一种耳聋左慈丸混合粉中多种成分含量的测定方法技术

本发明专利技术提供一种耳聋左慈丸混合粉中多种成分含量的测定方法，包括：将耳聋左慈丸加入溶剂溶解后超声提取、摇匀、静置、过滤，取续滤液获得的供试品溶液采用高效液相色谱法进行检测，确定供试品溶液中8种指标成分：5

【技术实现步骤摘要】
一种耳聋左慈丸混合粉中多种成分含量的测定方法


[0001]本专利技术属于中药成分检测的
，涉及一种耳聋左慈丸混合粉中多种成分含量的测定方法，具体涉及一种耳聋左慈丸混合粉中8种成分：5
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羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、芍药苷、1,2,3,4,6
‑
O
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五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷和丹皮酚的HPLC检测方法。

技术介绍

[0002]耳聋左慈丸始载于清
·
凌奂的《饲鹤亭集方》，收录于历年版《中国药典》中，是中医治疗肝肾阴虚所致耳鸣、耳聋的经典名方，其组成由六味地黄丸配方添加竹叶柴胡和磁石而成，广泛的临床应用及其药物研究进展均证实。本品滋肾平肝，用于肝肾阴虚，耳鸣耳聋，头晕目眩，对老年性、药物性及突发性耳聋、头晕目眩、视物恍惚及白内障证属肝肾阴亏、虚火上炎者等均有显著的疗效。耳聋左慈丸混合粉是耳聋左慈丸生产加工过程中的重要中间体，该中间体由熟地、山药、山茱萸、牡丹皮、茯苓、泽泻、竹叶柴胡和磁石八味中药材粉碎混合而成。
[0003]处方中的熟地黄滋阴补肾、填精益髓，是为君药；山茱萸补养肝肾、山药补益脾阴，两药相配伍，辅助君药，滋养肝脾肾，共为臣药；山茱萸补养肝阴、山药补益脾阴，两药相配伍，共为臣药；泽泻利湿卸浊，防止熟地黄滋腻恋邪，茯苓健脾渗湿，牡丹皮清泻相火，竹叶柴胡疏肝解郁，磁石重镇平肝，此五药共为佐药。
[0004]2020版《中国药典》对耳聋左慈丸混合粉中的含量检测项采用HPLC法对其中马钱苷及莫诺苷进行检测。但耳聋左慈丸混合粉中成分众多，需要对其活性成分进行更细致的研究。

技术实现思路

[0005]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种耳聋左慈丸混合粉中多种成分含量的测定方法，用于解决现有技术中缺乏对耳聋左慈丸混合粉中多种有效成分进行测定从而对耳聋左慈丸混合粉的质量进行有效控制的问题。
[0006]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术第一方面提供一种耳聋左慈丸混合粉中多种成分含量的测定方法，包括：将耳聋左慈丸混合粉加入溶剂溶解后超声提取、摇匀、静置、过滤，取续滤液获得的供试品溶液采用高效液相色谱法(HPLC)进行检测，确定供试品溶液中8种指标成分：5
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羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、芍药苷、1,2,3,4,6
‑
O
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五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷、丹皮酚的含量。
[0007]较佳地，所述5
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羟甲基糠醛(5
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HMF)的CAS号为67
‑
47
‑
0，所述莫诺苷(Morroniside)的CAS号为25406
‑
64
‑
8，所述马钱苷(Loganin)的CAS号为18524
‑
94
‑
2，所述芍药苷(Paeoniflorin)的CAS号为23180
‑
57
‑
6，所述1,2,3,4,6
‑
O
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五没食子酰葡萄糖(1,2,3,4,6
‑
penta
‑
O
‑
galloy
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β
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D
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Glucose)的CAS号为14937
‑
32
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7，所述苯甲酸(Benzoic acid)的CAS号为65
‑
85
‑
0，所述苯甲酰芍药苷(Benzoylpaeoniflorin)的CAS号为38642
‑
49
‑
8，所
述丹皮酚(Paeonol)的CAS号为552
‑
41
‑
0。
[0008]较佳地，所述耳聋左慈丸混合粉呈粉末状。
[0009]较佳地，所述耳聋左慈丸混合粉在制备供试品溶液前要进行
60
Co
‑
γ射线辐照。
[0010]更优选地，所述
60
Co
‑
γ射线辐照的剂量为0
‑
10KGy，优选为0KGy、3KGy、6KGy、10KGy中的一种，更优选为6KGy。当所述
60
Co
‑
γ射线辐照的剂量为0KGy时，即未进行辐射。
[0011]更优选地，所述
60
Co
‑
γ射线辐照的最大吸收剂量≤6KGy。
[0012]所述
60
Co
‑
γ射线辐照灭菌技术是指利用
60
Co产生的γ射线杀灭物料表面及内部微生物的过程。由于中药多以根及根茎部入药，生长于菌种较为丰富、微生物复杂的土壤环境中，药材经净制和切制后，仍会携带一定量的微生物。尤其是直接打粉入药的中成药品种，对药材的初始含菌量要求较为严格否则会造成成品含菌量超标。一定辐射量的辐照可以有效降低中药材中微生物的含量，同时降低微生物负载，达到对中药灭菌的效果。因此，有必要对中药制剂原料药材的生药粉进行辐照灭菌，从而进一步降低微生物负载。
[0013]较佳地，所述耳聋左慈丸混合粉加入溶剂前要精密称重，所述耳聋左慈丸混合粉加入溶剂后也要精密称重。
[0014]较佳地，所述溶剂为70
‑
90％甲醇。优选地，所述溶剂为80％甲醇。
[0015]上述70
‑
90％甲醇为体积百分比为70
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90％(v/v)的甲醇水溶液。上述80％甲醇为体积百分比为80％(v/v)的甲醇水溶液。
[0016]较佳地，所述耳聋左慈丸混合粉加入的质量g与溶剂加入的体积mL之比为1:15
‑
25，优选为1:20。
[0017]较佳地，所述超声提取的时间为30
‑
60分钟，优选为40
‑
50分钟，更优选为45分钟。
[0018]较佳地，所述超声提取的功率为200
‑
300W，优选为250W；所述超声提取的频率为30
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50kHz，优选为40kHz。
[0019]较佳地，所述超声提取后要进去冷却，精密称重后用溶剂补足失重。所述冷却至室温，所述室温为20
‑
30℃。
[0020]较佳地，所述静置片刻以使超声提取后的溶液分层。
[0021]较佳地，所述过滤为取上清液过滤膜，放弃初滤液后，取续滤液。
[0022]优选地，所述滤膜为0.45μm滤膜。
[0023]较佳地，所述采用高效液相色谱法(HPLC)进行检测，包括以下步骤：
[0024]1)配制对照品溶液：将5
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羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、芍药苷、1,2,3,4,6
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O
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五没食子本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种耳聋左慈丸混合粉中多种成分含量的测定方法，包括：将耳聋左慈丸混合粉加入溶剂溶解后超声提取、摇匀、静置、过滤，取续滤液获得的供试品溶液采用高效液相色谱法进行检测，确定供试品溶液中8种指标成分：5
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羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、芍药苷、1,2,3,4,6
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O
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五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷、丹皮酚的含量。2.根据权利要求1所述的一种耳聋左慈丸混合粉中多种成分含量的测定方法，其特征在于，所述耳聋左慈丸混合粉在制备供试品溶液前要进行
60
Co
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γ射线辐照。3.根据权利要求1所述的一种耳聋左慈丸混合粉中多种成分含量的测定方法，其特征在于，所述耳聋左慈丸混合粉加入的质量与溶剂加入的体积之比为1:15
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25，g/mL；和/或，所述溶剂为70
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90％甲醇。4.根据权利要求1所述的一种耳聋左慈丸混合粉中多种成分含量的测定方法，其特征在于，所述超声提取的时间为30
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60分钟；和/或，所述超声提取后要进去冷却，精密称重后用溶剂补足失重；和/或，所述过滤为取上清液过滤膜，放弃初滤液后，取续滤液。5.根据权利要求1所述的一种耳聋左慈丸混合粉中多种成分含量的测定方法，其特征在于，所述采用高效液相色谱法进行检测，包括以下步骤：1)配制对照品溶液：将5
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羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、芍药苷、1,2,3,4,6
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O
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五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷、丹皮酚的对照品，加入溶剂溶解并定容，配成对照品溶液；2)样品检测：采用高效液相色谱法分别检测供试品溶液和步骤1)中的对照品溶液，比较保留时间进行定性，采用外标法进行定量，确定供试品溶液中5
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羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、芍药苷、1,2,3,4,6
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O
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五没食子酰葡萄糖、苯甲酸、苯甲酰芍药苷、丹皮酚的含量。6.根据权利要求5所述的一种耳聋左慈丸混合粉中多种成分含量的测定方法，其特征在于，步骤1)中，所述对照品溶液中5
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羟甲基糠醛的含量范围为0.202
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4.032μg/ml，莫诺苷的含量范围为0.090
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1.800μg/ml，马钱苷的含量范围为0.10...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔瑶，詹常森，姜鹏，温方方，
申请(专利权)人：上海和黄药业有限公司，
类型：发明
国别省市：