针对活化素受体样激酶1的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术了提供了针对活化素受体样激酶1(ALK

【技术实现步骤摘要】
针对活化素受体样激酶1的抗体及其用途


[0001]本专利技术了提供了针对活化素受体样激酶1(ALK
‑
1)的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段对ALK
‑
1具备提高的亲和力，能够更为有效地抑制ALK
‑
1/TGF
‑
β
‑
1/Smadl信号通路，阻断Smadl磷酸化及下游转录反应，从而产生抑制肿瘤血管生长的作用。本专利技术还涉及这些抗体或其抗原结合片段用于抑制肿瘤血管生长相关的治疗用途。

技术介绍

[0002]ALK
‑
1(activin receptor
‑
like kinase
‑
1)，即活化素受体样激酶1，是TGF
‑
β受体家族中的一员，主要表达在血管内皮细胞，与内皮细胞的生长和迁移有关，并在在调控血管发生或修复中具有重要作用。血管生成是一个生理学过程，包括从预先存在的血管和/或循环内皮干细胞形成新的血管。这在生长、发育以及创伤愈合中是一个正常过程。但是，在肿瘤从休眠状态到恶性状态的转变过程中，血管生成也是一个重要步骤。发生疾病例如肿瘤时，机体丧失维持血管生成平衡的能力。新生血管滋生异常组织，破坏正常组织，并且对于某些肿瘤，新生血管允许肿瘤细胞逃逸到循环系统并在其它器官留居(肿瘤转移)。因此，血管生成抑制剂是一类非常有希望的抗肿瘤药物，所述药物靶向抑制该异常过程从而阻断或减缓肿瘤生长。
[0003]通过靶向具有高选择性内皮功能的靶标例如ALK
‑
1，可抑制II型受体的二聚化，并进而阻断Smadl磷酸化以及下游的转录反应，从而抑制血管生成。目前已报道抗ALK
‑
1单克隆抗体作为血管生成抑制剂的潜力，可参见例如PCT国际申请WO2007040912。GT90001是一种结合ALK
‑
1的胞外域(ECD)的全人源化IgG2单克隆抗体，其通过阻止阻断TGF
‑
β受体，能够产生抑制肿瘤血管生长等作用，影响肿瘤微环境，从而减缓肿瘤进程。但是GT90001的亲和力较低，可能影响药效并提高后续产业化的难度。因此需要开发更为有效的抗ALK
‑
1的抗体，从而提供有效的治疗或辅助治疗肿瘤的手段。

技术实现思路

[0004]本专利技术的抗体
[0005]在一个方面，本专利技术提供了能够特异性结合活化素受体样激酶1(ALK
‑
1)的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含：
[0006](i)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NOs:1、3
‑
11任一项所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NOs:12
‑
18任一项所示的序列；或，
[0007](ii)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NOs:3
‑
11任一项所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NOs:2、12
‑
18任一项所示的序列。
[0008]在某些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NO:1所示的序列的VH；以及，包含SEQ ID NOs:12
‑
18任一项所示的序列的VL。
[0009]在某些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：
[0010](a)包含SEQ ID NO:1所示的序列的VH；以及，包含SEQ ID NO:15所示的序列的VL；
或，
[0011](b)包含SEQ ID NO:1所示的序列的VH；以及，包含SEQ ID NO:16所示的序列的VL；或，
[0012](c)包含SEQ ID NO:1所示的序列的VH；以及，包含SEQ ID NO:18所示的序列的VL。
[0013]在某些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NOs:3
‑
11任一项所示的序列的VH；以及，包含SEQ ID NO:2所示的序列的VL。
[0014]在某些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQ ID NOs:3
‑
9任一项所示的序列的VH；以及，包含SEQ ID NOs:12、13、16
‑
18任一项所示的序列的VL。
[0015]在某些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：
[0016](a)包含SEQ ID NOs:3、4、6、7、9任一项所示的序列的VH；以及，包含SEQ ID NO:18所示的序列的VL；或，
[0017](b)包含SEQ ID NOs:3、5、6、9任一项所示的序列的VH；以及，包含SEQ ID NO:17所示的序列的VL；或，
[0018](c)包含SEQ ID NOs:3
‑
9任一项所示的序列的VH；以及，包含SEQ ID NO:16所示的序列的VL；或，
[0019](d)包含SEQ ID NO:7或8所示的序列的VH；以及，包含SEQ ID NO:13所示的序列的VL；或，
[0020](e)包含SEQ ID NO:6所示的序列的VH；以及，包含SEQ ID NO:12所示的序列的VL。
[0021]在某些实施方案中，本专利技术的抗体或其抗原结合片段可以进一步包含来源于哺乳动物(例如，人)免疫球蛋白的恒定区序列或其变体，所述变体与其所源自的序列相比具有一个或多个氨基酸的置换、缺失或添加。
[0022]在某些实施方案中，本专利技术的抗体或其抗原结合片段的重链包含人免疫球蛋白的重链恒定区(CH)或其变体，所述变体与其所源自的序列相比具有一个或多个氨基酸的置换、缺失或添加(例如，至多20个、至多15个、至多10个、或至多5个氨基酸的置换、缺失或添加；例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的置换、缺失或添加)；和/或，
[0023]本专利技术的抗体或其抗原结合片段的轻链包含人免疫球蛋白的轻链恒定区(CL)或其变体，所述变体与其所源自的序列相比具有至多20个氨基酸的保守置换(例如至多15个、至多10个、或至多5个氨基酸的保守置换；例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的保守置换)。
[0024]在一些实施方案中，所述重链恒定区(CH)的变体与其所源自的序列相比可以具有一个或多个氨基酸的保守置换。在此类实施方案中，所述重链恒定区(CH)的变体与其所源自的野生型序列相比可以具有相同或基本相同的效应子功能。
[0025]在另一些实施方案中，所述重链恒定区(CH)的变体可以包含一个或多个氨基酸突变以改变本专利技术抗体的下列中的一个或更多个特性：Fc受体结合、抗体糖基化、半胱氨酸残基的数目、效应细胞功能或补体功能等。可以通过将抗体恒定区中的至少一个氨基酸残基替换为不同残基，产生功能改变，例如，改变抗体对效应子配体(如FcR或补体C1q)的亲和力，从而改变效应子功能(例如降本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.能够特异性结合活化素受体样激酶1(ALK
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1)的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含：(i)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NOs:1、3
‑
11任一项所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NOs:12
‑
18任一项所示的序列；或，(ii)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NOs:3
‑
11任一项所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NOs:2、12
‑
18任一项所示的序列。2.权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段包含：重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NO:1所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NOs:12
‑
18任一项所示的序列；优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含：(a)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NO:1所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO:15所示的序列；或，(b)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NO:1所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO:16所示的序列；或，(c)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NO:1所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO:18所示的序列。3.权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段包含：重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NOs:3
‑
11任一项所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO:2所示的序列。4.权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段包含：重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NOs:3
‑
9任一项所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NOs:12、13、16
‑
18任一项所示的序列；优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含：(a)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NOs:3、4、6、7、9任一项所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO:18所示的序列；或，(b)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NOs:3、5、6、9任一项所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO:17所示的序列；或，(c)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NOs:3
‑
9任一项所示的序列；以及，轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO:16所示的序列；或，(d)重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NO:7或8所示的序...

【专利技术属性】
技术研发人员：缪小牛，胡化静，罗羿，王平，
申请(专利权)人：普米斯生物技术珠海有限公司，
类型：发明
国别省市：