临床级混合型免疫细胞的制备方法技术

本发明专利技术公开一种临床级混合型免疫细胞的制备方法，其步骤包括：采用淋巴细胞分离液从外周血中分离出单个核细胞；完全培养基A液悬浮单个核细胞，混匀后，置于培养箱内培养；培养后，向培养液中添加等体积的完全培养基B液，混匀后，置于培养箱内继续培养；每2至3天根据细胞计数结果等体积补充完全培养基C液；培养16天后，获得CD3

【技术实现步骤摘要】
临床级混合型免疫细胞的制备方法


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种临床级混合型免疫细胞的制备方法。

技术介绍

[0002]细胞治疗是继手术、放疗和化疗之后的又一种肿瘤治疗方法，它一般作为手术、放化疗的辅助手段，延长患者的寿命，清除体内手术后残余的癌细胞。常用的免疫细胞主要有细胞因子诱导的杀伤细胞CIK)、自然杀伤细胞(NK)、树突状细胞(DC)、淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)、肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)等。
[0003]CIK和NK细胞是进行肿瘤免疫治疗的两个重要部分。CIK是一群具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性及NK细胞的非主要组织相容性复合物限制性细胞，CD3+CD56+细胞是其主要的效应细胞。CIK细胞主要是以MHC限制性的方式杀伤靶细胞，DC细胞通过MHC限制性的方式抗原呈递给CIK细胞，以激活CIK细胞的杀伤效应，清除残存的肿瘤细胞而发挥更加强大的细胞毒性作用。NK细胞是一群表达CD3
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CD56+的淋巴细胞，NK细胞对肿瘤和病毒的识别无MHC限制性，不依赖于抗体，无需致敏就可以发挥杀伤肿瘤和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种临床级混合型免疫细胞的制备方法，其特征在于，其步骤包括：采用淋巴细胞分离液从外周血中分离出单个核细胞；完全培养基A液悬浮单个核细胞，混匀后，置于培养箱内培养；培养后，向培养液中添加等体积的完全培养基B液，混匀后，置于培养箱内继续培养；每2至3天根据细胞计数结果等体积补充完全培养基C液；培养16天后，获得CD3
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CD56+、CD3+CD56+为主要效应细胞的混合免疫细胞群。2.根据权利要求1所述的临床级混合型免疫细胞的制备方法，其特征在于，所述完全培养基A液包括：含有1μg/ml～5ug/ml的CD16单抗的SCGMNK培养基、20μg/ml～100μg/ml的力尔凡及2％～5％的血清替代物。3.根据权利要求1所述的临床级混合型免疫细胞的制备方法，其特征在于，所述完全培养基B液包括：10μg/ml～100ug/ml胸腺法新、1000μg/ml～5000U/ml的IL
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2、10μg/ml～100ng/ml的IL15及2％～5％的血清替代物。4.根据权利要求1所述的临床级混合型免疫细胞的制备方法，其特征在于，所述完全培养基C液包括：1％～3％的血清替代物、1000μg/ml～2000U/ml的IL
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2及...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜丽君，李超，贲亮，孙红雪，
申请(专利权)人：吉林省拓华生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：