一种纽莫康定杂质制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体涉及一种纽莫康定杂质h及其制备方法，制备方法包括以下步骤：将含有纽莫康定杂质h的粗品用醇溶剂溶解，反相制备柱上样，以水为流动相A、以极性溶剂为流动相B进行梯度洗脱，收集目标成分流出液，收集液经减压浓缩、冻干得纽莫康定杂质h，本发明专利技术丰富了纽莫康定杂质谱，对其质量研究、合成卡泊芬净中有关杂质传递研究、用药安全性等提供了重要依据，具有指导意义。具有指导意义。

【技术实现步骤摘要】
一种纽莫康定杂质


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种纽莫康定杂质、其制备方法和其用于纽莫康定质量控制中的用途。

技术介绍

[0002]纽莫康定(pneumocandins)是由真菌Glarea lozoyensis产生的次级代谢产物，是合成抗真菌药物卡泊芬净(Caspofungin)的前体化合物，具有环状六肽母核和脂肪酸侧链结构。按照不同脯氨酸在母核上取代的位置差异主要可以分成三大类分别是纽莫康定A0(32羟基42甲基脯氨酸)、B0(32羟基脯氨酸)、和C0(42羟基脯氨酸)。
[0003]专利CN201710575306.3公开了肺念菌素B0(即纽莫康定B0)及类似物的结构，纽莫康定各组分结构如下式I所示：
[0004][0005][0006][0007]药物杂质没有治疗作用，并且影响药物的稳定性以及疗效。杂质检测和含量控制对药品质量控制以及安全用药密切相关。国家药品监督管理局(NMPA)对药物临床前研究中的杂质分析也越来越重视。在已经实施的2020年版《中国药典》中对于药品安全性的监管也更加严格。因此，制备出文献中尚未报道的杂质对于丰富纽莫康定杂质谱、质量研究、后期合成卡泊芬净杂质传递研究、用药安全性等，均具有重大的意义。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的是提供一种纽莫康定杂质，以解决现有技术中未能全面监控纽莫康定中存在的未知杂质问题。
[0009]本专利技术第一方面提供一种纽莫康定杂质，为方便叙述说明，命名为纽莫康定杂质h：
[0010]一种纽莫康定杂质，具有如下式所示结构：
[0011][0012]本专利技术第二方面提供一种纽莫康定杂质h的制备方法：
[0013]一种纽莫康定杂质h的制备方法包括以下步骤：将含有纽莫康定杂质h的粗品用醇溶剂溶解，反相制备柱上样，以纯化水为流动相A、以极性溶剂为流动相B进行梯度洗脱，收集目标成分流出液，收集液经减压浓缩、冻干得纽莫康定杂质h。
[0014]优选地，所述醇溶剂选自甲醇或乙醇。
[0015]优选地，所述极性溶剂选自乙腈、丙酮、甲醇中的一种，进一步优选为乙腈。
[0016]优选地，所述的含有纽莫康定杂质h的粗品与醇溶剂的质量体积比为1:2.0～4.0，其中质量以g计，体积以mL计。
[0017]进一步优选地，所述的含有纽莫康定杂质h的粗品与醇溶剂的质量体积比为1:2.0～3.0，其中质量以g计，体积以mL计。
[0018]优选地，所述的制备柱为装有反相填料的制备柱，所述反相填料选自Sepax GP
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C18(5um，120A)，Unisil 8
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120 C18，Unisil 5
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120 C18，Unisil 10
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100 C18，KROMASIL 10
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100 C18，FUJI C18 SPS100
‑
9中的一种；进一步优选为Sepax GP
‑
C18(5um，120A)。
[0019]优选地，以装柱填料的重量计，所述的制备柱上样量为0.0033
‑
0.0075g/g。
[0020]优选地，所述的梯度洗脱包含三个阶段，依次为：纽莫康定杂质h洗脱阶段；纽莫康定B0及纽莫康定C0洗脱阶段、平衡阶段，其中所述的纽莫康定杂质h洗脱阶段梯度洗脱的流速为35ml/min～45ml/min，进一步优选为40ml/min。
[0021]优选地，所述的洗脱梯度为：
[0022]时间min流速ml/minA％B％04055.0
‑
65.035.0
‑
45.054055.0
‑
65.035.0
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45.064035.0
‑
45.055.0
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65.074035.0
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45.055.0
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65.084055.0
‑
65.035.0
‑
45.0654055.0
‑
65.035.0
‑
45.070707.0
‑
15.085.0
‑
93.0100707.0
‑
15.085.0
‑
93.01014055.0
‑
65.035.0
‑
45.01304055.0
‑
65.035.0
‑
45.0
[0023]其中，流动相A为纯化水，流动相B选自乙腈、丙酮、甲醇中的一种。
[0024]进一步优选地，所述的梯度洗脱的梯度条件为：
[0025][0026][0027]其中，流动相A为纯化水，流动相B选自乙腈、丙酮、甲醇中的一种。
[0028]优选地，所述梯度洗脱测定波长范围是270～280nm，进一步优选为278nm。
[0029]优选地，所述的减压浓缩条件为：水浴温度35～45℃、真空度
‑
0.090MPa～
‑
0.100MPa。
[0030]优选地，所述的冻干的冻干参数设置为：
[0031][0032]进一步优选地，所述冻干曲线参数为：
[0033][0034]优选地，所述纽莫康定杂质h的制备方法在制备得到纽莫康定杂质h的同时，可以制备获得纽莫康定B0及其同分异构体纽莫康定C0的混合物。
[0035]本专利技术中用于制备纽莫康定杂质h的粗品来源于纽莫康定的粗品溶液，所述的纽莫康定的粗品可采用专利CN201610740366.1中公开的方法获得：
[0036]将含有纽莫康定B0的中试发酵液在搅拌的状态下，用磷酸调节pH值4.2，加入2％的助滤剂硅藻土，混匀，静置0.5小时，过滤，得到固体菌渣。菌渣用2倍95％乙醇浸提，过滤去除菌丝，得浸提液；调整浸提液的乙醇浓度至20％(V/V)。将其以0.5
‑
1.0BV/h的速度流经D101柱，依次用纯化水、30％(V/V)乙醇
‑
水溶液冲洗树脂柱，然后用80％(V/V)乙醇
‑
水溶液洗脱树脂柱，收集富含纽莫康定B0的洗脱液。在洗脱液中加入0.5％活性炭，在20℃条件下搅拌30分钟，过滤脱色。脱色液经过超滤过滤后，加水稀释至30％(V/V)。以0.5
‑
1.0BV/h的速度流经KB
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SPE
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HLB柱，用含乙醇30％(V/V)溶液冲洗树脂柱，再用乙醇80％(V/V)溶液洗脱，收集富含纽莫康定B0的洗脱液。将收集到的纽莫康定B0洗脱液，在30℃条件下真空浓缩，得到纽莫康定粗品。经HPLC检测，粗品中纽莫康定杂质h的色谱纯度约为0.10％。
[0037]化合物结构鉴定：
[0038]对本专利技术得到的冻干粉经过液质分析，得纽莫康定杂质本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种纽莫康定杂质，其特征在于，具有如式h所示结构：2.一种制备如权利要求1所述的纽莫康定杂质的方法，其特征在于，包括以下步骤：将含有纽莫康定杂质h的粗品用醇溶剂溶解，反相制备柱上样，以纯化水为流动相A、以极性溶剂为流动相B进行梯度洗脱，收集目标成分流出液，收集液经减压浓缩、冻干得纽莫康定杂质h。3.如权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述的醇溶剂选自甲醇或乙醇。4.如权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述的极性溶剂选自乙腈、丙酮、甲醇中的一种，优选为乙腈。5.如权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述的含有纽莫康定杂质h的粗品与醇溶剂的质量体积比为1:2.0～4.0，其中质量以g计，体积以mL计。6.如权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述的洗脱梯度为：时间min流速ml/minA％B％04055.0
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65.035.0
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45.054055.0
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65.035.0
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45.064035.0
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45.055.0
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65.074035.0
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45.055.0
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65.084055.0
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65.035.0
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45.0654055.0
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65.035.0
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45.070707.0
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15.085.0
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93.0100707.0
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15.085.0
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93.01014055.0
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65.035.0
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45.01304055.0
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65.035....

【专利技术属性】
技术研发人员：曾凡洲，朱兵峰，刘志钰，
申请(专利权)人：山东新时代药业有限公司，
类型：发明
国别省市：