一种鳝鱼粘液多糖物质提取方法技术

本发明专利技术提供了一种鳝鱼粘液多糖物质提取方法，包括以下步骤：将黄鳝滤液通过乙醇进行脱脂处理，除去脂溶性成分；将脱脂的黄鳝滤液真空浓缩至原体积的1/4，加4倍体积无水乙醇，静置过夜；将静置滤液进行离心操作，将沉淀用无水乙醇洗涤3次；用少量蒸馏水将沉淀溶解，利用Sevage法脱蛋白5次；在蒸馏水中透析2天，得粗多糖；将粗多糖上DEAE

【技术实现步骤摘要】
一种鳝鱼粘液多糖物质提取方法


[0001]本专利技术涉及多糖提取
，具体是指一种鳝鱼粘液多糖物质提取方法。

技术介绍

[0002]黄鳝为热带及暖温带鱼类，营底栖生活的鱼类，适应能力强，在河道、湖泊、沟渠及稻田中都能生存。日间喜在多腐植质淤泥中钻洞或在堤岸有水的石隙中穴居。白天很少活动，夜间出穴觅食。鳃不发达，而借助口腔及喉腔的内壁表皮作为呼吸的辅助器官，能直接呼吸空气；在水中含氧量十分贫乏时，也能生存。出水后，只要保持皮肤潮湿，数日内亦不会死亡。黄鳝是以各种小动物为食的杂食性鱼类，性贪，夏季摄食最为旺盛，寒冷季节可长期不食，而不至死亡。黄鳝不仅为席上佳肴，其肉、血、头、皮均有一定的药用价值。据《本草纲目》记载，黄鳝有补血、补气、消炎、消毒、除风湿等功效。研究表明，从黄鳝粘液中可以提取多种有活性的多糖，其在抗氧化、抗肿瘤、抗衰老等方面具有一定的功效。
[0003]但从黄鳝粘液中进行多糖提取较为困难，且难以实现较高纯度的提取，导致提取出的多糖纯度不够，无法实现对人体的使用。

技术实现思路

[0004]本专利技术为了解决上述的各种问题，提供了一种鳝鱼粘液多糖物质提取方法，其可实现对鳝鱼粘液的有效获取以及从中提取出较高纯度的多糖，以便对人体进行使用。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案为：一种鳝鱼粘液多糖物质提取方法，包括以下步骤：
[0006]步骤一：将黄鳝滤液通过乙醇进行脱脂处理，除去脂溶性成分；
[0007]步骤二：将步骤一中脱脂的黄鳝滤液真空浓缩至原体积的1/4，加4倍体积无水乙醇，静置过夜；
[0008]步骤三：将步骤二中的静置滤液进行离心操作，将沉淀用无水乙醇洗涤3 次；
[0009]步骤四：用少量蒸馏水将沉淀溶解，利用Sevage法脱蛋白5次；
[0010]步骤五：在蒸馏水中透析2天，得粗多糖；
[0011]步骤六：将粗多糖上DEAE
‑
52层析柱，先用1.5倍柱体积蒸馏水洗脱；
[0012]步骤七：再用NaCl进行梯度洗脱，以收集器收集；
[0013]步骤八：将收集器内的浓缩液进行干燥，得黄鳝多糖。
[0014]优选的，所述步骤七中，NaCl的浓度为0.25
‑
0.75mol/L，流速为15mL/h。
[0015]优选的，所述步骤一中，乙醇的浓度为95％。
[0016]本专利技术还包括一种黄鳝滤液的收集方法，具体步骤如下：
[0017]A.取生长状况良好的成年黄鳝，向其中加入培养液；
[0018]B.在培养液中培养48
‑
50小时后，将黄鳝捞起，放入蒸馏水中；
[0019]C.采用紫光照射黄鳝，并每隔5小时向蒸馏水中通入氧气10min，20
‑
24小时后，将黄鳝捞出，刮下体表的粘液；
[0020]D.将步骤C中剩余的蒸馏水浓缩至原体积0.32
‑
0.38倍，向其中加入步骤C 所得的粘液，再向其中加入蒸馏水浓缩后的重量的0.5倍重的正己烷和无水乙醇混合溶液，搅拌均匀，然后将混合液降温至8
‑
10℃，静置4
‑
6小时；
[0021]E.将静置液离心，得到沉淀，用无水乙醇清洗沉淀2次，然后将沉淀溶解在其重量3
‑
5倍重的蒸馏水中，制得无杂质的黄鳝粘液。
[0022]优选的，所述步骤A中，培养液的重量为黄鳝重量的30
‑
40倍。
[0023]优选的，所述步骤A中，培养液的成分为：庵摩勒16
‑
19份、川贝母10
‑
15 份、大地棕根5
‑
8份、马乳3
‑
5份、山茶根7
‑
9份、其余为水。
[0024]优选的，所述步骤C中，氧气的流量为2
‑
3L/h，蒸馏水的温度为23
‑
25℃。
[0025]优选的，所述Sevage脱蛋白法具体为：将提取液与Sevage试剂5：1混合，然后振荡，离心，变性后的蛋白质介于提取液与Sevage试剂交界处。
[0026]本专利技术与现有技术相比的优点在于：
[0027]第一，能获得大量的无杂质的黄鳝粘液，且能有效的保护黄鳝粘液中的有效成分。其中，培养液中的庵摩勒、川贝母和马乳相互协同作用，能刺激黄鳝产生粘液，此时产生的黄鳝粘液均聚集在黄鳝的体表；大地棕根和山茶根相互协同作用，能分解黄鳝新陈代谢产生的有毒物质，保证黄鳝粘液中不含有毒害物质；
[0028]第二，能提取到较高纯度的多糖，使提取出的多糖中不含其他杂质，用于人体更加健康有效。
具体实施方式
[0029]下面通过参考实施例是示例性的，仅用于解释本申请，而不能理解为对本申请的限制。
[0030]对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本申请中的具体含义。
[0031]一种鳝鱼粘液多糖物质提取方法，包括以下步骤：
[0032]步骤一：将黄鳝滤液通过乙醇进行脱脂处理，除去脂溶性成分，乙醇的浓度为95％；
[0033]步骤二：将步骤一中脱脂的黄鳝滤液真空浓缩至原体积的1/4，加4倍体积无水乙醇，静置过夜；
[0034]步骤三：将步骤二中的静置滤液进行离心操作，将沉淀用无水乙醇洗涤3 次；
[0035]步骤四：用少量蒸馏水将沉淀溶解，利用Sevage法脱蛋白5次；
[0036]步骤五：在蒸馏水中透析2天，得粗多糖；
[0037]步骤六：将粗多糖上DEAE
‑
52层析柱，先用1.5倍柱体积蒸馏水洗脱；
[0038]步骤七：再用NaCl进行梯度洗脱，以收集器收集，NaCl的浓度为 0.25
‑
0.75mol/L，流速为15mL/h；
[0039]步骤八：将收集器内的浓缩液进行干燥，得黄鳝多糖。
[0040]所得黄鳝多糖进一步提纯的方法如下：
[0041]对所得黄鳝多糖进行透析，然后浓缩后上Sephadex G
‑
100层析柱，用 0.05mol/L NaCl溶液洗脱，流速18mL/h，分别收集洗脱糖峰，得到纯品多糖。
[0042]本专利技术中还包括一种黄鳝滤液的收集方法，具体如下：
[0043]A.取生长状况良好的成年黄鳝，向其中加入培养液，培养液的重量为黄鳝重量的30
‑
40倍；
[0044]B.在培养液中培养48
‑
50小时后，将黄鳝捞起，放入蒸馏水中；
[0045]C.采用紫光照射黄鳝，并每隔5小时向蒸馏水中通入氧气10min，20
‑
24小时后，将黄鳝捞出，刮下体表的粘液，氧气的流量为2
‑
3L/h，蒸馏水的温度为 23
‑
25℃；
[0046]D.将步骤C中剩余本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鳝鱼粘液多糖物质提取方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一：将黄鳝滤液通过乙醇进行脱脂处理，除去脂溶性成分；步骤二：将步骤一中脱脂的黄鳝滤液真空浓缩至原体积的1/4，加4倍体积无水乙醇，静置过夜；步骤三：将步骤二中的静置滤液进行离心操作，将沉淀用无水乙醇洗涤3次；步骤四：用少量蒸馏水将沉淀溶解，利用Sevage法脱蛋白5次；步骤五：在蒸馏水中透析2天，得粗多糖；步骤六：将粗多糖上DEAE
‑
52层析柱，先用1.5倍柱体积蒸馏水洗脱；步骤七：再用NaCl进行梯度洗脱，以收集器收集；步骤八：将收集器内的浓缩液进行干燥，得黄鳝多糖。2.根据权利要求1所述的一种鳝鱼粘液多糖物质提取方法，其特征在于：所述步骤七中，NaCl的浓度为0.25
‑
0.75mol/L，流速为15mL/h。3.根据权利要求1所述的一种鳝鱼粘液多糖物质提取方法，其特征在于：所述步骤一中，乙醇的浓度为95％。4.根据权利要求1所述的一种鳝鱼粘液多糖物质提取方法，其特征在于：所述黄鳝滤液的收集方法如下：A.取生长状况良好的成年黄鳝，向其中加入培养液；B.在培养液中培养48
‑
50小时后，将黄鳝捞起，放入蒸馏水中；C.采用紫光照射黄鳝，并每隔5小时向蒸馏水中通入氧气10min，20
‑
24小时后，将黄鳝捞出，刮下体表的粘液；D.将步骤C中剩余的蒸馏水浓缩至原体积0.32
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【专利技术属性】
技术研发人员：廖涛，邱亮，熊光权，白婵，耿胜荣，王炬光，鉏晓艳，李海蓝，
申请(专利权)人：湖北省农业科学院农产品加工与核农技术研究所，
类型：发明
国别省市：