一种PEG中溴乙酸的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种PEG中溴乙酸的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：溶解PEG得到供试品溶液，采用液相色谱法

【技术实现步骤摘要】
一种PEG中溴乙酸的检测方法


[0001]本专利技术属于药物分析领域，具体涉及一种PEG中溴乙酸的检测方法。

技术介绍

[0002]药品中的杂质包括有机杂质、无机杂质和残留溶剂，而遗传毒性杂质不同于药品中的一般杂质，有着重大的安全风险，极微量水平即能诱发DNA突变。因此控制药品中遗传毒性杂质是保障药品质量和安全的重点。
[0003]溴乙酸(C2H3O2Br，CAS：79
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08
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3)是合成某些PEG类聚合物的原料。溴乙酸属于2类基因毒杂质，具有明确的致DNA突变性，但其致癌性尚未可知。根据毒理学关注阈值(TTC)原则，以1.5μg/d作为溴乙酸的可接受摄入量，1g/d作为最大日剂量，由此得出溴乙酸的杂质限度很低，低至1ppm。
[0004]现有技术中，检测溴乙酸的主要方法为液相色谱法串联质谱法，其中多采用分辨率较低的质谱仪。专利文献CN112083084A公开了一种头孢硫脒中杂质溴乙酸的检测方法，所述方法采用高效液相色谱
‑
质谱法进行检测，但是由于HILIC色谱柱为一种正向色谱分离柱，样品需要溶于90％的乙腈中，这导致方法的检测限会因为稀释倍数的原因而大大提高，限制了该方法的应用范围。专利文献CN108828081A公开了一种可同时检测水中九种卤乙酸和三种卤氧化物的分析方法，所述方法采用液相色谱
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三重四极杆质谱法进行检测，但是三重四极杆质谱仪分辨率有限，不能进行高分辨定性。专利文献CN102520083A公开了一种饮用水中消毒副产物卤乙酸的快速检测方法，所述方法采用超高效液相色谱
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电喷雾
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串连四极杆质谱联用仪，但是四极杆质谱定性能力不足，分辨力较低。
[0005]溴乙酸分子量小，子离子分子量更小，检测容易受到其他化合物及其碎片的干扰。因此，需要建立一种检测灵敏度高、专属性强，能够对PEG类原料中溴乙酸杂质进行定性和定量的检测方法。
[0006]本专利方法采用高灵敏度、高分辨率的q
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TOF质谱仪来检测溴乙酸的定量离子136.9238
±
0.005Da，质量精度可精确到小数点后第四位，专属性更强、有效排除其他小分子化合物的干扰；灵敏度可低至0.1ppm，满足PEG类原料中基因毒化合物的检测需要。

技术实现思路

[0007]本专利技术要解决的技术问题是提供一种专属性强、灵敏度高，能够对PEG类原料中溴乙酸杂质进行定性和定量的检测方法，包括如下技术方案：
[0008]本专利技术溶解PEG得到供试品溶液，采用液相色谱法
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四极杆/飞行时间质谱法对供试品中溴乙酸进行检测，得到供试品溶液中溴乙酸的浓度，计算溴乙酸的含量；
[0009]所述PEG为四臂聚乙二醇溴乙酰胺；
[0010]所述PEG的分子量为10KDa；
[0011]所述液相色谱法采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱；所述液相色谱法中以加入碱性试剂后pH为7.5～8.5的乙酸铵水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B；所述液
相色谱法采用梯度洗脱，所述梯度洗脱程序为：
[0012]0min，流动相A与流动相B体积之比为60：40；
[0013]0～2.0min，流动相A与流动相B体积之比为60：40，进行等度洗脱；
[0014]2.0～2.1min，流动相A与流动相B体积之比匀速变化至20：80；
[0015]2.1～7.0min，流动相A与流动相B体积之比为20：80，进行等度洗脱；
[0016]7.0～7.1min，流动相A与流动相B体积之比为匀速变化至60：40；
[0017]7.1～15.0min，流动相A与流动相B体积之比为60：40，进行等度洗脱。
[0018]进一步的，所述流动相A中乙酸铵水溶液的浓度为4～6mM；比如，所述乙酸铵水溶液的浓度为4mM、5mM、6mM，优选的，所述浓度为5mM。
[0019]进一步的，所述pH值包括不限于7.5、8.0、8.5，优选的，所述pH值为8.0。
[0020]所述碱性试剂选自氢氧化钠、碳酸氢钠、氨水的任一种，优选为氨水；
[0021]进一步的，所述色谱柱的参数为：2.1
×
100mm，1.7μm。
[0022]所述液相色谱法的流速为0.1～0.5mL/min；比如，所述流速为0.1mL/min、0.2mL/min、0.3mL/min、0.4mL/min、0.5mL/min；优选的，所述流速为0.2mL/min。
[0023]进一步的，所述液相色谱法的柱温为30～50℃；比如，所述柱温为30℃、35℃、40℃、45℃、50℃，优选的，所述柱温为35℃。
[0024]进一步的，所述进样量为0.1～10μL；比如，所述进样量为0.1μL、1.0μL、2.0μL、3.0μL、4.0μL、5.0μL、6.0μL、7.0μL、8.0μL、9.0μL、10.0μL，优选的，进样量为2μL。
[0025]进一步的，所述质谱法采用电喷雾离子源，所述离子源采用负离子化模式。
[0026]进一步的，所述质谱法中去簇电压为
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10～
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70v；比如，所述簇电压为
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10v、
‑
20v、
‑
30v、
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50v、
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70v，优选的，所述去簇电压为
‑
20v。
[0027]进一步的，所述质谱法中碎裂电压为
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10～
‑
5v；比如，所述碎裂电压为
‑
10v、
‑
5v，优选的，所述碎裂电压为
‑
5v。
[0028]进一步的，所述质谱法中离子源气体1为40～60psi；比如，所述离子源气体1为40psi、50psi、60psi，优选的，所述离子源气体1为50psi。
[0029]进一步的，所述质谱法中离子源气体2为40～60psi；比如，所述离子源气体2为40psi、50psi、60psi，优选的，所述离子源气体2为50psi。
[0030]进一步的，所述质谱法中气帘气为10～50psi；比如，所述气帘气为10psi、20psi、30psi、40psi、50psi，优选的，所述气帘气电压为30psi。
[0031]进一步的，所述质谱法中离子源温度为400～500℃；比如，所述离子源温度为400℃、450℃、500℃，优选的，所述离子源温度为450℃。
[0032]进一步的，所述质谱法中扫描范围为136.5
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137.5m/z。
[0033]进一步的，所述质谱法中离子喷雾电压为
‑
4500v。
[0034]进一步的，所述质谱法中累积时间为0.5s。
[0035]进一步的，所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种PEG中溴乙酸的检测方法，其特征在于，溶解PEG得到供试品溶液，采用液相色谱法
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四极杆/飞行时间质谱法对供试品溶液中溴乙酸进行检测，得到供试品溶液中溴乙酸的浓度，计算溴乙酸的含量；所述PEG为四臂聚乙二醇酰胺溴，分子量为10KDa；所述液相色谱法采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱；所述液相色谱法中以加入碱性试剂后pH为7.5～8.5的乙酸铵水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B；所述液相色谱法采用梯度洗脱，所述梯度洗脱程序为：0min，流动相A与流动相B体积之比为60：40；0～2.0min，流动相A与流动相B体积之比为60：40，进行等度洗脱；2.0～2.1min，流动相A与流动相B体积之比匀速变化至20：80；2.1～7.0min，流动相A与流动相B体积之比为20：80，进行等度洗脱；7.0～7.1min，流动相A与流动相B体积之比为匀速变化至60：40；7.1～15.0min，流动相A与流动相B体积之比为60：40，进行等度洗脱。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相A中乙酸铵水溶液的浓度为4～6mM；优选的，所述浓度为5mM。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相A中加入碱性试剂使乙酸铵水溶液的pH为8.0。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述碱性试剂选自：氢氧化钠、碳酸氢钠、氨水中的任一种，优选为氨水；和/或，所述色谱柱的参数为：2.1
×
100mm，1.7μm。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述液相色谱法的流速为0.1～0.5mL/min，柱温为30～50℃，进样量为0.1～10μL；优选的，所述流速为...

【专利技术属性】
技术研发人员：张雅慧，李洋，何平，赵宣，
申请(专利权)人：天津键凯科技有限公司，
类型：发明
国别省市：