用非岩藻糖基化抗CD70抗体治疗癌症的方法技术

本公开文本提供了使用非岩藻糖基化抗CD70抗体治疗诸如包括骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓系白血病(AML)在内的髓系恶性肿瘤等癌症的方法。肿瘤等癌症的方法。肿瘤等癌症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用非岩藻糖基化抗CD70抗体治疗癌症的方法
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求2019年12月30日提交的美国临时申请号62/954,904和2020年4月17日提交的美国临时申请号63/011,906的优先权，将所述申请的每一个的内容通过引用以其整体并入本文。ASCII文本文件序列表的提交
[0002]以下以ASCII文本文件提交的内容通过引用以其整体并入本文：计算机可读形式(CRF)的序列表(文件名：761682003140SEQLIST.TXT，记录日期：2020年12月9日，大小：13KB)。


[0003]本专利技术涉及使用非岩藻糖基化抗CD70抗体治疗诸如包括骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓系白血病(AML)在内的髓系恶性肿瘤等癌症的方法。

技术介绍

[0004]CD70是由多种正常和恶性细胞类型表达的细胞膜结合且分泌的分子的肿瘤坏死因子(TNF)家族的成员。CD70的一级氨基酸(AA)序列预测跨膜II型蛋白其羧基末端暴露于细胞外部且其氨基末端位于质膜的胞质侧内(Bowman等人,1994,J.Immunol.152:1756
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61；Goodwin等人,1993,Cell 73:447
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56)。人CD70由20个AA的细胞质结构域、18个AA的跨膜结构域和155个AA的细胞质外结构域构成，具有两个潜在的N连接糖基化位点(Bowman等人,同上；Goodwin等人,同上)。放射性同位素标记的表达CD70的细胞用抗CD70抗体特异性免疫沉淀产生29和50kDa的多肽(Goodwin等人,同上；Hintzen等人,1994,J.Immunol.152:1762
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73)。基于其与TNF
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α和TNF
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β尤其是在结构链C、D、H和1中的同源性，预测CD70的三聚体结构(Petsch等人,1995,Mol.Immunol.32:761
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72)。
[0005]最初的免疫组织学研究揭示CD70在扁桃体、皮肤和肠道中的生发中心B细胞和罕见T细胞上表达(Hintzen等人,1994,Int.Immunol.6:477
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80)。随后，据报道CD70在最近被抗原激活的T和B淋巴细胞的细胞表面上表达，并且其表达在去除抗原刺激后减弱(Lens等人,1996,Eur.J.Immunol.26:2964
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71；Lens等人,1997,Immunology 90:38
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45)。在淋巴系统中，激活的自然杀伤细胞(Orengo等人,1997,Clin.Exp.Immunol.107:608
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13)和小鼠成熟外周树突细胞(Akiba等人,2000,J.Exp.Med.191:375
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80)也表达CD70。在非淋巴谱系中，已经在胸腺髓质上皮细胞上检测到CD70(Hintzen等人,1994,同上；Hishima等人,2000,Am.J.Surg Pathol.24:742
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46)。
[0006]CD70在正常的非造血细胞上不表达。CD70表达主要限于生理条件下新近被抗原激活的T和B细胞，并且当抗原刺激停止时其表达下调。来自动物模型的证据表明，CD70可促成免疫障碍，如类风湿性关节炎(Brugnoni等人,1997,Immunol.Lett.55:99
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104)、银屑病关节炎(Brugnoni等人,1997,Immunol.Lett.55:99
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104)、和狼疮(Oelke等人,2004,Arthritis Rheum.50:1850
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60)。除了其在炎症反应中的潜在作用外，CD70还在多种转化细
胞上表达，包括淋巴瘤B细胞、霍奇金细胞和里
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施细胞(Reed
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Sternberg cell)、神经起源的恶性细胞和多种癌。研究表明，来自急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常疾病(MDS)患者的干细胞表达CD70及其受体CD27二者。这种配体
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受体对之间的相互作用可以促进白血病原始细胞存活和增殖。
[0007]在哺乳动物宿主细胞中产生的单克隆抗体可以具有多种翻译后修饰，包括糖基化。单克隆抗体(如IgG1)在每条重链(每个完整抗体有两条)的天冬酰胺297(Asn297)处具有N连接的糖基化位点。与抗体上的Asn297附接的聚糖典型地是复合双触角结构，其具有非常低或没有二分型N
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乙酰葡糖胺(二分型GlcNAc)，具有少量的末端唾液酸和不同量的半乳糖。所述聚糖通常也具有高水平的核心岩藻糖基化。已显示抗体中核心岩藻糖基化的减少会改变Fc效应子功能，特别是Fcγ受体结合和ADCC活性。这一观察结果引起了工程化细胞系的兴趣，因此它们产生了核心岩藻糖基化减少的抗体。
[0008]用于工程化细胞系以减少核心岩藻糖基化的方法包括基因敲除、基因敲入和RNA干扰(RNAi)。在基因敲除中，使编码FUT8(α1,6
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岩藻糖基转移酶)的基因失活。FUT8催化岩藻糖残基从GDP
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岩藻糖转移到N
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聚糖的Asn
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连接的(N
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连接的)GlcNac的6位。据报道，FUT8是唯一负责在Asn297处将岩藻糖添加到N
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连接的双触角碳水化合物的酶。基因敲入添加编码酶(如GNTIII或高尔基体α甘露糖苷酶II)的基因。细胞中此类酶水平的增加使单克隆抗体从岩藻糖基化途径转移(导致核心岩藻糖基化减少)，并且二分型N
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乙酰葡糖胺的量增加。RNAi典型地还靶向FUT8基因表达，导致降低mRNA转录物水平或完全敲除基因表达。
[0009]工程化细胞系的替代方案包括使用作用于糖基化途径中的酶的小分子抑制剂。抑制剂如栗精胺(catanospermine)在糖基化途径早期起作用，产生具有未成熟聚糖(例如，高水平的甘露糖)和低岩藻糖基化水平的抗体。通过此类方法产生的抗体通常缺乏与成熟抗体相关的复杂N连接聚糖结构。小分子岩藻糖类似物也可用于产生具有复杂N连接聚糖但具有降低的核心岩藻糖基化的重组抗体。
[0010]需要抗CD70抗体，如具有降低的核心岩藻糖基化的抗CD70抗体，其可以对CD70表达细胞发挥临床上有用的细胞毒性、细胞抑制或免疫调节作用，特别是对非CD70表达细胞不发挥不期望的作用。此类化合物将是针对表达CD70的癌症的有用治疗剂。
[0011]髓系恶性肿瘤包括急性髓系白血病(AML)、骨髓增殖性障碍(MPDS)、骨髓增生异常综合征(MDS)和骨髓增生异常/骨髓增殖性综合征，它们都是克隆性干细胞(HSC)或祖细胞恶性障碍(TIU等人,Leukemia,第21(8)卷,第1648
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57页,2007)。
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种治疗受试者的表达CD70的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的非岩藻糖基化抗CD70抗体，其中所述方法导致所述受试者中癌细胞的耗竭，其中所述方法不导致所述受试者中CD70+T调节性细胞(CD70+Treg)的耗竭，其中所述抗CD70抗体包含含有SEQ ID NO:1的三个CDR的重链可变区、含有SEQ ID NO:2的三个CDR的轻链可变区和Fc结构域，其中所述抗CD70抗体的CDR由Kabat编号方案定义，并且其中所述癌症选自骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓系白血病(AML)。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗CD70抗体包含含有与SEQ ID NO:1的氨基酸序列至少85％相同的氨基酸序列的重链可变区和含有与SEQ ID NO:2的氨基酸序列至少85％相同的氨基酸序列的轻链可变区。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗CD70抗体包含含有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的轻链可变区。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述Fc结构域是介导抗体依赖性细胞毒性(ADCC)、抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)和补体依赖性细胞毒性(CDC)中的一种或多种的抗体效应子结构域。5.根据权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述Fc结构域是介导ADCC的抗体效应子结构域。6.根据权利要求1
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5中任一项所述的方法，其中所述Fc结构域是人Fc结构域。7.根据权利要求1
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6中任一项所述的方法，其中所述抗CD70抗体是沃瑟妥珠单抗。8.根据权利要求1
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7中任一项所述的方法，其中所述抗体与治疗剂缀合。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述治疗剂是化疗剂或免疫调节剂。10.根据权利要求8所述的方法，其中所述治疗剂是化疗剂。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述化疗剂是一甲基澳瑞他汀E(MMAE)或一甲基澳瑞他汀F(MMAF)。12.根据权利要求8所述的方法，其中所述治疗剂是免疫调节剂。13.根据权利要求1
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12中任一项所述的方法，其中所述方法包括施用抗CD70抗体群体，其中所述抗CD70抗体群体中的每种抗体包含含有SEQ ID NO:1的三个CDR的重链可变区、含有SEQ ID NO:2的三个CDR的轻链可变区和Fc结构域，其中所述抗CD70抗体的CDR由Kabat编号方案定义，其中所述抗CD70抗体群体中至少50％的抗CD70抗体缺乏核心岩藻糖基化。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述抗CD70抗体群体中至少70％的抗CD70抗体缺乏核心岩藻糖基化。15.根据权利要求13所述的方法，其中所述抗CD70抗体群体中至少90％的抗CD70抗体缺乏核心岩藻糖基化。16.根据权利要求1
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15中任一项所述的方法，其中所述癌症是MDS。17.根据权利要求16所述的方法，其中所述MDS是复发性或难治性MDS。18.根据权利要求17所述的方法，其中所述受试者在先前的针对所述MDS的低甲基化剂(HMA)疗法后经历了治疗失败。19.根据权利要求1
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15中任一项所述的方法，其中所述癌症是AML。20.根据权利要求19所述的方法，其中所述AML是复发性或难治性AML。21.根据权利要求20所述的方法，其中所述受试者接受了2种先前治疗方案以治疗所述
AML。22.根据权利要求20所述的方法，其中所述受试者接受了3种先前治疗方案以治疗所述AML。23.根据权利要求1
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22中任一项所述的方法，其中至少约0.1％、至少约1％、至少约2％、至少约3％、至少约4％、至少约5％、至少约6％、至少约7％、至少约8％、至少约9％、至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约60％、至少约70％或至少约80％的所述癌细胞表达CD70。24.根据权利要求1
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23中任一项所述的方法，其中与向所述受试者施用所述非岩藻糖基化抗CD70抗体之前癌细胞的量相比，向所述受试者施用所述非岩藻糖基化抗CD70抗体导致癌细胞耗竭至少约5％、至少约6％、至少约7％、至少约8％、至...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：思进股份有限公司，
类型：发明
国别省市：