CCK-8作为RIPK1抑制剂的应用制造技术

本发明专利技术公开了CCK

【技术实现步骤摘要】
CCK
‑
8作为RIPK1抑制剂的应用


[0001]本专利技术属于医药
，特别涉及CCK
‑
8作为RIPK1抑制剂的应用。

技术介绍

[0002]坏死性凋亡(Necroptosis)是最典型的程序性坏死，Necroptosis的发生原因之一是受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)的蛋白酶活性异常导致的RIPK1,受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)及其底物，混合谱系激酶结构域样蛋白(MLKL)的异常磷酸化，MLKL蛋白寡聚化转移到细胞膜则是执行坏死的关键。RIPK1作为坏死信号的上游则是坏死的重要检查点。相关研究表明，线粒体的反向电子传递链(Reverse electron transport chain RET)对坏死的发生至关重要，细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide Adenine Dinucleotide NAD
+
)的减少是RET的重要特征之一。
[0003]RIPK1广泛表达于各种细胞类型，在脂肪、内皮、血管周围细胞簇中表达最为丰富，在免疫细胞簇(树突细胞、巨噬细胞和T细胞)也有所表达。因此如果机体的RIPK1异常活化则会造成非常严重的后果。研究发现，异常坏死信号的激活涉及多种疾病的病理过程，主要包括：1)急性脑、肾、心脏损伤及各种器官炎症，2)多发性硬化症(Multiple sclerosis MS)、肌萎缩性侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis ALS)和阿尔茨海默病(Alzheimer's disease AD)等神经退行性疾病，3)自身免疫性疾病(银屑病等)，4)全身性炎症反应综合症(Systemic Inflammatory Response Syndrome,SIRS)。
[0004]CCK
‑
8试剂(Cell Counting Kit
‑
8细胞计数试剂)中含有WST
–
8[化学名：2
‑
(2
‑
甲氧基
‑4‑
硝基苯基)
‑3‑
(4
‑
硝基苯基)
‑5‑
(2,4
‑
二磺酸苯)
‑
2H
‑
四唑单钠盐]和电子载体1
‑
甲氧基
‑5‑
甲基吩嗪
‑
硫酸二甲酯(1
‑
Methoxy PMS)，前者在后者的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶氧化为具有高度水溶性的黄色甲臜产物，生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。
[0005]但目前尚未有CCK
‑
8药理作用的相关报道，基于CCK
‑
8的工作原理可知，CCK
‑
8发挥作用必须要在电子偶联试剂1
‑
Methoxy PMS存在的情况下，WST
‑
8虽只是转化为水溶性的黄色甲臜产物的前体，但是不排除它以及转化产物甲臜对细胞有一定的作用。经检索尚未有将CCK
‑
8作为RIPK1抑制剂的相关报道。

技术实现思路

[0006]针对现有技术中存在的问题，本专利技术的目的在于提供了CCK
‑
8作为RIPK1抑制剂的应用。
[0007]为实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
[0008]本专利技术第一方面提供了CCK
‑
8作为RIPK1抑制剂的应用。
[0009]优选的，上述应用中，所述CCK
‑
8能够剂量依赖性抑制细胞的坏死性凋亡。
[0010]优选的，上述应用中，所述CCK
‑
8能够有效抑制RIPK1的活性。
[0011]本专利技术第二方面提供了上述CCK
‑
8作为RIPK1抑制剂在治疗坏死性凋亡和RIPK1异常失调相关疾病中的应用。
[0012]优选的，上述应用中，所述RIPK1异常失调相关疾病包括但不限于：急性脑、肺、肾、心脏损伤及各种器官炎症、多发性硬化症(Multiple sclerosis MS)、肌萎缩性侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis ALS)、阿尔茨海默病、帕金森病、银屑病、肿瘤坏死因子(TNF)诱导的全身性炎症反应综合症(Systemic Inflammatory Response Syndrome,SIRS)、炎症性肠病、肌萎缩性侧索硬化症和额颞叶痴呆、溶酶体储存障碍、败血症、急性缺血损害脓毒症、脑急性或缺血性损伤、急性或缺血性损伤、系统性红斑狼疮、败血症、类风湿性关节炎、疮痈溃疡、热射病、烧伤感染等。
[0013]本专利技术第三方面提供了一种药物组合物，用于治疗坏死性凋亡和RIPK1异常失调相关疾病，所述药物组合物含有RIPK1抑制剂，所述RIPK1抑制剂为CCK
‑
8。
[0014]本专利技术具备如下有益效果：
[0015](1)本专利技术中，研究结果表明，CCK
‑
8能够有效抑制RIPK1依赖的细胞坏死(坏死性凋亡，Necroptosis)，且毒性小；CCK
‑
8能够有效抑制RIPK1的活性。
[0016](2)本专利技术中，CCK
‑
8可作为RIPK1抑制剂治疗坏死性凋亡(Necroptosis)和RIPK1异常失调相关疾病，诸如急性脑、肺、肾、心脏损伤及各种器官炎症、多发性硬化症、肌萎缩性侧索硬化症和阿尔茨海默病、帕金森病、银屑病、全身性炎症反应综合症(SIRS)、炎症性肠病、肌萎缩性侧索硬化症和额颞叶痴呆、溶酶体储存障碍、败血症、急性缺血损害脓毒症、脑急性或缺血性损伤、急性或缺血性损伤、系统性红斑狼疮、败血症、类风湿性关节炎、疮痈溃疡、热射病、烧伤感染等，为这类疾病的治疗提供新的解决方案。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单的介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0018]图1A为CCK
‑
8预处理后，小鼠骨髓来源巨噬细胞BMDMs经肿瘤坏死因子TNF
‑
α(T)、Smac mimetic LCL
‑
161(S)以及IDN
‑
6556(I)处理后的细胞显微图；
[0019]图1B为CCK
‑
8预处理后，小鼠骨髓来源巨噬细胞BMDMs经肿瘤坏死因子TNF
‑
α(T)、Smac mimetic LC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.CCK
‑
8作为RIPK1抑制剂的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述CCK
‑
8能够抑制细胞的坏死性凋亡。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述CCK
‑
8能够有效抑制RIPK1的活性。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述CCK
‑
8作为RIPK1抑制剂在治疗坏死性凋亡和RIPK1异常失调相关疾病中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述RIPK1异...

【专利技术属性】
技术研发人员：欧阳东云，何贤辉，石富丽，查庆兵，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：