一种白肉灵芝液体菌种的生产方法技术

本发明专利技术属于食用菌栽培技术领域，公开了一种白肉灵芝液体菌种的生产方法。所述方法包括如下步骤：挑取白肉灵芝幼嫩子实体组织块接种于加富PDA培养基上，黑暗条件下培养，然后挑选距离接种块2cm以外的菌种块接入综合PDA培养基上，黑暗条件下培养，挑取距离接种点2cm外的纯化母种菌块备用；将所得纯化母种菌块接种至以蔗糖、玉米浆浸膏、酵母粉、玉米淀粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素为原料配制的液体培养基中培养，得到白肉灵芝液体菌种。本发明专利技术采用的液体菌种菌龄较一致、生长速度快、菌丝渗透性强，污染率低，大大缩短了白肉灵芝生产用种及生产菇包的培养时间，大幅度降低了生产成本，可更好的推进白肉灵芝的大规模种植推广。可更好的推进白肉灵芝的大规模种植推广。可更好的推进白肉灵芝的大规模种植推广。

【技术实现步骤摘要】
一种白肉灵芝液体菌种的生产方法


[0001]本专利技术属于食用菌栽培
，具体涉及一种白肉灵芝液体菌种的生产方法。

技术介绍

[0002]灵芝(Ganoderma lucidum)来源于多孔菌科(Polyporaceae)灵芝属(Ganoderma)，具有养心安神、止咳平喘的功效。白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum T.H.Li et al.)发现于中国西藏，分布于西藏、四川、云南等高海拔地区，2015年由广东省科学院微生物研究所科研人员鉴定、命名并发表为灵芝新品种。与其他灵芝需在中高温度下生长不同，白肉灵芝出芝温度低，最适温度为20
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22℃。白肉灵芝与国内广泛栽培的灵芝品种外形较相似，但菌肉较白，在四川和西藏等地被视为高品质的种类，售价比一般的灵芝高出数倍。研究表明，白肉灵芝的多糖含量明显高于普通灵芝，同时功效研究表明其提取物具有多种生物活性，在抗肿瘤、调节免疫、降血糖降血脂、代谢调节等方面效果显著。
[0003]相较于传统固体菌种，液体菌种因其具有生产成本低、生长周期短、菌种活力强、纯度高、可实现自动化生产的显著优势，被越来越多的食用菌工厂化种植企业所选择。
[0004]目前关于白肉灵芝液体菌种的生产方式相关报道较少，专利CN 114766285 A公开了一种白肉灵芝属菌株L4495的栽培方法，采用由可溶性淀粉，黄豆粉，磷酸二氢钾，MgSO4·
7H2O，VB2，水；pH＝6.9
‑
7.1的液体培养基培养菌种。该专利技术主要针对液体培养基的碳源、氮源、发酵温度、发酵pH值及无机盐配比进行调整，以缩短培养时间。但该专利并未对菌种进行纯化处理，且并未对影响菌丝生长活力的因素进行研究。

技术实现思路

[0005]针对以上现有技术存在的缺点和不足之处，本专利技术的目的在于提供一种白肉灵芝液体菌种的生产方法。本专利技术方法可更好的推进白肉灵芝的大规模种植推广。
[0006]本专利技术目的通过以下技术方案实现：
[0007]一种白肉灵芝液体菌种的生产方法，包括如下步骤：
[0008](1)母种培养基的配置：配置综合PDA培养基、加富PDA培养基，其中综合PDA培养基原料由土豆、葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁组成；加富PDA培养基的原料在综合PDA培养基的基础上添加蛋白胨；
[0009](2)液体菌种的制作及纯化：挑取白肉灵芝幼嫩子实体组织块接种于加富PDA培养基上，黑暗条件下培养，然后挑选距离接种块2cm以外的菌种块接入综合PDA培养基上，黑暗条件下培养，挑取距离接种点2cm外的纯化母种菌块备用；
[0010](3)液体培养基配制：以蔗糖、玉米浆浸膏、酵母粉、玉米淀粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素为原料配制液体培养基，调节PH值为5.0，分装后密封，高压蒸汽灭菌，冷却备用；
[0011](4)接种及培养：将步骤(2)所得纯化母种菌块接种至步骤(3)的液体培养基中培养，得到白肉灵芝液体菌种。
[0012]进一步地，步骤(1)中所述综合PDA培养基中各原料浓度为土豆20g/L、葡萄糖20g/
L、琼脂20g/L、磷酸二氢钾3g/L、硫酸镁1.5g/L。
[0013]进一步地，步骤(1)中所述加富PDA培养基中蛋白胨的用量为8g/L。
[0014]进一步地，步骤(2)中所述接种于加富PDA培养基的白肉灵芝幼嫩子实体组织块的大小为0.5cm2。
[0015]进一步地，步骤(2)中所述接种于加富PDA培养基后黑暗条件下培养的条件为24℃恒温培养7～9d；所述接种于综合PDA培养基后黑暗条件下培养的条件为24℃恒温培养10～12d。
[0016]进一步地，步骤(3)中所述液体培养基中各原料浓度为：蔗糖8～12g/L，玉米浆浸膏5～10g/L，酵母粉3～7g/L，玉米淀粉3～5g/L，磷酸二氢钾1～2g/L，硫酸镁1～2g/L，维生素5～10mg/L。
[0017]进一步地，步骤(3)中所述高压蒸汽灭菌是指在高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌30min。
[0018]进一步地，步骤(4)中所述纯化母种菌块大小为0.5cm2。
[0019]进一步地，步骤(4)中所述接种至液体培养基中培养的条件为：24℃恒温培养箱中静置24h，然后转入恒温振荡器中培养，调节转速为140～150r/min，温度为23～25℃，培养12～16d。
[0020]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0021](1)本专利技术采用的液体菌种菌龄较一致、生长速度快、菌丝渗透性强，污染率低，大大缩短了白肉灵芝生产用种及生产菇包的培养时间，其中液体菌种较固体菌种培养时间缩短13～18天，接种的菌包培养时间缩短了5～10天，杂菌感染率降低了3％～9％，生产成本也大幅度降低。
[0022](2)本专利技术采用的白肉灵芝母种制作方式明显提升了白肉灵芝母种的菌种活力及纯度，为后续的液体菌种生产提供了优良菌种。
[0023](3)本专利技术获得的特定比例的培养基原料，为白肉灵芝液体菌种的生长提供最佳的营养条件，其中氮源玉米浆选择浸膏剂更利于菌种的吸收利用，其效果较粉剂更佳，菌球数量及干重均有所提升，培养时间缩短3～4天左右，有效提高了生产效率。
[0024](4)白肉灵芝是近年来的灵芝新品种，在多糖、三萜等活性物质的种类及含量上均较赤芝具有显著优势，为目前市售灵芝中价格最高的品种，具有巨大的开发潜力，目前白肉灵芝的规模化栽培中采用的菌种制作方式仍以固体菌种为多，本专利技术提供的白肉灵芝液体菌种制作方式可以有效提高菌种质量，提升生产效率，降低生产成本，操作简单可控且易推向规模化生产。
附图说明
[0025]图1为实施例1～5的液体菌种培养情况图；
[0026]图2为实施例6中接种不同类型菌种的生长情况图；
[0027]图3为实施例7中在不同蛋白胨添加量的加富PDA培养基上白肉灵芝的菌丝生长情况图；
[0028]图4为实施例8中制种过程不改变培养基情况下白肉灵芝菌丝的生长情况及与实施例3在纯化过程中变更培养基(采用综合PDA培养基)情况下白肉灵芝菌丝的生长情况对
比图；
[0029]图5为实施例9在不同取种位置的白肉灵芝菌丝生长情况对比图。
具体实施方式
[0030]下面结合实施例对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。
[0031]实施例1
[0032](1)菌种制备及纯化：配置综合PDA培养基(原料由20g/L土豆(煮汁过滤)、20g/L葡萄糖、20g/L琼脂、3g/L磷酸二氢钾、1.5g/L硫酸镁组成)、加富PDA培养基(原料由20g/L土豆(煮汁过滤)、20g/L葡萄糖、20g/L琼脂、3g/L磷酸二氢钾、1.5g/L硫酸镁、8g/L蛋白胨组成)，制作斜面培养基(试管20mm
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200mm)，挑取0.5cm2白肉灵芝幼嫩子实体组织块于加富PDA斜面培养基上，黑暗条本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种白肉灵芝液体菌种的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)母种培养基的配置：配置综合PDA培养基、加富PDA培养基，其中综合PDA培养基原料由土豆、葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁组成；加富PDA培养基的原料在综合PDA培养基的基础上添加蛋白胨；(2)液体菌种的制作及纯化：挑取白肉灵芝幼嫩子实体组织块接种于加富PDA培养基上，黑暗条件下培养，然后挑选距离接种块2cm以外的菌种块接入综合PDA培养基上，黑暗条件下培养，挑取距离接种点2cm外的纯化母种菌块备用；(3)液体培养基配制：以蔗糖、玉米浆浸膏、酵母粉、玉米淀粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素为原料配制液体培养基，调节PH值为5.0，分装后密封，高压蒸汽灭菌，冷却备用；(4)接种及培养：将步骤(2)所得纯化母种菌块接种至步骤(3)的液体培养基中培养，得到白肉灵芝液体菌种。2.根据权利要求1所述的一种白肉灵芝液体菌种的生产方法，其特征在于，步骤(1)中所述综合PDA培养基中各原料浓度为土豆20g/L、葡萄糖20g/L、琼脂20g/L、磷酸二氢钾3g/L、硫酸镁1.5g/L。3.根据权利要求2所述的一种白肉灵芝液体菌种的生产方法，其特征在于，步骤(1)中所述加富PDA培养基中蛋白胨的用量为8g/L。4.根据权利要求1所述的一种白肉灵芝液体菌种的生产...

【专利技术属性】
技术研发人员：李一凡，陈东梅，张智，胡惠萍，
申请(专利权)人：广东粤微生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：