一种酶解枸叶制备生物活性肽的方法及其应用技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域，具体提供了一种酶解枸叶制备生物活性肽的方法，包括以下步骤：(1)制备含有生姜蛋白酶的生姜匀浆；(2)取枸叶进行预处理，然后加入生姜匀浆进行酶解，得到酶解液；(3)将酶解液加热灭活后过滤离心，上清液中添加玉米淀粉，干燥获得生物活性肽粉样。本发明专利技术提供的这种酶解枸叶制备生物活性肽的方法直接使用生姜匀浆对枸叶进行酶解，舍去了繁杂的生姜蛋白酶提取工艺，并且生姜内含有的活性物质能够有效提升酶解液最终的抗氧化活性。将采用本发明专利技术提供的方法制备的生物活性肽添加至动物饲料中，不仅能够有效抑制动物肠炎，提高免疫力。还在提升肉料比，提高饲料的利用率。的利用率。的利用率。

【技术实现步骤摘要】
一种酶解枸叶制备生物活性肽的方法及其应用


[0001]本专利技术属于生物工程
，具体涉及一种酶解枸叶制备生物活性肽的方法。

技术介绍

[0002]生物活性肽(Bioactive Peptide,BAP)是是蛋白质中20种天然以不同组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总称，是源于蛋白质的多功能化合物。生物活性肽具有多种人体代谢和生理调节功能，易消化吸收，有促进免疫、激素调节、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂等作用，具有很好的研究价值和应用前景。
[0003]构树叶中的粗蛋白含量高达23.21％，粗脂肪5.31％，钙4.62％，这些指标远远高于其他的落叶类乔木；并且构树的种植是非常简单的，繁殖的种类也比较多，有扦插、种子繁殖、切根等几种形式，存活率高；使用枸叶作为工业生产原料时，其来源较为广泛价格低廉。生姜蛋白酶是从生姜中发现的一种植物蛋白酶，属于木瓜蛋白酶类，与木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶及猕猴桃蛋白酶共同组成4种重要植物蛋白酶。生姜蛋白酶酶学性质较佳，在50℃左右仍具备较高酶活，能够有效降解反应体系中粗蛋白，形成小分子肽和氨基酸。
[0004]目前制取生物活性肽的原料多采用大豆、花生、鱼粉等，本专利技术以枸叶为底物，利用生姜蛋白酶降解枸叶中的粗蛋白，得到生物活性肽，一方面提供了一种新的生物活性肽制备方法，另一方面也为枸叶的利用提供了新途径。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种新的生物活性肽制备方法。
[0006]为此，本专利技术提供了一种酶解枸叶制备生物活性肽的方法，包括以下步骤：
[0007](1)制备含有生姜蛋白酶的生姜匀浆；
[0008](2)取枸叶进行预处理，然后加入生姜匀浆进行酶解，得到酶解液；
[0009](3)将酶解液加热灭活后过滤离心，上清液中添加玉米淀粉，干燥获得生物活性肽粉样。
[0010]具体的，上述步骤(1)具体为：取生姜根茎切块后榨汁匀浆，匀浆过程添加维生素C，得到含有生姜蛋白酶的生姜匀浆。
[0011]具体的，以生姜质量计，上述维生素C的添加量为0.1
‑
5％。
[0012]具体的，上述步骤(2)中预处理具体为：向枸叶中加入水或缓冲液，煮沸熬制。
[0013]具体的，上述缓冲液为PBS缓冲液或pH6.0磷酸缓冲液。
[0014]具体的，上述步骤(2)中枸叶：水或缓冲液：生姜匀浆的质量比为1：(4
‑
20)：(3
‑
30)。
[0015]具体的，上述步骤(2)中酶解条件为50℃恒温水浴4
‑
24h。
[0016]具体的，上述步骤(3)中干燥方法具体为在进风温度165
‑
175℃，出风温度60
‑
75℃下，进行喷雾干燥
[0017]采用本专利技术提供的方法制备的生物活性肽可用于动物饲料中，能够有效抑制动物
肠炎，提高免疫力。
[0018]具体的，以动物饲料质量计，所述生物活性肽添加量为0.1
‑
10kg/t。
[0019]与现有技术相比，本专利技术具有以下优点和有益效果：
[0020]本专利技术提供的这种酶解枸叶制备生物活性肽的方法直接使用生姜匀浆对枸叶进行酶解，舍去了繁杂的生姜蛋白酶提取工艺，并且生姜内含有的活性物质能够有效提升酶解液最终的抗氧化活性。酶解后的产物，上清可以制备活性肽，而离心残渣亦可直接饲养动物，全程无污染，无有害物质产生和添加。将采用本专利技术提供的方法制备的生物活性肽添加至动物饲料中，不仅能够有效抑制动物肠炎，提高免疫力。还在提升肉料比，提高饲料的利用率。
[0021]以下将结合附图对本专利技术做进一步详细说明。
附图说明
[0022]图1是本专利技术实施例1中小鼠肠道解剖图；A为实验组1；B为对照组1；C为对照组2。
[0023]图2是本专利技术实施例2中肉鸡肠道解剖图；A为实验组1；B为对照组1；C为对照组2。
具体实施方式
[0024]下面将结合实施例对本专利技术中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。尽管已经详细描述了本专利技术的代表性实施例，但是本专利技术所属
的普通技术人员将理解，在不脱离本专利技术范围的情况下可以对本专利技术进行各种修改和改变。因此，本专利技术的范围不应局限于实施方案，而应由所附权利要求及其等同物来限定。
[0025]本专利技术提供了一种酶解枸叶制备生物活性肽的方法，包括以下步骤：
[0026](1)制备含有生姜蛋白酶的生姜匀浆；
[0027]取生姜根茎切块后榨汁匀浆，匀浆过程添加维生素C，得到含有生姜蛋白酶的生姜匀浆。维生素C添加量优选为生姜质量的0.1
‑
5％。维生素C能保持生姜蛋白酶的活性，并且维持生姜内有效物质的生理活性。
[0028](2)取新鲜枸叶或干枸叶，加入水或缓冲液，缓冲液优选为PBS缓冲液或pH6.0磷酸缓冲液，煮沸熬制，冷却后加入生姜匀浆在50℃恒温水浴酶解4
‑
24h，得到酶解液。
[0029]枸叶：(水或缓冲液)：生姜匀浆的质量比为1：(4
‑
20)：(3
‑
30)。
[0030](3)将酶解液加热煮沸15min灭活后过滤离心，上清液中添加玉米淀粉，在进风温度165
‑
175℃，出风温度60
‑
75℃下，进行喷雾干燥，获得生物活性肽粉样。
[0031]下面通过具体实施例对本专利技术的酶解枸叶制备生物活性肽的方法及其应用的效果进行研究。
[0032]实施例1：
[0033]本实施例提供了一种酶解枸叶制备生物活性肽的方法，包括以下步骤：
[0034](1)取生姜根茎切块后榨汁匀浆，匀浆过程添加1％的维生素C，得到含有生姜蛋白酶的生姜匀浆。
[0035](2)取新鲜枸叶1kg，加入4kg水，并置于30L发酵罐中，蒸汽加热煮沸10min，冷却后向其中加入3kg生姜匀浆，在400rpm，50℃恒温水浴酶解16h，得到酶解液。
[0036](3)将酶解液加热煮沸15min灭活后过滤离心，上清液中添加玉米淀粉至溶液固形物含量为20％，在进风温度为165℃，出风温度为75℃，进行喷雾干燥，获得生物活性肽粉样。检测生物活性肽成品的DPPH清除率IC
50
值为2mg/g。
[0037]取同一生长阶段的实验小鼠，随机分为三组进行饲喂实验，其中：
[0038]实验组：饲喂添加有本实施例制备的生物活性肽的实验小鼠饲料，生物活性肽添加量为0.1kg/t；
[0039]对照组1：饲喂添加麦芽糊精的实验小鼠饲料，麦芽糊精添加量为0.1kg/t；
[0040]对照组2：饲喂不添加其他成分的实验小鼠饲料。
[0041]饲养周期一个月，期间每周取各实验组和对照组中长势均衡的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种酶解枸叶制备生物活性肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备含有生姜蛋白酶的生姜匀浆；(2)取枸叶进行预处理，然后加入生姜匀浆进行酶解，得到酶解液；(3)将酶解液加热灭活后过滤离心，上清液中添加玉米淀粉，干燥获得生物活性肽粉样。2.如权利要求1所述的酶解枸叶制备生物活性肽的方法，其特征在于，所述步骤(1)具体为：取生姜根茎切块后榨汁匀浆，匀浆过程添加维生素C，得到含有生姜蛋白酶的生姜匀浆。3.如权利要求2所述的酶解枸叶制备生物活性肽的方法，其特征在于：以生姜质量计，所述维生素C的添加量为0.1
‑
5％。4.如权利要求1所述的酶解枸叶制备生物活性肽的方法，其特征在于，所述步骤(2)中预处理具体为：向枸叶中加入水或缓冲液，煮沸熬制。5.如权利要求4所述的酶解枸叶制备生物活性肽的方法，其特征在于：所述缓冲液为PBS缓冲液或pH6.0磷酸缓冲液。6.如权利要求4所述的酶解枸叶...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴微，张茜茜，周樱，詹泽涛，张立，刘营，付大波，刘文悦，詹志春，
申请(专利权)人：武汉新华扬生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：