用于调节δ链介导的免疫的材料和方法技术

本发明专利技术描述了抗TRDV2多特异性抗体或其抗原结合片段。本发明专利技术还描述了编码该抗体的核酸、包含该抗体的组合物、产生该抗体的方法以及使用该抗体治疗或预防疾病的方法。及使用该抗体治疗或预防疾病的方法。及使用该抗体治疗或预防疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于调节
δ
链介导的免疫的材料和方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2020年3月13日提交的美国序列号62/989,111的优先权的权益，其内容全文以引用方式并入本文。


[0003]本专利技术尤其涉及T细胞受体(TCR)重定向技术，诸如靶向T细胞受体δ可变区2(TRDV2)分子的重定向技术。在某些方面，本文提供了结合TRDV2的分子，诸如单克隆TRDV2多特异性抗体或其表位结合片段，包括双特异性抗体、编码所述抗体的核酸和表达载体、含有所述载体的重组细胞和包含所述抗体的组合物。还提供了制备结合TRDV2的分子，诸如抗体的方法，以及使用所述抗体调节对癌细胞的免疫应答的方法。
[0004]以电子方式提交的参考序列表
[0005]本申请包含序列表，该序列表作为ASCII格式的序列表经由EFS
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Web以电子方式提交，文件名为“14620
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109
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228_SL”并且创建日期为2021年3月8日，并且大小为22,942字节。经由EFS
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Web提交的该序列表是本说明书的一部分并且全文以引用方式并入本文。

技术介绍

[0006]T细胞是最丰富的(占血液淋巴细胞的约75％)和有效的免疫杀伤细胞。效应T细胞在抗癌免疫应答中的作用得到了体外研究的有力支持，并且观察到CD8+T细胞在几种类型的癌症中的高浸润与有利的临床预后相关。目前在临床试验中探索了用于将T细胞重定向以裂解癌细胞的几种不同策略，但是全部有重大局限或副作用。本领域仍然需要改进的T细胞重定向分子和方法。

技术实现思路

[0007]在一个方面，本文提供了结合TRDV2的分子，诸如双特异性抗体，该双特异性抗体包含：(a)与TRDV2抗原结合的第一结合结构域，和(b)与癌细胞的表面上的抗原结合的第二结合结构域。
[0008]在一些实施方案中，第一结合结构域包含：(i)VH，该VH包含具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的VH CDR1、具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH CDR3；和(ii)VL，该VL包含具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VL CDR1、具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VL CDR2和具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的VLCDR3。在一些实施方案中，第一结合结构域包含具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的VH。在一些实施方案中，其中第一结合结构域包含具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL。在一些实施方案中，其中第一结合结构域包含具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的VH和具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL。
[0009]在一些实施方案中，TRDV2存在于γδT细胞的表面上。在一些实施方案中，TRDV2存在于γδT细胞的表面上，并且在癌细胞的表面上表达的抗原是癌抗原。在一些实施方案中，
当双特异性抗体与γδT细胞的表面上的TRDV2和癌细胞的表面上的抗原结合时，癌细胞被杀死。
[0010]在一些实施方案中，第一结合结构域是人源化的，第二结合结构域是人源化的，或者第一结合结构域和第二结合结构域两者都是人源化的。
[0011]在一些实施方案中，该双特异性抗体是IgG抗体。在一些实施方案中，IgG抗体是IgG1、IgG2、IgG3、IgG4抗体。
[0012]在一些实施方案中，该双特异性抗体在体外以小于约500pM的EC
50
诱导癌细胞的γδT细胞依赖性细胞毒性。在一些实施方案中，该双特异性抗体在体外以小于约300pM的EC
50
诱导癌细胞的γδT细胞依赖性细胞毒性。在一些实施方案中，该双特异性抗体在体外以小于约160pM的EC
50
诱导癌细胞的γδT细胞依赖性细胞毒性。在一些实施方案中，用γδT效应细胞和表达癌抗原的靶细胞的混合物评估EC
50
。在一些实施方案中，效应细胞与靶细胞的比率为约0.01:1至约5:1。在一些实施方案中，效应细胞与靶细胞的比率为约0.1:1至约2:1。在一些实施方案中，效应细胞与靶细胞的比率为约1:1。
[0013]在一些实施方案中，该双特异性抗体是多价的。在一些实施方案中，该双特异性抗体能够结合至少三个抗原。在一些实施方案中，该双特异性抗体能够结合至少五个抗原。
[0014]在另一方面，提供了一种双特异性抗体，该双特异性抗体包含：能够结合γδT细胞的表面上的TRDV2的第一构件；和能够结合癌抗原的第二构件。在一些实施方案中，癌抗原位于癌细胞的表面上。
[0015]在另一方面，提供了编码本文提供的双特异性抗体的核酸。在一些实施方案中，还提供了包含该核酸的载体。在一些实施方案中，还提供了包含该载体的宿主细胞。在一些实施方案中，还提供了一种包括该载体和该载体的包装的试剂盒。
[0016]在另一方面，提供了一种药物组合物，该药物组合物包含本文提供的双特异性抗体和药学上可接受的载剂。在一些实施方案中，提供了一种产生该药物组合物的方法。在一些实施方案中，该方法包括将双特异性抗体与药学上可接受的载剂组合以获得药物组合物。
[0017]在另一方面，提供了一种用于制备与多于一个靶分子结合的抗体的方法，该分子包括：用于执行获得能够与γδT细胞上的TRDV2抗原结合的结合结构域的功能的步骤；用于执行获得能够与癌细胞的表面上的抗原结合的结合结构域的功能的步骤；以及用于执行提供能够与γδT细胞上的TRDV2抗原和癌细胞的表面上的抗原结合的抗体的功能的步骤。在一些实施方案中，用于执行获得能够与癌细胞的表面上的抗原结合的结合结构域的功能的步骤重复n次，并且该方法还包括用于执行提供能够与γδT细胞上的TRDV2抗原和n个靶分子结合的结合结构域的功能的n个步骤，其中n为至少2。
[0018]在另一方面，提供了将表达TRDV2的γδT细胞引导到癌细胞的方法，该方法包括使γδT细胞与本文提供的双特异性抗体接触，其中该接触将γδT细胞引导到癌细胞。
[0019]在另一方面，本文提供了一种抑制在细胞表面上表达癌抗原的癌细胞的生长或增殖的方法，该方法包括使癌细胞与本文提供的双特异性抗体接触，其中使癌细胞与药物组合物接触抑制癌细胞的生长或增殖。在一些实施方案中，癌细胞在表达TRDV2的γδT细胞的存在下，同时与该双特异性抗体接触。
[0020]在另一方面，提供了用于消除受试者的癌细胞或治疗癌症的方法，该方法包括向
该受试者施用有效量的本文提供的双特异性抗体。在一些实施方案中，受试者是有需要的受试者。在一些实施方案中，受试者是人。
[0021]在另一方面，提供了活化表达TRDV2的γδT细胞的方法，该方法包括使γδT细胞与本文提供的双特异性抗体接触。在一些实施方案中，与表达TRDV2的对照γδT细胞相比，该接触导致CD69、CD25和/或颗粒酶B表达增加。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1. 一种多特异性抗体，所述多特异性抗体包含：(a) 第一结合结构域，所述第一结合结构域与T细胞受体δ可变区2（TRDV2）结合，和(b) 第二结合结构域，所述第二结合结构域与癌细胞的表面上的抗原结合。2. 根据权利要求1所述的多特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含：(i) VH，所述VH包含分别具有VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3的氨基酸序列的VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，所述VH CDR属于具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的VH；和(ii) VL，所述VL包含分别具有VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3的氨基酸序列的VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3，所述VL CDR属于具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL。3.根据权利要求2所述的多特异性抗体，其中(i) 所述第一结合结构域的所述VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3氨基酸序列根据Kabat编号系统；(ii) 所述第一结合结构域的所述VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3氨基酸序列根据Chothia编号系统；(iii) 所述第一结合结构域的所述VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3氨基酸序列根据AbM编号系统；(iv) 所述第一结合结构域的所述VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3氨基酸序列根据Contact编号系统；(v) 所述第一结合结构域的所述VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3氨基酸序列根据IMGT编号系统；或者(vi) 所述第一结合结构域的所述VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3氨基酸序列根据示例性编号系统。4. 根据权利要求1所述的多特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含：(i) VH，所述VH包含具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的VH CDR1、具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VL CDR1、具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VL CDR2和具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的VL CDR3。5.根据权利要求2所述的多特异性抗体，其中(i) 所述第一结合结构域包含具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的VH；(ii) 所述第一结合结构域包含具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL；或者(iii) 所述第一结合结构域包含具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的VH和具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL。6. 根据权利要求1至5中任一项所述的多特异性抗体，其中所述第一结合结构域的所述VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3形成用于所述TRDV2的抗原或所述TRDV2的表位的结合位点。7.根据权利要求1至6中任一项所述的多特异性抗体，其中所述TRDV2存在于T细胞的表面上。8.根据权利要求1至7中任一项所述的多特异性抗体，其中所述癌细胞是肾上腺癌、肛门癌、阑尾癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑癌、乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌、食道癌、胆囊癌、妊娠滋养细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤、肠癌、肾癌、白血病、肝癌、肺癌、黑色素瘤、间皮瘤、多
发性骨髓瘤、神经内分泌肿瘤、非霍奇金淋巴瘤、口腔癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、鼻窦癌、皮肤癌、软组织肉瘤、脊椎癌、胃癌、睾丸癌、喉癌、甲状腺癌、子宫癌、子宫内膜癌、阴道癌或外阴癌的细胞。9. 根据权利要求1至8中任一项所述的多特异性抗体，其中所述癌细胞的所述表面上的所述抗原是血管生成素、BCMA、CD19、CD20、CD22、CD25（IL2
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R）、CD30、CD33、CD37、CD38、CD52、CD56、CD123（IL
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3R）、cMET、DLL/Notch、EGFR、EpCAM、FGF、FGF
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R、GD2、HER2、间皮素、粘连蛋白
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4、PAP、PDGFRα、PSA、PSA3、PSMA、RANKL、SLAMF7、STEAP1、TARP、TROP2、VEGF、VEGF
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R、CEA、不成熟的层粘连蛋白受体、TAG
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72、HPV E6、HPV E7、BING
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4、钙活化的氯化物通道2、细胞周期素
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B1、9D7、EpCAM、EphA3、Her2/neu、端粒酶、间皮素、SAP
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1、存活蛋白、BAGE家族抗原、CAGE家族抗原、GAGE家族抗原、MAGE家族抗原、SAGE家族抗原、XAGE家族抗原、NY
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ESO
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1/LAGE
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1、PRAME、SSX
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2、Melan
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A、MART
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1、Gp100、pmel17、酪氨酸酶、TRP
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1、TRP
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2、P.多肽、MC1R、前列腺特异性抗原、β
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连环蛋白或BRCA1。10.根据权利要求1至9中任一项所述的多特异性抗体，其中所述癌细胞的所述表面上的所述抗原是CD33。11. 根据权利要求10所述的多特异性抗体，其中所述第二结合结构域包含：(i) VH，所述VH包含分别具有VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3的氨基酸序列的VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，所述VH CDR属于具有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的VH；和(i...

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：詹森生物科技公司，
类型：发明
国别省市：