一种人GLI1蛋白Ser937位点磷酸化抗体的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种人GLI1蛋白Ser937位点磷酸化抗体的制备方法，包括如下步骤：(1)确定人GLI1Ser937蛋白磷酸化位点；(2)根据GLI1靶点序列及已知的磷酸化位点Ser937，设计需要合成的磷酸化及非磷酸化多肽序列；(3)合成氨基酸序列的抗原合成肽，将该多肽与载体蛋白偶联用作抗原；(4)将步骤(3)合成的抗原合成肽免疫动物并收集抗血清；(5)将步骤(4)收集的抗血清进行纯化和鉴定，得到人GLI1蛋白Ser937位点磷酸化抗体。本发明专利技术制备得到的高特异性的人GLI1蛋白Ser937位点磷酸化抗体可用Western blot实验检测正常细胞、肿瘤细胞的表达差异，有助于研究GLI1蛋白的磷酸化修饰在肿瘤疾病发生发展过程中的作用，为临床肿瘤疾病的诊断或治疗提供潜在的作用靶点。疗提供潜在的作用靶点。疗提供潜在的作用靶点。

【技术实现步骤摘要】
一种人GLI1蛋白Ser937位点磷酸化抗体的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及抗体
，具体为一种人GLI1蛋白Ser937位点磷酸化抗体的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]Hedgehog(HH)信号通路在哺乳动物器官发育、再生和体内平衡中具有重要意义，HH通路的失调被发现是先天性综合征的原因。在脊椎动物中，HH配体包括Sonic HH(SHH)、Indian HH(IHH)和Desert HH(DHH)，分别在不同的组织器官中差异表达。IHH参与软骨内骨化，DHH的作用局限于卵巢颗粒细胞和睾丸支持细胞等性腺，SHH在胚胎发育的各个阶段具有时空表达特性，保持着活跃的状态，但是在成年后的机体中，SHH通路的活性显著下降。SHH通路的异常表达会导致机体大脑，肺，肾上腺，肢体等器官和组织的发育异常及相关疾病发生。此外，SHH信号随后被证明可以在成年组织中调节干细胞的稳态，持续的SHH信号激活引发多种肿瘤发生，如皮肤基底细胞癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、胃癌、结肠癌、食道癌、乳腺癌与肝癌等。研究HH信号的调控将不仅为组织器官的生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人GLI1蛋白Ser937位点磷酸化抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)确定人GLI1 Ser937蛋白磷酸化位点；(2)根据GLI1靶点序列及已知的磷酸化位点Ser937，设计需要合成的磷酸化及非磷酸化多肽序列；(3)合成氨基酸序列的抗原合成肽，将该多肽与载体蛋白偶联用作抗原；(4)将步骤(3)合成的抗原合成肽免疫动物并收集抗血清；(5)将步骤(4)收集的抗血清进行纯化和鉴定，得到人GLI1蛋白Ser937位点磷酸化抗体。2.如权利要求1所述的一种人GLI1蛋白Ser937位点磷酸化抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中的磷酸化多肽序列为：PAQEPSYQp[S937]PKFLG
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【专利技术属性】
技术研发人员：吴希美，王继荣，姚敏俐，唐超，何强强，许成云，曾玲晖，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：