒细胞。
[0011]因此，还公开了一种用于治疗受试者的癌症的方法，其涉及向该受试者施用治疗有效量的活化的SIRPα
低
巨噬细胞。在一些实施例中，治疗有效量的活化的SIRPα
低
巨噬细胞直接施用于肿瘤中(瘤内施用)，之后进行肿瘤定向原位放射疗法(图13A)。在一些实施例中，治疗有效量的活化的SIRPα
低
巨噬细胞直接施用于肿瘤中，之前进行肿瘤定向原位放射疗法(图13B)。在一些实施例中，治疗有效量的活化的SIRPα
低
巨噬细胞直接施用于肿瘤中，无任何肿瘤定向原位放射疗法(图13C)。
[0012]在一些实施例中，治疗有效量的活化的SIRPα
低
巨噬细胞直接施用于肿瘤中，之后进行肿瘤定向原位放射疗法和静脉内(IV)施用ICB疗法(图13D)。在一些实施例中，治疗有效量的活化的SIRPα
低
巨噬细胞直接施用于肿瘤中，之前进行肿瘤定向原位放射疗法，并且之后静脉内施用ICB(图13E)。在一些实施例中，治疗有效量的活化的SIRPα
低
巨噬细胞直接施用于肿瘤中，之后静脉内施用ICB，无任何肿瘤定向原位放射疗法(图13F)。
[0013]在一些实施例中，静脉内施用治疗有效量的活化的SIRPα
低
巨噬细胞，之后进行肿瘤定向原位放射疗法(图13G)。在一些实施例中，静脉内施用治疗有效量的活化的SIRPα
低
巨噬细胞，之后进行肿瘤定向原位放射疗法和静脉内施用ICB(图13H)。
[0014]在一些实施例中，静脉内施用治疗有效量的尚未在体外培养物中活化的SIRPα
低
巨噬细胞，之后进行肿瘤定向原位放射疗法(图13I)。在一些实施例中，静脉内施用治疗有效量的尚未在体外培养物中活化的SIRPα
低
巨噬细胞，之后进行肿瘤定向原位放射疗法和静脉内施用ICB(图13J)。
[0015]本文还公开了用于治疗癌症的体外扩增的肿瘤特异性外周血T(PBT)细胞，其由如下方法产生，该方法涉及从受试者获得包含外周血单个核细胞(PBMC)的生物样品；从PBMC中分离单核细胞；从血液或PBMC中分离外周血T细胞；在体外分化单核细胞以产生巨噬细胞；使巨噬细胞与SIRPα表达抑制剂接触；使巨噬细胞与活化剂接触，由此产生相对于未处理的巨噬细胞，SIRPα细胞表面表达显著降低(SIRPα
低
)并且对癌细胞的吞噬作用、促炎性反应和免疫原性抗原呈递的能力增加的巨噬细胞群体；从受试者获得包含肿瘤活检或手术肿瘤切除的生物样品；将活化的SIRPα
低
巨噬细胞与来自肿瘤的细胞在体外共培养，以允许肿瘤抗原的吞噬作用(肿瘤饲养的SIRPα
低
巨噬细胞)；将肿瘤饲养的SIRPα
低
巨噬细胞与分离的PBT细胞在体外共培养以扩增肿瘤特异性T细胞的数目；由此产生包含体外扩增的肿瘤特异性PBT细胞的用于治疗癌症的药剂。
[0016]因此，还公开了一种用于治疗受试者的癌症的方法，其涉及向该受试者施用治疗有效量的体外扩增的肿瘤特异性PBT细胞。在一些实施例中，体外扩增的PBT细胞通过静脉内施用来施用于受试者(图13K)。在一些实施例中，体外扩增的PBT细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于产生活化的SIRPα
低
巨噬细胞的方法，其包含(a)从生物样品中的外周血单个核细胞(PBMC)中分离单核细胞；(b)在体外分化所述单核细胞以产生巨噬细胞；以及(c)使所述巨噬细胞与SIRPα抑制剂接触；以及(d)使所述巨噬细胞与巨噬细胞活化剂接触，由此产生相对于未处理的巨噬细胞，SIRPα的细胞表面表达显著降低(SIRPα
低
)的巨噬细胞群体，其中所述SIRPα
低
巨噬细胞具有活化的对癌细胞的吞噬作用、增加的促炎性反应和增加的免疫原性抗原呈递。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述SIRPα抑制剂遏制SIRPα的表达，降低细胞表面上SIRPα的丰度，抑制SIRPα的活性，破坏SIRPα与CD47之间的相互作用，或其组合。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述SIRPα抑制剂包含细胞因子、TLR配体、糖皮质激素或其组合。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述SIRPα抑制剂选自由以下组成的群组：IFNα、IFNβ、IFNγ、IL
‑
1、IL
‑
6、IL
‑
12、IL
‑
18、LPS、CpG、聚I:C、LTA、PGN、鞭毛蛋白、Pam3CSK4、酵母聚糖和HMGB1。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述巨噬细胞活化剂包含细胞因子、佛波醇酯、TLR配体或其组合。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述细胞因子选自由以下组成的群组：IFNα、IFNβ、IL
‑
6、IL
‑
1、IL
‑
17、IL
‑
18、TNFα和IL
‑
12。7.根据权利要求5所述的方法，其中所述佛波醇酯包含佛波醇12
‑
肉豆蔻酸酯13
‑
乙酸酯(PMA)。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述TLR配体选自由以下组成的群组：LPS、CpG、聚I:C、LTA、PGN、鞭毛蛋白、Pam3CSK4、酵母聚糖和HMGB1。9.根据权利要求3所述的方法，其中所述糖皮质激素包含甲基泼尼松龙或地塞米松。10.根据权利要求1所述的方法，其中所述SIRPα抑制剂和所述巨噬细胞活化剂为依次施用。11.根据权利要求1所述的方法，其中所述SIRPα抑制剂和所述巨噬细胞活化剂为同时或并行施用。12.根据权利要求1所述的方法，其中所述SIRPα抑制剂和所述巨噬细胞活化剂存在于同一组合物中。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述组合物包含重组人干扰素
‑
γ(IFNγ)、重组人干扰素
‑
αA2(IFNα)、CpG寡脱氧核苷酸和聚肌苷酸:聚胞苷酸(聚I:C)。14.根据权利要求1所述的方法，其中所述SIRPα抑制剂包含SHP
‑
1抑制剂。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述SHP
‑
1抑制剂选自由以下组成的群组：TPI
‑
1(2
‑
(2,5
‑
二氯苯基)
‑
1,4
‑
苯醌)、TPI
‑
1a1(2
‑
(2,5
‑
二氯苯基)
‑
2,4
‑
苯醌)、TPI
‑
1a2(2
‑
(3
‑
氯苯基)
‑
1,4
‑
苯醌)、TPI
‑
1a3(2
‑
苯基萘醌)、TPI
‑
1a4(2
‑
(4
‑
乙氧基苯基)
‑
1,4
‑
苯醌)、TPI
‑
1a5(2
‑
(4
‑
甲氧基苯基)
‑
1,4
‑
苯醌)、SSG(葡萄糖酸锑钠)、PTP抑制剂I(2
‑
溴
‑1‑
(4
‑
羟苯基)
‑
乙酮)、PTP抑制剂II(2
‑
溴
‑1‑
(4
‑
甲氧基苯基)
‑
乙酮)、PTP抑制剂III(2
...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘远，边镇，石磊，冉柯，科比，
申请(专利权)人：乔治亚州立大学研究基金公司，
类型：发明
国别省市：