一种临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法，包括以下步骤：神经干细胞悬浮扩增培养；神经干细胞贴壁扩增培养；神经干细胞单细胞培养及原液制备：配制冻存液悬浮细胞原液，并冻存。本发明专利技术的技术方案通过悬浮扩增阶段采用低吸附培养瓶神经球的方式进行扩增培养，避免神经球贴壁导致分化及干细胞属性下降；贴壁扩增阶段采用基质胶进行3D单细胞扩增培养，维持干细胞属性性且不延迟细胞增殖；单细胞悬浮培养24h后制备制剂原液，细胞膜损伤修复及单细胞维持阶段避免再次消化，实现了高活性的神经干细胞原液制备，既保持了神经干细胞的干细胞属性又提高了冻存制剂的活性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物技术与组织工程，尤其涉及一种临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法。

技术介绍

1、近些年，我国生物医疗产业发展迅速，细胞医疗技术的发展更是如火如荼。新鲜细胞产品保存时限较短，使临床应用受到很大的区域限制，故多为冻存制剂，既能满足产品的质量检测需要，又能满足临床应用的实际需求。

2、神经干细胞(neural stemcells,nscs)作为干细胞的一种，近年来越来越多地受到神经科学领域的重视，实行细胞替代治疗是新发展起来并具有广阔应用前景的治疗战略。神经干细胞的发现及其体外培养的成功，使今后有效地治疗中枢神经系统损伤和神经退行性疾病成为可能。

3、目前动物源神经干细胞的培养、冻存等技术已被普遍推广及应用，但人员神经干细胞的培养、冻存、应用技术处于研发、试验阶段。个体差异不同导致单细胞冻存制剂的干性缺失或活性下降导致神经干细胞制剂的应用受限。

技术实现思路

1、本专利技术实施例的主要目的在于提出一种临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法，旨在培养一种高活性的神经干细胞原液，保本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述冻存液包括5％-10％DMSO，20％-30％人血白蛋白，65％-75％低分子右旋糖酐氨基酸注射液。

3.根据权利要求1所述的临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法，其特征在于，所述的临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法还包括：取出冻存的细胞原液，37℃复苏后平衡至室温，直接用于静脉输注。

4.根据权利要求1所述的临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法，其特征在于，步骤2)中Matriglel TM基质胶...

【技术特征摘要】

1.一种临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述冻存液包括5％-10％dmso，20％-30％人血白蛋白，65％-75％低分子右旋糖酐氨基酸注射液。

3.根据权利要求1所述的临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法，其特征在于，所述的临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法还包括：取出冻存的细胞原液，37℃复苏后平衡至室温，直接用于静脉输注。

4.根据权利要求1所述的临床级神经干细胞冻存制剂的制备方法，其特征在于，步骤2)中matriglel tm基质胶...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜丽君，李超，王英君，成实，
申请(专利权)人：吉林省拓华生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：