本发明专利技术涉及续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒的制药用途，具体涉及续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。本发明专利技术创造性地提取纯化中药续断衍生的细胞外囊泡，并对其生理功效进行了研究，发现其充分被骨髓间充质干细胞内化吸收，能够通过激活BMP2/Smads信号通路来促进骨髓间充质干细胞的成骨分化，促进骨髓间充质干细胞中的钙结节形成，促进成骨分化相关基因ALP、OCN、RUNX2以及COL1的表达，体内具有骨靶向性，通过灌胃给药可以缓解绝经后小鼠骨质疏松，具有用于制备预防或治疗骨科疾病的药物的潜力，为预防或治疗骨科疾病提供了新策略。防或治疗骨科疾病提供了新策略。防或治疗骨科疾病提供了新策略。
【技术实现步骤摘要】
续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用
[0001]本专利技术属于生物医药
，涉及续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒的制药用途，具体涉及续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。
技术介绍
[0002]骨质疏松(osteoporosis，OP)是一种以骨量低下、骨微结构损坏，导致骨脆性增加、易发生骨折为特征的全身性骨病，好发于绝经后妇女及老年男性，其发病的主要原因之一是骨形成和骨吸收之间的不平衡，因此，抑制破骨细胞过度活化和增强成骨分化是抗骨质疏松的有效策略。
[0003]续断为川续断科植物川续断Dipsacus asper Wall.ex Henry的干燥根，具有补肝肾、强筋骨、续折伤的功效，临床用于主治肝肾不足、跌扑损伤、筋伤骨折等。细胞外囊泡(extracellular vesicles，EVs)含有多种蛋白质、脂质和核酸，可通过介导细胞与细胞之间的通讯发挥重要的生理功能，几乎所有类型的真核和原核细胞都分泌EVs。植物EVs在形态方面与哺乳动物EVs相似，但其组成和功能等方面研究较少。有研究发现植物EVs是植物先天免疫系统的组成成分，具有抗真菌作用。此外，植物EVs具有跨物种调节功能，不仅可以调节哺乳动物细胞的生理功能，还可以干预和预防疾病进程，对疾病起到治疗作用。这些研究结论证明植物EVs作为一种新型的天然产物有可能成为新药开发的良好候选来源。中药多为植物，成本低，副作用小，但中药源性的EVs却很少有人研究。从中药续断中提取细胞外囊泡是否可行，提取出的续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒是否具有生物活性还未可知。
[0004]因此，如何提供一种从中药续断中提取细胞外囊泡的方法，并深入研究提取到的续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒的功能，以发掘其在治疗骨科疾病方面的应用潜力，是具有意义的。
技术实现思路
[0005]针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒的制药用途，具体涉及续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。
[0006]为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0007]第一方面，本专利技术提供续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病的药物中的应用。
[0008]本专利技术创造性地提取纯化中药续断衍生的细胞外囊泡，并对其生理功效进行了研究，发现其充分被骨髓间充质干细胞内化吸收，能够通过激活BMP2/Smads信号通路来促进骨髓间充质干细胞的成骨分化，促进骨髓间充质干细胞中的钙结节形成，促进成骨分化相关基因(ALP、OCN、RUNX2以及COL1)的表达，具有体内骨靶向性，其用于制备预防或治疗骨科疾病的药物具有潜力，为预防或治疗骨科疾病的方法提供了新的策略。
[0009]优选地，所述骨科疾病的类型包括骨质疏松、骨折或骨性关节炎中的任意一种。
[0010]优选地，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、溶液剂、气雾剂、喷雾剂、软膏剂或膜剂中的任意一种。
[0011]优选地，所述药物还包括药学上可接受的辅料，例如稀释剂、调味剂、粘合剂、填充剂、增稠剂、润滑剂或pH调节剂等。
[0012]本专利技术所涉及的续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒可以通过本领域技术人员公知的任何方法制备得到，更优选下述提取方法，该方法得到的续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒纯度更高，具有更优异的促进骨髓间充质干细胞的成骨分化效果和体内骨靶向性。粒径大小为0
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300nm，具有丰富的核酸、蛋白质和脂质成分。
[0013]优选地，所述续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒是由包括如下步骤的提取方法制得的：
[0014](1)将续断原料榨汁，过滤，滤液离心除去杂质后，收集上清液；
[0015](2)将上清液超高速离心后，收集沉淀，过滤，即得。
[0016]优选地，步骤(1)所述离心包括至少三次离心。
[0017]优选地，步骤(1)所述离心包括三次离心，第一次离心的速度为100
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500g(例如100g、150g、200g、250g、300g、350g、400g、450g、500g等)，第二次离心的速度为1000
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5000g(例如1000g、1200g、1500g、1700g、2000g、2200g、2500g、2700g、3000g、3500g、4000g、4500g、5000g等)，第三次离心的速度为8000
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15000g(例如8000g、8500g、9000g、9500g、10000g、10500g、11000g、11500g、12000g、15000g等)，且三次离心的时间各自独立地选择5
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40min(例如5min、10min、15min、20min、25min、30min、35min、40min等)。
[0018]优选地，步骤(2)所述超高速离心的速度为100000
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200000g(例如100000g、110000g、120000g、130000g、140000g、150000g、160000g、170000g、180000g、190000g、200000g等)，时间为50
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100min(例如50min、55min、60min、65min、70min、75min、80min、85min、90min、95min、100min等)。
[0019]上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
[0020]优选地，步骤(2)所述过滤选择0.22μm滤膜进行。
[0021]第二方面，本专利技术提供续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒在制备骨靶向制剂中的应用。
[0022]本专利技术还创造性地发现续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒在动物体内具有骨靶向性，这一发现可进一步应用于骨靶向制剂的制备中，以进行骨科疾病发病机制的研究和相关病症的治疗。
[0023]优选地，所述骨靶向制剂还包括负载于所述续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒中的其他预防或治疗骨科疾病的药物。
[0024]所述其他预防或治疗骨科疾病的药物例如钙制剂、雌激素类药物、降钙素、二磷酸盐类药物、特立帕肽等。
[0025]第三方面，本专利技术提供续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒在制备骨髓间充质干细胞成骨分化促进剂中的应用。
[0026]第四方面，本专利技术还提供续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒以非治疗为目的的在制备骨髓间充质干细胞成骨分化促进剂中的应用。
[0027]本专利技术由于发现续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒具有显著地促进骨髓间充质干细胞成骨分化的作用，因此可以以非治疗和/或诊断为目的的作为骨髓间充质干细胞成骨分化促进剂用于骨髓间充质干细胞分化相关的代谢行为或其他相关的理论科学研究。
[0028]第五方面，本专利技术还提供一种促进骨髓间充质干细胞成骨分化的方法，所述方法包括：向骨髓间充质干细胞提供续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒。
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，所述骨科疾病的类型包括骨质疏松、骨折或骨性关节炎中的任意一种；优选地，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、溶液剂、气雾剂、喷雾剂、软膏剂或膜剂中的任意一种；优选地，所述药物还包括药学上可接受的辅料。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述续断源性细胞外囊泡样纳米颗粒是由包括如下步骤的提取方法制得的：(1)将续断原料榨汁，过滤，滤液离心除去杂质后，收集上清液；(2)将上清液超高速离心后，收集沉淀，过滤，即得。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(1)所述离心包括至少三次离心；优选地，步骤(1)所述离心包括三次离心，第一次离心的速度为100
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500g，第二次离心的速度为1000
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5000g，第三次离心的速度为8000
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150...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵可伟，曹越，
申请(专利权)人：广州中医药大学第三附属医院，
类型：发明
国别省市：
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