冠状病毒抗体及其应用制造技术

本发明专利技术提供特异性结合SARS

【技术实现步骤摘要】
冠状病毒抗体及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，尤其涉及冠状病毒抗体及其应用。
[0002]背景
[0003]冠状病毒为不分节段的单股正链RNA病毒，根据血清型和基因组特点冠状病毒亚科被分为α、β、γ和δ四个属，由于病毒包膜上有向四周伸出的突起，形如花冠而得名。2019年发现的新型冠状病毒(SARS
‑
CoV
‑
2或2019
‑
nCoV)属于β属的新型冠状病毒，有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性，直径60
‑
140nm。目前研究显示，SARS
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CoV
‑
2与SARS
‑
CoV具有高度同源性。
[0004]新型冠状病毒肺炎COVID
‑
19主要通过呼吸道传染，其也可能通过接触传播。人群普遍易感，老年人及有基础疾病者感染后病情较重，儿童及婴幼儿也有发病。基于目前的流行病学调查，新型冠状病毒的潜伏期一般为1
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14天，大多数在3
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7天。感染者的主要临床症状是发热、乏力、干咳，而鼻塞、流涕等上呼吸道症状少见。在发病早期，患者的白细胞总数正常或降低，或淋巴细胞数目减少，部分患者出现肝酶、肌酶和肌红蛋白增高的现象。胸部影像显示患者早期呈现多发小斑片影及间质改变，以肺外带明显；进而发展为双肺多发磨玻璃影、浸润影，严重者可出现肺实变，并逐渐出现呼吸困难，严重者发生急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、休克以及肺组织、心脏、肾脏多种组织损伤和功能障碍。多数轻度感染患者预后良好，重度患者病情常常危重，甚至死亡。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供对SARS
‑
CoV和SARS
‑
CoV
‑
2的spike蛋白具有高亲和力的抗体或抗原结合片段以包含所述抗体或抗原结合片段的融合蛋白。
[0006]本专利技术提供对SARS
‑
CoV和SARS
‑
CoV
‑
2的spike蛋白具有高亲和力的抗体或抗原结合片段。这些抗体可以特异性结合spike蛋白，阻止病毒颗粒和细胞结合以及可以介导免疫细胞吞噬、清除病毒颗粒。这些抗体可用于治疗或改善SARS和COVID
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19，也可以用于诊断SARS和COVID
‑
19。
[0007]通过其表面的spike蛋白(S蛋白或棘突蛋白)与肺上皮细胞表面的一种称为血管紧张素转化酶2(ACE2)进行结合，SARS
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CoV或SARS
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CoV
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2进入细胞内，并利用细胞为其合成新的病毒颗粒；新的病毒颗粒释放到细胞外，再利用同样的方式，病毒感染周围正常的细胞。抗spike蛋白抗体能阻断spike蛋白与ACE2的结合，进而阻断了病毒进入细胞，发挥抗病毒作用。本专利技术抗体还可介导免疫细胞吞噬和清除病毒。
[0008]一些实施方案提供了抗体或抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段特异性结合spike蛋白，并且包含：
[0009](a)HCDR1，其包含如SEQ ID NO:1或2所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；(b)HCDR2，其包含如SEQ ID NO:3或4所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；和/或(c)HCDR3，其包含如SEQ ID NO:5
‑
42中任一项所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体。
[0010]一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段特异性结合spike蛋白，并且包含：
[0011](a)HCDR1，其包含如SEQ ID NO:1或2所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；(b)HCDR2，其包含如SEQ ID NO:3或4所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；和(c)HCDR3，其包含如SEQ ID NO:5
‑
42中任一项所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体。
[0012]一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段特异性结合spike蛋白，并且包含：
[0013](a)HCDR1，其包含如SEQ ID NO:1或2所示的氨基酸序列；(b)HCDR2，其包含如SEQ ID NO:3或4所示的氨基酸序列；和(c)HCDR3，其包含如SEQ ID NO:5
‑
42中任一项所示的氨基酸序列。
[0014]一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段特异性结合spike蛋白，并且包含：
[0015](a)HCDR1，其包含如SEQ ID NO:1或2所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；(b)HCDR2，其包含如SEQ ID NO:3或4所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；(c)HCDR3，其包含如SEQ ID NO:5
‑
42中任一项所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；(d)LCDR1，其包含如SEQ ID NO:43或44所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；(e)LCDR2，其包含如SEQ ID NO:45或46所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；和/或(f)LCDR3，其包含如SEQ ID NO:47或48所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体。
[0016]在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段特异性结合spike蛋白，并且包含：
[0017](a)HCDR1，其包含如SEQ ID NO:1或2所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；(b)HCDR2，其包含如SEQ ID NO:3或4所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；(c)HCDR3，其包含如SEQ ID NO:5
‑
42中任一项所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；(d)LCDR1，其包含如SEQ ID NO:43或44所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；(e)LCDR2，其包含如SEQ ID NO:45或46所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体；和(f)LCDR3，其包含如SEQ ID NO:47或48所示的氨基酸序列，或其有单一位点取代、缺失或插入的变体。
[0018]在一些实施方案中，所述取代变体为保守氨基酸取代变体。
[0019]在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段特异性结合spike蛋白，所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1或2所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3或4所示的HCDR2、如SEQ ID NO:5
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42中任一项所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43或44所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45或46所示的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗体或抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段特异性结合SARS
‑
CoV
‑
2或SARS
‑
CoV的spike蛋白，所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1或2所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3或4所示的HCDR2、如SEQ ID NO:5
‑
42中任一项所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43或44所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45或46所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47或48所示的LCDR3中的一个或多个。2.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1或2所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3或4所示的HCDR2、如SEQ ID NO:5
‑
42中任一项所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43或44所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45或46所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47或48所示的LCDR3。3.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:6所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:9所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:15所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:16所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:18所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:19所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:20所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:21所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:22所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:23所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或
所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:24所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:25所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:28所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:29所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:30所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:32所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:33所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:34所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:35所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:36所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:37所示的HCDR3、如SEQ ID NO:43所示的LCDR1、如SEQ ID NO:45所示的LCDR2和如SEQ ID NO:47所示的LCDR3；或所述抗体或抗原结合片段至少包含如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ ID NO:3所示的HCDR2、如SEQ ID NO:39所示的HCDR...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄贤明，张慧，苏紫琪，苏华飞，黄皓晖，汪志炜，陈俊有，郑丹丹，李嘉萍，朱圣花，李婵，李胜峰，
申请(专利权)人：百奥泰生物制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：