一种多西他赛原料药中DCC和DCU残留的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种多西他赛原料药中DCC和DCU残留的检测方法，其是利用高效液相色谱法对多西他赛原料药中DCC和DCU进行检测，包括以下步骤：1，配制多西他赛原料药的供试品溶液；2，配制DCC对照品溶液、DCU对照品溶液；3，进样，按照以下条件对步骤1中供试品溶液和步骤2中对照品溶液分别进行检测：色谱条件：流动相：乙腈

【技术实现步骤摘要】
一种多西他赛原料药中DCC和DCU残留的检测方法


[0001]本专利技术涉及药物分析
，尤其涉及一种多西他赛原料药中DCC和DCU残留的检测方法。

技术介绍

[0002]多西他赛也叫多西紫杉醇，属于紫杉烷类化合物抗肿瘤药，作用机制是加强微观蛋白聚合作用和抑制微管解聚作用，导致形成稳定的非功能性微管束，因而破坏肿瘤细胞的有丝分裂。
[0003]目前多西他赛都是由天然提取产物10
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去乙酰基巴卡亭Ⅲ通过半合成得到，在此合成过程中会用到DCC(二环己基碳二亚胺)，因DCC不稳定，其会降解生成DCU(二环己基脲)，处于安全性考虑，在多西他赛原料药中对DCC和DCU残留的控制非常重要。
[0004]目前有公开号为CN110749677A名称为一种N,N
’‑
二环己基脲和N,N
’‑
二环己基碳二亚胺的检测方法的中国专利，准确称取约1g样品于容量瓶中，甲醇提取并定容至刻度，混匀；分取部分上清液，经丙酮稀释，有机滤膜过滤，按设定的气相色谱条件和质谱条件分析，保留时间和定性离子定性，外标法和定量离子定量，同时定性定量检测N，N
′‑
二环己基脲和N，N
′‑
二环己基碳二亚胺。
[0005]但是多西他赛只能轻微地溶解在甲醇中，在进行质谱分析的过程中，不可多西他赛会一定量地析出，导致检测液中多西他赛减少，进而导致多西他赛原料中残留DCC和DCU的检测误差增大。

技术实现思路

[0006]针对上述现有技术的缺点，本专利技术的目的是提供一种多西他赛原料药中DCC和DCU残留的检测方法，其优点在，DCC和DCU与杂质的分离度好，专属性强、检测灵敏度高，也避免过多的多西他赛前提前析出，减少检测误差。
[0007]本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：
[0008]一种多西他赛原料药中DCC和DCU残留的检测方法，包括以下步骤：
[0009]步骤S1，配制多西他赛原料药供试品溶液；
[0010]步骤S2，分别配制DCU和DCC对照品溶液；
[0011]步骤S3，对多西他赛原料药供试品溶液进行色谱检测，使用流动相为：乙腈和水；梯度洗脱：在0～5min以乙腈以15％的比例进行等度洗脱，5～30min乙腈的比例从15％逐渐升至55％进行等度洗脱，30～65min乙腈的比例从55％逐渐升至85％进行等度洗脱；柱温范围为40～45℃；流速范围为1.0～1.4ml/min；检测波长范围为200～210nm。
[0012]进一步的，在步骤S3中，色谱柱为五氟苯基柱。
[0013]进一步的，在步骤S3中，色谱柱规格为250*4.6mm，3μm。
[0014]进一步的，在步骤S3中，进样量为20μl。
[0015]进一步的，在步骤S3中，检测波长为205nm。
[0016]进一步的，在步骤S1中，进样的供试品溶液的浓度为10mg/ml。
[0017]进一步的，在步骤S2中，DCC对照品溶液的浓度为3μg/ml。
[0018]进一步的，在步骤S2中，DCU对照品溶液的浓度为3μg/ml。
[0019]进一步的，在步骤S1中,多西他赛原料药供试品溶液使用的稀释剂为乙腈、四氢呋喃和水，乙腈：四氢呋喃：水的比例为1：0.1：1(V/V/V)。
[0020]进一步的，在步骤S2中，DCC对照品溶液和DCU对照品溶液使用的稀释剂为乙腈、四氢呋喃和水，乙腈：四氢呋喃：水的比例为1：0.1：1(V/V/V)。
[0021]综上所述，本专利技术具有以下有益效果：
[0022]1.采用色谱柱为五氟苯基柱，流动相为乙腈和水，色谱固定相为为极性，流动相为非极性，并且由于多西他赛原料药供试品溶液中除DCC和DCU之外，还存在其他物质，所以采用梯度洗脱的方式，在这个过程中，DCC出峰后完成记录分析，之后改变流动相的组成比例，使DCU更快的流出，不仅改善了各物质的峰形和柱效，提高了DCC和DCU与杂质的分离度，使检测结果误差更小，大大提高了检测灵敏度。
[0023]2.严格控制色谱柱规格和进样量，并且严格控制检测波长范围，在该波长范围中DCU和DCC。
[0024]3.多西他赛原料药供试品溶液、DCU和DCC对照品溶液，都使用。
[0025]4.并且使用的试剂都是低毒性的，乙腈蒸气具轻度刺激性，在高浓度的浓度较高情况下能够引起呼吸道刺激症状，所以控制柱温范围为40～45℃，在保证流动相和待测溶液顺利流出的情况下，减少乙腈蒸气的产生，降低对于工作人员的影响。
[0026]5.供试品溶液和对照品溶液采用乙腈、四氢呋喃和水的组合作为稀释剂，使供试品溶液和对照品溶液和流动相液相相近，使溶液和流动相更好地互溶，有利于杂质的分离。
附图说明
[0027]图1是实施例1中的空白溶液的色谱图。
[0028]图2是实施例1中的对照品溶液的色谱图。
[0029]图3是实施例1中的供试品溶液的色谱图。
[0030]图4是实施例2中的空白溶液的色谱图。
[0031]图5是实施例2中的对照品溶液的色谱图。
[0032]图6是实施例2中的供试品溶液的色谱图。
具体实施方式
[0033]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图和具体实施方式对本专利技术提出的方案作进一步详细说明。根据下面说明，本专利技术的优点和特征将更清楚。
[0034]实施例1：
[0035]色谱条件与仪器条件：
[0036]安捷伦1260，DAD检测器，安捷伦Openlab CDS2.3软件系统，色谱柱：五氟苯基柱，250mm
×
4.6mm，3um，检测波长205nm，进样量20ul，流速1.2ml/min,柱温45℃，
[0037]流动相A为水，B为乙腈，0
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5min乙腈比例按照15％等度洗0min
‑
30min乙腈比例由
15％逐渐升至55％，在30min
‑
65min乙腈比例由55％升至85％。
[0038]实验步骤：
[0039]空白溶液/稀释剂：乙腈:四氢呋喃：水＝1：0.1：1(V/V/V)
[0040]对照溶液：精密称取DCC对照品适量，用稀释剂溶剂并稀释成每ml含有约3μg DCC的溶液，作为对照溶液。
[0041]混合对照溶液：分别精密称取中间体杂质ⅢA、ⅢB、ⅢC、ⅢD、多西他赛中间体Ⅱ、DCU适量，加入稀释剂溶解并稀释制成每ml含各杂质约10μg的溶液，作为混合对照溶液。
[0042]加标供试品溶液：称取多西他赛样品(多西他赛粗品)适量，加入对照品溶液溶解并稀释成每1ml含有约10mg的溶液，作为加标供试品溶液。
[0043]供试品溶液：称取多西他赛样品适量，加入空白溶液溶解并稀释成每1ml含有约10mg的溶液，作为供试品溶液。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多西他赛原料药中DCC和DCU残留的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1，配制多西他赛原料药供试品溶液；步骤S2，分别配制DCU和DCC对照品溶液；步骤S3，对多西他赛原料药供试品溶液进行色谱检测，使用流动相为：乙腈和水；梯度洗脱：在0～5min以乙腈以15％的比例进行等度洗脱，5～30min乙腈的比例从15％逐渐升至55％进行等度洗脱，30～65min乙腈的比例从55％逐渐升至85％进行等度洗脱；柱温范围为40～45℃；流速范围为1.0～1.4ml/min；检测波长范围为200～210nm。2.根据权利要求1所述的一种多西他赛原料药中DCC和DCU残留的检测方法，其特征在于：在步骤S3中，色谱柱为五氟苯基柱。3.根据权利要求2所述的一种多西他赛原料药中DCC和DCU残留的检测方法，其特征在于：在步骤S3中，色谱柱规格为250*4.6mm，3μm。4.根据权利要求1所述的一种多西他赛原料药中DCC和DCU残留的检测方法，其特征在于：在步骤S3中，进样量为20μl。5.根据权利要求1所述的一种多西他赛原料药中DCC...

【专利技术属性】
技术研发人员：王旭阳，于庆洋，王莉佳，
申请(专利权)人：无锡紫杉药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：