用于精神分裂症检测的引物组、试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术提供了一种用于精神分裂症检测的引物组，包括BDNF引物组、β

【技术实现步骤摘要】
用于精神分裂症检测的引物组、试剂盒及检测方法


[0001]本专利技术涉及生物检测
，特别涉及一种用于精神分裂症检测的引物组；同时，本专利技术还涉及一种用于精神分裂症检测的试剂盒及其检测方法。

技术介绍

[0002]精神分裂症(schizophrenia,SC)是一类病因复杂、表型异质性高的慢性致残性疾病。目前普遍认为精神分裂症在普通人群中的终生患病率为1％，大多预后不良，超过50％的患者存在长期的间歇性精神问题，约20％的患者有残留症状，并导致精神残疾。精神分裂症的发病特征包括阳性症状(妄想、幻觉、兴奋等)、阴性症状(情感迟钝、情感退缩、情感交流障碍等)和认知功能障碍。我国目前临床精神科医生使用的精神分裂症的诊断标准有3个系统：中国的精神疾病分类与诊断标准、美国的精神疾病诊断统计分类系统和国际的疾病分类系统。而这些诊断方法是根据量表评估病人的感觉障碍、知觉障碍、思维障碍、意志与行为障碍来判断是否为精神分裂症。这种诊断的局限性在于用单个的症状代替临床相、用线性刻度对多变量症状进行评估、把不同性质上的症状说成只是程度上的差异、忽视了过与不及都可以是病、遗漏性和封闭性，以及排它性，这导致了经验丰富的精神医生可能反而不是好的评分者。精神分裂症临床症状出现多样性特点，而诊断却仅依靠精神检查，无有效生物学标记物作为指标，准确诊断确有难度。
[0003]CN104330573公开了用于判断精神分裂症的血清蛋白因子的检测方法，包括以下步骤：1)提取疑似患者的血液，分离血清蛋白；2)从分离的血清蛋白中检测神经生长因子(NGF)、白细胞介素(IL
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6)、钙结合蛋白S100B、干扰素(IFN
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γ)、肿瘤坏死因子(TNF
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α)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、碱性髓鞘蛋白(MBP)8种蛋白因子含量；3)将检测的蛋白因子含量与正常参考值相对比，科学的分类判断精神分裂症。对选定的作为精神分裂症诊断标记的血清蛋白因子浓度应用SDA和ROC曲线。从中发现BDNF、IL
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6、S100β、MBP和GFAP五个因子浓度对协助诊断精神分裂症的贡献率更大。并拟合五个重要变量浓度，发现使用ROC曲线联合多个蛋白因子拟合指标诊断精神分裂症时，诊断价值高于任何单种蛋白因子的诊断价值。
[0004]本领域技术人员知晓，生物检测领域并非指标越多，则结果越准确，两者并不是简单的呈正相关。检测指标越多，也不代表能够得到更可靠的检测结果。因此，提高精神分裂症的检测准确性，称为本领域技术人员亟待解决的问题。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术旨在提出一种用于精神分裂症诊断的引物组，以提高精神分裂症检测准确性。
[0006]为达到上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0007]一种用于精神分裂症检测的引物组，所述引物组包括BDNF引物组、β
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NGF引物组、CD133引物组和D2引物组；
[0008]所述BDNF引物组包括BDNF上游引物和BDNF下游引物；所述BDNF上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述BDNF下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；
[0009]所述β
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NGF引物组包括β
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NGF上游引物和β
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NGF下游引物；所述β
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NGF上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，所述β
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NGF下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；
[0010]所述CD133引物组包括CD133上游引物和CD133下游引物；所述CD133上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，所述CD133下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示；
[0011]所述D2引物组包括D2上游引物和D2下游引物；所述D2上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示，所述D2下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示。
[0012]进一步的，所述引物组的浓度包括以下(i)至(viii)中的一项或多项：(i)所述BDNF上游引物的浓度为5～15μM；(ii)所述BDNF下游引物的浓度为5～15μM；(iii)所述β
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NGF上游引物的浓度为5～15μM；(iv)所述β
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NGF下游引物的浓度为5～15μM；(v)所述CD133上游引物的浓度为5～15μM；(vi)所述CD133下游引物的浓度为5～15μM；(vii)所述D2上游引物的浓度为5～15μM；(viii)所述D2下游引物的浓度为5～15μM。
[0013]其次，本专利技术提供了一种用于精神分裂症检测的试剂盒，包括前述的引物组。
[0014]进一步的，所述试剂盒还包括缓冲液、dNTP混合液、TaqDNA聚合酶。
[0015]进一步的，所述缓冲液包括Tris
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HCL；优选的，所述Tris
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HCL的浓度为5～15mM。
[0016]进一步的，所述dNTP混合液包括dATP、dGTP、dTTP、dCTP、dUTP、MgCl2和SYBRGreen1。
[0017]进一步的，所述dATP的浓度为0.2～0.8mM；和/或所述dGTP的浓度为0.2～0.8mM；和/或所述dTTP的浓度为0.2～0.8mM；和/或所述dCTP的浓度为0.2～0.8mM；和/或所述dUTP的浓度为0.2～0.8mM；和/或所述MgCl2的浓度为3～7mM；和/或所述SYBRGreen1的体积百分比浓度为0.025％。
[0018]进一步的，所述TaqDNA聚合酶的浓度为3～7U/μL。
[0019]最后，本专利技术还提供了一种精神分裂症的检测方法，包括以下步骤：
[0020]S1：提取样本的总RNA；
[0021]S2：将所述总RNA逆转录为cDNA，得到待检测样品；
[0022]S3：采用前述的引物组或前述的试剂盒，对所述待检测样品中的BDNF、β
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NGF、CD133和D2进行PCR扩增，得到BDNF、β
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NGF、CD133和D2的表达水平。
[0023]进一步的所述样本来源于血液、海马组织或脑前额叶组织。
[0024]相对于现有技术，本专利技术具有以下优势：
[0025]本专利技术的用于精神分裂症检测的引物组，通过更合适的生物标记物、更合适的生物标记物数量和更合适的引物组，提高了精神分裂症检测结果的可靠性。为了便于产业应用，本专利技术还提供了一种用于精神分裂症检测的试剂盒。此外，本专利技术的引物组和试剂盒还可用于评估精神分裂症药物药效。本专利技术的试剂盒专门对精神分裂症检测开发，特异性好，灵敏度高，结果可靠，稳定性好，尤其适用于阴性症状和认知功能障碍的检测。
附图说明
[0026]为了更清楚地说明本专利技术实施方式或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于精神分裂症检测的引物组，其特征在于：所述引物组包括BDNF引物组、β
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NGF引物组、CD133引物组和D2引物组；所述BDNF引物组包括BDNF上游引物和BDNF下游引物；所述BDNF上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述BDNF下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；所述β
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NGF引物组包括β
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NGF上游引物和β
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NGF下游引物；所述β
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NGF上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，所述β
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NGF下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；所述CD133引物组包括CD133上游引物和CD133下游引物；所述CD133上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，所述CD133下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示；所述D2引物组包括D2上游引物和D2下游引物；所述D2上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示，所述D2下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示。2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于：所述引物组的浓度包括以下(i)至(viii)中的一项或多项：(i)所述BDNF上游引物的浓度为5～15μM；(ii)所述BDNF下游引物的浓度为5～15μM；(iii)所述β
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NGF上游引物的浓度为5～15μM；(iv)所述β
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NGF下游引物的浓度为5～15μM；(v)所述CD133上游引物的浓度为5～15μM；(vi)所述CD133下游引物的浓度为5～15μM；(vii)所述D2上游引物的浓度为5～15μM；(viii)所述D2下游...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晗，李文强，杨鸽，崔祥正，吴雷振，吴中旗，曹建甫，王艳艳，张一凡，吕路线，
申请(专利权)人：河南昆仑精准医疗科技有限公司新乡市思为脑科学研究院，
类型：发明
国别省市：