NKp46抗体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种靶向NKp46的抗体、其制备方法和用途。具体地，本发明专利技术公开了一种新的靶向NKp46的人源单克隆抗体。本发明专利技术还公开了制备所述的单克隆抗体的方法。本发明专利技术的单克隆抗体能够高特异性地结合NKp46抗原，其具有很高的亲和力并且具有显著抗肿瘤等活性。高的亲和力并且具有显著抗肿瘤等活性。

【技术实现步骤摘要】
NKp46抗体及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于抗体领域，具体地涉及一种NKp46抗体及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]保持有效的免疫监视而不引起自身免疫反应需要效应T细胞反应的准确性。当免疫系统针对自身抗原发起免疫反应时便出现自身免疫性疾病。尽管在引发和维持自身免疫性反应中涉及的机制还不清楚，但是可能涉及在次级淋巴器官中以前在免疫方面被忽视的抗原的出现。
[0003]自然杀伤(NK)细胞是包括在非传统免疫中涉及的淋巴细胞的亚种群。NK细胞提供一种有效的免疫监督机制，由此可消除不希望的细胞如肿瘤细胞或病毒感染的细胞。NK细胞活性是通过包含两种活化和抑制信号的复杂机制进行调控的。
[0004]NK细胞上的一重要的抑制性受体CD94
‑
NKG2A，其与非典型的MHC I类分子HLA
‑
E相互作用。这些受体中的一些具有调节T细胞抗原受体
‑
依赖性T细胞活化的阈值的能力。在罕见的抑制性受体缺乏的情况下，这些活化同类型(isoform)可能扩大T细胞效应器的功能并且促成自身免疫病理。NKG2A的氨基酸序列在哺乳动物(包括灵长类动物)中发生变化。例如，人NKG2A蛋白的和猕猴同源性少于90％。
[0005]已证实多种不同的NK特异性受体在NK细胞介导的对HLA I类缺陷型靶细胞的识别和杀伤中起重要作用。这些受体(称为NKp30、NKp46和NKp44)是Ig超家族的成员。它们的交联(通过特异性mAb诱导)导致強烈的NK细胞激活，致使细胞内Ca
++
水平升高，触发细胞毒性和淋巴因子释放。重要的是，单克隆抗体介导的NKp30、NKp46和/或NKp44的活化导致对于多种靶细胞的NK细胞毒性的激活。这些发现为这些受体在天然细胞毒性中的一种中心性作用提供了证据。
[0006]尽管目前关于靶向NKp46的抗体已经开展相关研究，但仍需获得活性更强，亲和力更高的特异性抗体。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供NKp46抗体及其制备方法和应用。
[0008]具体地，本专利技术提供了一种NKp46抗体，其包括NKp46抗体的重链可变区重链CDR1(VH
‑
CDR1)、重链CDR2(VH
‑
CDR2)和重链CDR3(VH
‑
CDR3)中的一种或多种，和NKp46抗体的轻链可变区轻链CDR1(VL
‑
CDR1)、轻链CDR2(VL
‑
CDR2)和轻链CDR3(VL
‑
CDR3)中的一种或多种。
[0009]在本专利技术的第一方面，提供了一种抗体的重链可变区，所述的重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
[0010]SEQ ID NO:9所示的VH
‑
CDR1，
[0011]SEQ ID NO:13所示的VH
‑
CDR2，和
[0012]SEQ ID NO:17所示的VH
‑
CDR3；
[0013]或者，
[0014]SEQ ID NO:10所示的VH
‑
CDR1，
[0015]SEQ ID NO:14所示的VH
‑
CDR2，和
[0016]SEQ ID NO:18所示的VH
‑
CDR3；
[0017]或者，
[0018]SEQ ID NO:11所示的VH
‑
CDR1，
[0019]SEQ ID NO:15所示的VH
‑
CDR2，和
[0020]SEQ ID NO:19所示的VH
‑
CDR3；
[0021]或者，
[0022]SEQ ID NO:12所示的VH
‑
CDR1，
[0023]SEQ ID NO:16所示的VH
‑
CDR2，和
[0024]SEQ ID NO:20所示的VH
‑
CDR3，
[0025]其中，上述氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、修饰和/或取代至少一个氨基酸的，并能够保留对NKP46的结合亲和力的衍生序列。
[0026]在另一优选例中，所述重链可变区还包括人源的FR区或鼠源的FR区。
[0027]在另一优选例中，所述嵌合抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1
‑
4所示。
[0028]在另一优选例中，所述人源化抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:33
‑
40所示。
[0029]在本专利技术的第二方面，提供了一种抗体的重链，所述的重链具有本专利技术第一方面所述的重链可变区。
[0030]在另一优选例中，所述的抗体的重链还包括重链恒定区。
[0031]在另一优选例中，所述的重链恒定区为人源、鼠源或兔源的。
[0032]在本专利技术的第三方面，提供了一种抗体的轻链可变区，所述轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
[0033]SEQ ID NO:21所示的VL
‑
CDR1，
[0034]SEQ ID NO:25所示的VL
‑
CDR2，和
[0035]SEQ ID NO:29所示的VL
‑
CDR3；
[0036]或者，
[0037]SEQ ID NO:22所示的VL
‑
CDR1，
[0038]SEQ ID NO:26所示的VL
‑
CDR2，和
[0039]SEQ ID NO:30所示的VL
‑
CDR3；
[0040]或者，
[0041]SEQ ID NO:23所示的VL
‑
CDR1，
[0042]SEQ ID NO:27所示的VL
‑
CDR2，和
[0043]SEQ ID NO:31所示的VL
‑
CDR3；
[0044]或者，
[0045]SEQ ID NO:24所示的VL
‑
CDR1，
[0046]SEQ ID NO:28所示的VL
‑
CDR2，和
[0047]SEQ ID NO:32所示的VL
‑
CDR3，
[0048]其中，上述氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、修饰和/或取代至少一个氨基酸的，并能够保留对NKP46的结合亲和力的衍生序列。
[0049]在另一优选例中，所述轻链可变区还包括人源的FR区或鼠源的FR区。
[0050]在另一优选例中，所述嵌合抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:5
‑
8所示。
[0051]在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗体的重链可变区，其特征在于，所述的重链可变区具有选自下组的互补决定区CDR：SEQ ID NO:9所示的VH
‑
CDR1，SEQ ID NO:13所示的VH
‑
CDR2，和SEQ ID NO:17所示的VH
‑
CDR3；或者，SEQ ID NO:10所示的VH
‑
CDR1，SEQ ID NO:14所示的VH
‑
CDR2，和SEQ ID NO:18所示的VH
‑
CDR3；或者，SEQ ID NO:11所示的VH
‑
CDR1，SEQ ID NO:15所示的VH
‑
CDR2，和SEQ ID NO:19所示的VH
‑
CDR3；或者，SEQ ID NO:12所示的VH
‑
CDR1，SEQ ID NO:16所示的VH
‑
CDR2，和SEQ ID NO:20所示的VH
‑
CDR3，其中，上述氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、修饰和/或取代至少一个氨基酸的，并能够保留对NKp46的结合亲和力的衍生序列。2.一种抗体的重链，其特征在于，所述的重链具有如权利要求1所述的重链可变区，优选地，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1
‑
4、33
‑
40所示。3.一种抗体的轻链可变区，其特征在于，所述的轻链可变区具有选自下组的互补决定区CDR：SEQ ID NO:21所示的VL
‑
CDR1，SEQ ID NO:25所示的VL
‑
CDR2，和SEQ ID NO:29所示的VL
‑
CDR3；或者，SEQ ID NO:22所示的VL
‑
CDR1，SEQ ID NO:26所示的VL
‑
CDR2，和SEQ ID NO:30所示的VL
‑
CDR3；或者，SEQ ID NO:23所示的VL
‑
CDR1，SEQ ID NO:27所示的VL
‑
CDR2，和SEQ ID NO:31所示的VL
‑
CDR3；或者，SEQ ID NO:24所示的VL
‑
CDR1，SEQ ID NO:28所示的V...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴朝辉，闵晨雨，杨达志，宋宁宁，韩烨，
申请(专利权)人：上海怀越生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：