具有CD3和CD19双重特异性的聚乙二醇化T细胞衔接器制造技术

本发明专利技术提供了对T细胞上的CD3和B细胞上的CD19具有双重亲和力的T

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有CD3和CD19双重特异性的聚乙二醇化T细胞衔接器
[0001]本国际专利申请要求于2021年3月19日提交的国际专利申请号：PCT/CN2021/081765的权益，其全部内容通过引用并入以用于所有目的。


[0002]本专利技术涉及对T细胞上的CD3和B细胞上的CD19具有双重亲和力的T
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BsAb(T细胞衔接双特异性抗体)及其在治疗自身免疫性疾病中的用途。具体而言，本专利技术涉及对CD3和CD19具有双重亲和力的聚乙二醇化T
‑
BsAb及其在治疗多发性硬化症(MS)以及其它自身免疫性疾病中的用途。
[0003]专利技术背景
[0004]存在超过80种不同的自身免疫性疾病。遗传、饮食、感染和化学品暴露可以涉及在内(Campbell,A.W.2014,Autoimmune Dis 2014,152428)。B细胞通过分泌破坏自身组织的自身抗体、呈递抗原、激活促炎性T细胞和产生细胞因子，在自身免疫性疾病的发病机制中发挥关键作用(Sabatino,J.J.等人2019,Nat Rev Neurosci 20,728
‑
745；Lee,D.S.W.等人2020,Nat Rev Drug Discov,1
‑
21)。B细胞耗竭已被证明是自身免疫性疾病的有效治疗策略(Hofmann,K.等人2018,Front Immunol 9,835)。FDA批准的B细胞耗竭疗法已扩展到多种自身免疫性疾病，从器官特异性疾病如天疱疮和MS，到全身性疾病如ANCA相关性血管炎、类风湿性关节炎(RA)和系统性红斑狼疮(SLE)(Barnas,J.L.,等人2019,Curr Opin Immunol 61,92
‑
99)。这些疗法主要是基于单克隆抗体的，并靶向具有表面标志物如CD20和CD19的B细胞(Townsend,M.J.,等人2010,Immunological Reviews 237,264
‑
283；Frampton,J.E.2020,Drugs 80,1259
‑
1264)。然而，抗CD20抗体(奥瑞珠单抗(ocrelizumab)、奥法木单抗(ofatumumab)、利妥昔单抗(Rituximab))不能有效去除对传统的免疫抑制疗法极其难治的分泌自身抗体的长寿命浆细胞(Chen,D.等人2016,The Journal of Immunology 196,1541
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1549)。事实上，约20％接受利妥昔单抗治疗的MS患者在48周时经历了疾病复发(Stephen L.Hauser,2008,The New Engl and Journal of Medicine 358,12)。抗CD20抗体疗法未能充分消除的长寿命自身反应性浆细胞可能在一部分MS患者中导致疾病复发。据报道，CD19
+
B细胞在多发性硬化的发病机制中起更关键的作用，抗CD19单克隆抗体在治疗MS的EAE(实验性自身免疫性脑脊髓炎)动物模型中显示出比抗CD20抗体更好的治疗效果(Chen，D.等人2016,The Journal of Immunology 196,1541
‑
1549)。然而，抗CD19抗体靶向并耗竭几乎所有B细胞亚群，这可能对患者造成病毒感染的严重威胁。最近的研究表明，接受B细胞耗竭剂治疗的患者经历更高的病毒感染风险、更高的严重疾病率和死亡率(Loarce
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Martos,J.等人2020,Rheumatol Int 40,2015
‑
2021)。
[0005]由于并非所有CD19
+
B细胞都参与自身免疫发病机制，因此靶向病理特异性B细胞而不是耗竭所有CD19
+
B细胞是治疗自身免疫性疾病如MS的更有效、更有前景和更安全的疗法。
[0006]一些研究人员提出，博纳吐单抗(blinatumomab)作为通过将T细胞重新定向到CD19
+
B细胞以裂解B细胞被批准用于ALL(急性淋巴细胞白血病)治疗的T
‑
BsAb或BiTE(双特
异性T细胞衔接器)，可能是自身免疫性疾病治疗的候选药物(Musette,P.等人2018,Front Immunol 9,622)。然而，临床研究显示在接受博纳吐单抗治疗的患者中频繁出现细胞因子释放综合征(CRS)和中枢神经系统(CNS)毒性。有研究提出，博纳吐单抗的神经毒性可能是由炎性细胞因子的快速释放引起的(Topp,M.S.等人2012,Blood 120,670
‑
670；Portell,C.A.,等人2013,Clin Pharmacol 5,5
‑
11；Bargou,R.等人2008,Science 321,974
‑
977；Topp,M.S.等人2011,J Clin Oncol 29 2493
‑
2498；Topp,M.S.等人2012,Blood 120,5185
‑
5187)。可以预见的是，治疗慢性疾病的药物的安全性要求比抗肿瘤药物更严格。由于自身免疫性疾病是慢性疾病，频繁且严重的CRS和CNS毒性构成了使用博纳吐单抗治疗自身免疫性疾病的障碍。此外，由于其1.25小时的短循环半衰期，博纳吐单抗通过便携式微型泵经由连续静脉输注施用，这除了与长时间连续输注相关的高感染风险外，还需要癌症患者住院(对自身免疫性疾病患者的治疗是一个挑战)(Portell,C.A.,等人2013,Clin Pharmacol 5,5
‑
11；Topp,M.S.等人2012,Blood 120,5185
‑
5187)
1,2
。
[0007]尽管博纳吐单抗在治疗血液系统癌症方面取得了巨大成功，但上述问题和挑战促使开发具有较弱T细胞结合亲和力的T
‑
BsAb，以将严重的CRS毒性与强大的细胞毒性解耦，并在仍有效激活细胞毒性T细胞以及与病理靶细胞形成免疫突触以杀伤靶细胞的同时最小化细胞因子释放。
[0008]专利技术概述
[0009]在一个方面，本专利技术提供了治疗自身免疫性疾病的方法，其包括：
[0010]向受试者施用有效量的式Ia化合物或其药学上可接受的盐
[0011][0012]其中：
[0013]P是非免疫原性聚合物；
[0014]T是多官能(例如三官能)小分子接头部分并且具有一个、两个或更多个能够与一个、两个或更多个相同或不同的多肽进行位点特异性缀合的官能团；
[0015]A1和A2各自独立地选自抗体，例如单链抗体(例如单链可变片段，scFv)、单结构域抗体(纳米抗体)或Fab，其中A1和A2之一识别并结合抗原CD3，另一个识别并结合抗原CD19。识别并结合抗原CD19的抗体或Fab可以结合CD19的细胞外部分。识别并结合抗原CD3的抗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.治疗受试者的自身免疫性疾病的方法，其包括：向所述受试者施用有效量的式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐其中：P是非免疫原性聚合物；T是多官能(例如三官能)小分子接头部分并且具有一个、两个或更多个能够与一个、两个或更多个相同或不同的多肽进行位点特异性缀合的官能团；A1和A2各自独立地选自抗体，例如单链抗体、单结构域抗体(纳米抗体)或Fab，其中A1和A2之一识别并结合抗原CD3，另一个识别并结合抗原CD19。2.治疗受试者的自身免疫性疾病的方法，其包括：向所述受试者施用有效量的式(Ib)的化合物或其药学上可接受的盐，其中：P是非免疫原性聚合物；B是H或选自C1‑
10
烷基和芳基的封端基团，其中所述烷基或芳基的一个或多个碳任选地被杂原子替代；T是具有一个、两个或更多个官能团的三官能(例如氨基酸)接头，其在由双官能间隔物衍生和/或延伸后能够与A1和A2或它们的衍生物位点特异性缀合，其中T和(L1)
a
之间的连接基以及T和(L2)
b
之间的连接基可以相同或不同；L1和L2各自独立地是双官能接头(例如肽)；a和b各自是选自1、2、3、4、5、6、7、8、9和10的整数；A1和A2各自独立地选自抗体，例如单链抗体、单结构域抗体(纳米抗体)或Fab，其中A1和A2之一识别并结合所述抗原CD3，另一个识别并结合所述抗原CD19；和y是选自1、2、3、4、5、6、7、8、9和10的整数。3.权利要求1或2的方法，其中所述自身免疫性疾病选自天疱疮、视神经脊髓炎/视神经脊髓炎谱系障碍(NOD/NMOD)、多发性硬化症(MS)、ANCA相关性血管炎、类风湿性关节炎(RA)、克罗恩病、炎症性肠病(IBD)和系统性红斑狼疮(SLE)、哮喘、银屑病、特应性皮炎、红斑狼疮、1型糖尿病等。4.权利要求1
‑
3中任一项的方法，其中所述自身免疫性疾病对常规小分子药物疗法如使用Tecfidera、芬戈莫德、Tysabri、奥巴捷或克拉屈滨的疗法具有耐药性或难治性。5.权利要求1
‑
3中任一项的方法，其中所述自身免疫性疾病对常规蛋白质药物疗法如使用克帕松、IFN
‑
β
‑
1a、IFN
‑
β
‑
1b、抗CD52抗体(阿仑珠单抗，Alemtuzumab)或那他珠单抗的疗法具有耐药性或难治性。6.权利要求1
‑
3中任一项的方法，其中所述自身免疫性疾病对B细胞耗竭疗法如使用抗
CD19药剂(伊奈利珠单抗、Obexelimab)或抗CD20药剂(利妥昔单抗、奥瑞珠单抗、奥法木单抗)的疗法具有耐药性或难治性。7.权利要求1
‑
6中任一项的方法，其中A1和A2各自独立地选自Fab、单链抗体和单结构域抗体(纳米抗体)。8.权利要求1至7中任一项的方法，其中T和A1之间的连接基、T和A2之间的连接基、T和(L1)
a
之间的连接基、T和(L2)
a
之间的连接基、(L1)
a
和A1之间的连接基、(L2)
b
和A2之间的连接基、(L1)
a
内的连接基和(L2)
b
内的连接基各自独立地衍生自选自以下的官能团：卤代烷、酰卤、醛、酮、酯、酸酐、羧酸、酰胺、胺、酰肼、烷基肼、羟基、环氧化物、硫醇、马来酰亚胺、2
‑
吡啶基二硫基变体、芳族砜或乙烯基砜、丙烯酸酯、溴代或碘代乙酰胺、叠氮化物、炔烃、二苯并环辛炔(DBCO)、2
‑
氨基苯甲醛或2
‑
氨基乙酰苯基团、酰肼、肟、酰基三氟硼酸钾、O
‑
氨基甲酰基羟胺、反式环辛烯、四嗪和三芳基膦。9.权利要求2
‑
8中任一项的方法，其中L1和L2各自包含独立地选自以下的间隔物：
‑
(CH2)
m
XY(CH2)
n
‑
、
‑
X(CH2)
m
O(CH2CH2O)
p
(CH2)
n
Y
‑
、
‑
(CH2)
m
X
‑
Y(CH2)
n
‑
、
‑
(CH2)
m
杂环基
‑
、
‑
(CH2)
m
X
‑
、
‑
X(CH2)
m
Y
‑
，和氨基酸或具有2至50个氨基酸残基的肽；其中m、n和p在每种情况下独立地为0至25范围的整数；X和Y在每种情况下独立地选自C(＝O)、CR1R2、NR3、S、O或无，其中R1和R2独立地代表氢、C1‑
10
烷基或(CH2)1‑
10
C(＝O)，R3是H或C1‑
10
烷基，并且其中所述杂环基衍生自马来酰亚胺基、应变烯烃和炔烃、叠氮化物或四唑基部分。10.权利要求1
‑
9中任一项的方法，其中P包含聚乙二醇(PEG)、右旋糖酐、碳水化合物基聚合物、聚环氧烷、聚乙烯醇、羟丙基
‑
甲基丙烯酰胺(HPMA)或其共聚物。11.权利要求2
‑
10中任一项的方法，其中P包含PEG并且B是甲基或C1‑
10
烷基。12.权利要求1
‑
11中任一项的方法，其中P包括分子量范围为3000Da至80000Da的PEG。13.权利要求1
‑
12中任一项的...

【专利技术属性】
技术研发人员：文瑜，刘树民，谭双羽，乌德春，
申请(专利权)人：深圳康源久远生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：