一种腺苷脱氨酶（ADA）检测试剂盒质量检测方法技术

本发明专利技术属于试剂盒检测领域，具体涉及一种用于腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒的质量检测方法。所述质量检测方法利用物理特性、化学特性、外观特性多个维度进行质量检测。本发明专利技术所述方法准确度、灵敏度高，实现了对腺苷酸脱氨酶(ADA)质量的有效控制。试验证明，可作为腺苷酸脱氨酶(ADA)检测试剂盒质量检测的常规方法。脱氨酶(ADA)检测试剂盒质量检测的常规方法。

【技术实现步骤摘要】
一种腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒质量检测方法


[0001]本专利技术涉及试剂盒质量检测方法，具体涉及一种腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒质量检测方法的


技术介绍

[0002]腺苷脱氨酶(adenosine deaminase，ADA)是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶，它的活性高低是肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一。
[0003]目前，血清中的ADA活性测定可用于判断急性肝损伤及残留病变；协助诊断慢性肝病；有助于肝纤维的诊断；有助于黄疸的鉴别；ADA活性缺乏与重症联合免疫缺陷病(SCID)有关， ADA缺乏可导致核酸代谢障碍，影响到胸腺的发育，从而引起免疫功能缺陷。脑脊液ADA检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标。
[0004]ADA在良恶性难辨的渗出液鉴别诊断上也具有重要价值。因此，测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对这些疾病的鉴别、诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视。
[0005]虽然腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒具有很大的应用价值，但目前缺乏对其有效的质量控制方法，难以对市面上的腺苷脱氨酶(ADA)试剂盒进行有效的质量评价。

技术实现思路

[0006]针对现有腺苷脱氨酶检测剂盒在测试过程中存在的上述缺陷，本专利技术提供一种灵敏、准确性好、稳定性好腺苷脱氨酶(ADA)检测剂盒质量检测方法。
[0007]本专利技术的第一方面，提供了一种腺苷酸脱氨酶(ADA)检测试剂盒的质量检测方法，所述质量检测步骤如下：
[0008](1)物理检测
[0009](1.1)检测试剂盒外观，检查试剂盒内封盖是否盖紧，无漏液；
[0010](1.2)检查试剂盒内试剂澄清度及含量情况；
[0011](2)化学检测
[0012](2.1)试剂空白吸光度；
[0013](2.2)分析灵敏度；
[0014](2.3)准确度检测
[0015](3)检测并评价校准品、质控品
[0016](3.1)外观检测
[0017](3.2)准确度检测
[0018](3.3)均一性检测；
[0019]进一步优选地，所述步骤(1.2)中，利用同一无色光照条件照射试剂容器，检查试剂是否为无色澄清液体；所述含量采用量具测量，进一步地，所述的量具精度不低于0.5mL。
[0020]进一步优选地，所述步骤(2.1)中，以纯化水或蒸馏水为样本，在546nm下测定其反应混合液的吸光度值，检查其吸光度应是否小于等于1.0000；所述试剂空白变化率的要求为：每分钟试剂空白吸光度的变化率(ΔA/min)≤0.0200。
[0021]进一步优选地，所述步骤(2.2)中，当样品中ADA浓度为90U/L时，其吸光度变化值ΔA/min ≥0.0200；如果样品浓度不是90U/L，可选择其他已知浓度的样品通过换算得出90U/L的近似吸光度值以便于计算。
[0022]更进一步优选地，所述步骤(2.3)准确度检测步骤如下：
[0023](2.3.1)至少选取两个水平的定值质控品进行测定，按下式求出相对偏差(Bias％)。
[0024][0025]式中：Bias％——相对偏差；——样本测定结果均值；TV——质控样本靶值。
[0026]其相对偏差Bias％应≤10.0％；
[0027](2.3.2)在人源血清样品中加入一定体积标准溶液或纯品进行测试，各样品重复测定3次，按下式求出回收率R(％)；
[0028][0029]式中：R——回收率；V——加入标准溶液的体积；V0——血清样本的体积；c——血清样本加入标准溶液后的检测浓度；c0——血清样品的检测浓度；c
s
——标准溶液的浓度；所述回收率在90％
‑
110％范围内；
[0030](2.3.3)精密度测定：用同批试剂平行测定同一份质控样本10次，所述质控样本ADA≥20U/L，计算均值和标准差，按下式计算批内变异系数(CV
批内
)，其批内变异系数CV
批内
≤4.0％；
[0031][0032]式中：——样本测定结果均值；S——标准差；CV
批内
——批内变异系数。
[0033](2.3.4)线性范围测定：
[0034]该试剂盒在4
‑
250U/L浓度范围内，相关系数r≥0.990；样本浓度≤25U/L，绝对偏差≤5U/L；样本浓度＞25U/L，相对偏差≤10.0％；
[0035]在4
‑
250U/L浓度范围内，取接近线性范围上限的高浓度样品和接近线性范围下限的低浓度样品，混合成至少5个稀释浓度样品(x
i
)，每个稀释浓度样品测试至少2次，分别求出测定结果的均值(y
i
)；以稀释浓度(x
i
)为自变量，以测定结果均值(y
i
)为因变量求出线性回归方程，按以下公式计算线性回归的相关系数(r)。将稀释浓度(x
i
)代入线性回归方程，计算y
i
的估计值以及y
i
与估计值的相对偏差或绝对偏差，取绝对值。
[0036][0037](2.3.5)批间差测定：用3个不同批号的试剂分别测试同一质控样本，所述质控样本浓度≥20U/L，每个批号重复测试3次；分别计算每批3次测定结果的均值和3 个批号测试结果的总均值按下列公式求出三个批号试剂测定均值的相对极差(R)，
所述相对极差(R)≤8.0％；
[0038][0039]式中：x
max
——中的最大值，
[0040]x
min
——中的最小值。
[0041]进一步优选地，所述步骤(3.1)外观检测中，先将冻干品溶解检测，要求溶解后的液体呈微黄色；所述步骤(3.2)准确度检测中，用检测合格的校准品与试剂盒定标后，测定待测校准品，重复测定3次，分别计算测定结果的均值按下式求出相对偏差(Bias)；
[0042][0043]其相对偏差(Bias)或测量值与标示的偏差≤10.0％；所述步骤(3.3)均一性检测中，取 10瓶待测校准品或质控品，每瓶测定1次，分别计算测量值的均值和标准差(S1)；再取其中1瓶，重复测定10次，分别计算测量值的均值和标准差(S2)，按下式求出瓶间标准差(S
瓶间
)和变异系数(CV
瓶间
)，当S1＜S2，令CV＝0；
[0044][0045]其批内精密度(CV
瓶间
)≤8.0％。
[0046]本专利技术的第二方面，提供了上述试剂盒检测方法在腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒质量检测中的应用。
[0047]本专利技术与常规的试剂盒检测方法相比，具有如下有益效果：
[0048](1)本专利技术通过优化试剂盒质量检测方法，不本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种腺苷酸脱氨酶(ADA)检测试剂盒的质量检测方法，其特征在于，所述质量检测步骤如下：(1)物理检测(1.1)检测试剂盒外观，检查试剂盒内封盖是否盖紧，无漏液；(1.2)检查试剂盒内试剂澄清度及含量情况；(2)化学检测(2.1)试剂空白吸光度；(2.2)分析灵敏度；(2.3)准确度检测(3)检测并评价校准品、质控品(3.1)外观检测(3.2)准确度检测(3.3)均一性检测。2.根据权利要求1所述的质量检测方法，所述步骤(1.2)中，利用同一无色光照条件照射试剂容器，检查试剂是否为无色澄清液体；所述含量采用量具测量，进一步地，所述的量具精度不低于0.5mL。3.根据权利要求1或2所述的质量检测方法，所述步骤(2.1)中，以纯化水或蒸馏水为样本，在546nm下测定其反应混合液的吸光度值，检查其吸光度是否≤1.0000；所述试剂空白变化率的要求为：每分钟试剂空白吸光度的变化率(ΔA/min)≤0.0200。4.根据权利要求1
‑
3任一项的质量检测方法，所述步骤(2.2)中，当样品中ADA浓度为90U/L时，其吸光度变化值ΔA/min≥0.0200；如果样品浓度不是90U/L，可选择其他已知浓度的样品通过换算得出90U/L的近似吸光度值以便于计算。5.根据权利要求1
‑
4任一项的质量检测方法，所述步骤(2.3)准确度检测步骤如下：(2.3.1)至少选取两个水平的定值质控品进行测定，按下式求出相对偏差(Bias％)。式中：Bias％——相对偏差；——样本测定结果均值；TV——质控样本靶值。其相对偏差Bias％应≤10.0％；(2.3.2)在人源血清样品中加入一定体积标准溶液或纯品进行测试，各样品重复测定3次，按下式求出回收率R(％)；式中：R——回收率；V——加入标准溶液的体积；V0——血清样本的体积；c——血清样本加入标准溶液后的检测浓度；c0——血清样品的检测浓度；c
s
——标准溶液的浓度；所述回收率在90％
‑
110％范围内；(2.3.3)精密度测定：用同批试剂平行测定同一份质控样本10次，所述质控样本ADA≥20U/L，计算均值和标准差，按下式计算批内变异系数(CV
批内
)，其批内变异系数CV
批内
≤4.0％；
式中：——样本测定结果均值；S——标准差；CV
...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾刚，王贤理，池万余，苗准，
申请(专利权)人：浙江伊利康生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：