V8蔬菜汁在培养白块菌菌丝体中的应用、培养白块菌菌丝体及合成白块菌菌根的方法技术

本发明专利技术属于植物与微生物技术交叉领域，具体涉及V8蔬菜汁在培养白块菌菌丝体中的应用、培养白块菌菌丝体及合成白块菌菌根的方法。本发明专利技术所述V8蔬菜汁购买自美国金宝公司(Campbell

【技术实现步骤摘要】
V8蔬菜汁在培养白块菌菌丝体中的应用、培养白块菌菌丝体及合成白块菌菌根的方法


[0001]本专利技术属于植物与微生物技术交叉领域，具体涉及V8蔬菜汁在培养白块菌菌丝体中的应用、培养白块菌菌丝体及合成白块菌菌根的方法。

技术介绍

[0002]块菌在全球久负盛名，是名贵的食药用真菌。我国块菌的人工栽培尚处在初期探索阶段，难以形成规模化的种植。菌根的形成，是块菌实现人工栽培的首要条件。目前，国内虽然已有块菌菌根合成的研究案例，也有种植园实现了块菌的人工种植，但是相关的研究主要集中在黑块菌上，如印度块菌(Tuber indicum)，而白块菌的人工种植尚无成功报道。
[0003]白块菌栽培难度大，最首要的原因，一是块菌与宿主植物的共生机制较为复杂，另一方面因为块菌的菌种分离极为困难。目前块菌在国内外的人工栽培方式，主要是利用成熟的块菌孢子接种宿主根系合成菌根，然后移栽至种植园。该方式对于价值较低的块菌物种，以及可持续产出子实体作为菌剂来源的国外种植园较为经济适用。但是在国内，该方式对野生块菌资源存在过度依赖，严重受限于野生成熟块菌的生长周期和成熟周期，而且块菌长于地下，在野外难以精准采获成熟的子实体，所采获的未成熟块菌品质低廉，更重要的是无法利用其孢子进行菌根合成。此外，该方式极易伴生野外污染性的外源菌根真菌，从而抑制块菌菌根的形成，导致周期成本和经济成本大幅增加，更重要的，还会对资源和生态造成了极大的破坏。如何合成白块菌菌根，实现白块菌的人工种植显得尤为迫切。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于解决现有技术的不足，提供V8蔬菜汁在培养白块菌菌丝体中的应用、培养白块菌菌丝体及合成白块菌菌根的方法，快速、大量扩繁白块菌丝体，规避不成熟块菌孢子无法进行菌根合成的弊端，从根本上突破种源限制的瓶颈，合成白块菌菌根。
[0005]本专利技术提供了V8蔬菜汁在培养白块菌菌丝体中的应用。
[0006]优选的，所述白块菌包括金沙江块菌(Tuber jinshajiangense)和/或会东块菌 (Tuber huidongense)
[0007]本专利技术还提供了一种用于培养白块菌菌丝体的培养基，包括100mL/L V8蔬菜汁。
[0008]优选的，所述培养基还包括0.02g/L Ca(NO3)2、0.5g/L KH2PO4和20g/L琼脂。
[0009]本专利技术还提供了一种培养白块菌菌丝体的方法，包括如下步骤：
[0010]利用上述技术方案所述的培养基培养白块菌，得到白块菌菌丝体。
[0011]优选的，所述培养的温度为18～24℃，pH为6.5～8。
[0012]本专利技术还提供了上述技术方案所述方法得到的白块菌菌丝体在白块菌菌根合成中的应用。
[0013]本专利技术还提供了一种合成白块菌菌根的方法，包括如下步骤：
[0014]将上述技术方案所述方法得到的白块菌菌丝体和白块菌宿主共同栽培到基质中
培养，得到所述白块菌菌根。
[0015]优选的，所述培养的温度为21～25℃，湿度为30％～45％，光照为1500～3000lx，时间为40～52天；
[0016]所述基质包括腐殖土、蛭石、沙和珍珠岩；所述腐殖土、蛭石、沙和珍珠岩的体积比为1：1：0.5：0.25。
[0017]优选的，所述白块菌宿主包括松属和/或栗属宿主。
[0018]本专利技术提供了V8蔬菜汁在培养白块菌菌丝体中的应用，V8蔬菜汁含有大量适合白块菌生长的碳源、钾素、钠素营养、维生素E和维生素C，利用V8蔬菜汁培养白块菌可快速、大量扩繁培养菌丝体，得到紧密、白色、菌落大和长势旺盛的白块菌菌丝。
[0019]利用本专利技术分离得到的白块菌菌丝体与松属和/或栗属宿主进行菌根合成，为实现白块菌的人工菌根合成及其种植提供了关键核心技术，极大缩短了白块菌菌根合成周期，加快幼苗菌根化的程度，大幅度地降低时间和材料成本，规避野生块菌孢子接种所带来的外源真菌污染风险；同时还增强幼苗吸收营养水分的能力和对环境的适应性，使菌根苗的生长得到改善，显著促进了菌根苗株高地径的生长，具有明显的通用性。
附图说明
[0020]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0021]图1为金沙江块菌菌丝形态；
[0022]图2为金沙江块菌菌丝电镜形态；
[0023]图3为分离到的金沙江块菌菌丝体分子鉴定及接种华山松、板栗形成的菌根分子鉴定结果；
[0024]图4为会东块菌菌丝形态；
[0025]图5为会东块菌菌丝电镜形态；
[0026]图6为分离到的会东块菌菌丝体分子鉴定及接种华山松、板栗形成的菌根分子鉴定结果；
[0027]图7为金沙江块菌接种华山松形成的菌根宏观形态；
[0028]图8为金沙江块菌接种板栗形成的菌根宏观形态；
[0029]图9为会东块菌菌丝体接种华山松形成的菌根宏观形态；
[0030]图10为会东块菌菌丝体接种板栗形成的菌根宏观形态。
具体实施方式
[0031]本专利技术提供了V8蔬菜汁在培养白块菌菌丝体中的应用。
[0032]本专利技术对所述白块菌的具体类型没有严格要求，常规选择白块菌物种即可。本专利技术在具体实施过程中以金沙江块菌(Tuber jinshajiangense)和会东块菌(Tuberhuidongense)为例进行说明，但是不能仅将其理解为本专利技术的保护范围。本专利技术所述V8蔬菜汁优选为的原味V8蔬菜汁，购买自美国金宝公司(Campbell
’
s，USA)，富含碳源、钾素、钠素营养、维生素E和维生素C。利用V8蔬菜汁培养白块菌可快速、大量扩繁培养菌丝体，得到紧密、白色、菌落大和长势旺盛的白块菌菌丝。
[0033]本专利技术还提供了一种用于培养白块菌菌丝体的培养基，包括100mL/L V8蔬菜汁，优选还包括0.02g/L Ca(NO3)2、0.5g/L KH2PO4和20g/L琼脂。本专利技术所述培养基能够促进白块菌菌丝生长，使白块菌菌丝体快速、大量地扩繁，得到紧密、白色、菌落大和长势旺盛的白块菌菌丝。
[0034]本专利技术还提供了一种培养白块菌菌丝体的方法，包括如下步骤：
[0035]利用上述技术方案所述的培养基培养白块菌，得到白块菌菌丝体。
[0036]本专利技术优选利用上述技术方案所述的培养基培养白块菌的子实体。本专利技术对所述白块菌的子实体的来源没有严格要求，常规获得即可。本专利技术所述培养的温度优选为18～24℃，进一步优选为20～22℃；所述培养的pH优选为7～8；所述培养优选为黑暗培养。本专利技术优选在培养一个月后，选择生长良好的菌丝进行ITS鉴定，确认为白块菌菌丝体后转移至新的培养基上进行纯化培养。
[0037]本专利技术还提供了上述方法得到的白块菌菌丝体在白块菌菌根合成中的应用；所述白块菌优选包括金沙江块菌和/或会东块菌。本专利技术利用上述方法得到的白块菌菌丝体紧密、菌落大且长势本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.V8蔬菜汁在培养白块菌菌丝体中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述白块菌包括金沙江块菌(Tuber jinshajiangense)和/或会东块菌(Tuber huidongense)。3.一种用于培养白块菌菌丝体的培养基，其特征在于，包括100mL/L V8蔬菜汁。4.根据权利要求3所述的培养基，其特征在于，所述培养基还包括0.02g/L Ca(NO3)2、0.5g/L KH2PO4和20g/L琼脂。5.一种培养白块菌菌丝体的方法，其特征在于，包括如下步骤：利用权利要求3或4所述的培养基培养白块菌，得到白块菌菌丝体。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述培养的温...

【专利技术属性】
技术研发人员：万山平，王开洋，于富强，黄兰兰，崔梦金，王冉，时晓菲，谢雪丹，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：