肝病相关生物标志物和其使用方法技术

本发明专利技术提供了一种生物标志物和生物标志物组合，可用于评估受试对象的肝病状态、监测肝脏疾病、区分肝脏疾病、治疗本发明专利技术方法评估的受试对象、提供诊断受试对象肝病状态的相关检测方法以及试剂盒。检测方法以及试剂盒。检测方法以及试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
肝病相关生物标志物和其使用方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请主张2016年5月29日提交的编号为62/343,010的美国临时申请的优先权并将通过引用合并至本申请。


[0003]本专利技术涉及与肝病(肝脏疾病)有关的生物标志物，使用生物标志物诊断肝脏疾病，监测肝脏疾病进展，对肝脏疾病进行分层，或区分肝脏疾病的方法，用于这些方法的试剂盒，以及通过本专利技术的方法诊断的受试者的治疗。

技术介绍

[0004]肝纤维化是肝损伤引起的伤口愈合反应(Chang TT,et al.Long
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term entecavir therapy results in the reversal of fibrosis/cirrhosis and continued histological improvement in patients with chronic hepatitis B.Hepatology 52,886
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893(2010)；George SL,Bacon BR,Brunt EM,Mihindukulasuriya KL,Hoffmann J,Di Bisceglie AM.Clinical,virologic,histologic,and biochemical outcomes after successful HCV therapy:a 5
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year follow
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up of 150 patients.Hepatology 49,729
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738(2009))，是慢性肝功能衰竭的常见原因，也是肝细胞癌的主要风险因素。其中，乙型、丙型肝炎病毒感染，自身免疫性疾病，胆道疾病，酗酒及非酒精性脂肪性肝炎是世界范围内慢性肝病的最常见的原因，在多年或数十年时间中可导致肝纤维化和肝硬化(Bataller R，Brenner DA.Liver fibrosis.The Journal of clinical investigation 115,209
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218(2005))。在工业化国家中，约15％到20％的脂肪肝患者会进展为肝纤维化和肝硬化；他们之中，约30
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40％的患者终将死于肝功能衰竭，肝癌，或肝移植后癌症复发(Shneider BL,Gonzalez
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Peralta R,Roberts EA.Controversies in the management of pediatric liver disease:Hepatitis B,C and NAFLD:Summary of a single topic conference.Hepatology 44,1344
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1354(2006))。肝纤维化的检测和分期以及向肝硬化的进展一直是肝脏病学的一个长期挑战。近期研究表明，肝纤维化是可以逆转的(Chang TT,et al.)，因此，强调了需要对这些患者的治疗反应的长期的监测和监视。
[0005]对慢性肝病患者的肝病严重程度的客观评估也越来越重要，比如对患病程度较轻的患者的治疗前决策和评估，他们没有接受治疗，仅仅是期望随访。随着肝纤维化/肝硬化患病率的增加，鉴定其进展对临床医生来说是一种挑战。在日常临床常规中，用于监测肝纤维化/肝硬化状态的可靠的血清生物标志物将是十分理想的监测指标。慢性肝病的预后和管理在很大程度上取决于肝纤维化的程度和进展。
[0006]目前，肝活组织检查是评估出现肝纤维化和肝纤维化程度的黄金标准。而此种手段有很大的局限性，比如侵入性，取样失误，观察者内和观察者间的可变性创建长时间切身需要精确的非侵入性检查。显著的肝纤维化的出现是抗病毒治疗的指示，而肝硬化的出现是需要特别监测与门静脉高压以及HCC的风险增加有关的并发症的指示。
[0007]开发简单而可靠的非侵入性肝病标志物一直都是临床肝脏病学的重要目标并且将促进临床实验的设计。然而，尽管进行了多次尝试，该领域仍未能产生可被多方接受的非侵入性方案。提供非侵入性方法的这些尝试通常分为三类：(
ⅰ
)由与肝功能相关的常规实验室检查组成的血清学标志物，(
ⅱ
)由细胞外基质合成和降解的产物和参与这些过程的酶组成的纤维化生物标志物，(iii)成像技术，其涵盖诸多方面，从普通肝脏非特异性技术，如超声(US)，计算机断层扫描(CT)和磁共振成像(MRI)(Taouli B,Ehman RL,Reeder SB.Advanced MRI methods for assessment of chronic liver disease.AJR American journal of roentgenology 2009；193:14
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27；.Brancatelli G,Federle MP,Ambrosini R,et al.Cirrhosis:CT and MR imaging evaluation.European journal of radiology 2007；61；57
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69.)到肝脏特异性技术，如瞬时弹性成像技术(TE)(FibroScan)(Talwalkar JA.Elastography for detecting hepatic fibrosis:options and considerations.Gastroenterology 2008；135:299
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302.Sandrin L,Fourquet B,Hasquenoph JM,et al.Transient elastography:a new noninvasive method for assessment of hepatic fibrosis.Ultrasound in medicine&biology 2003；29:1705
‑
13.Meng F,Zheng Y,Zhang Q,et al.Noninvasive Evaluation of Liver Fibrosis Using Real
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time Tissue Elastography and Transient Elastography(FibroScan).J Ultrasound Med 2015；34:403
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10)。但是，成像形式在腹水患者，中心静脉压升高患者和肥胖患者中具有有限的精确度。上述三类中，常规血清学标志物似乎由于其广泛的可用性和成本相对较低，看起来很有吸引力，但目前同样没有提供可被多方接受的方案。这些包括血液学和化学实验室检查组成的评分系统，比如，Fibro检测(Imbert
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Bismut F,Ratziu V,Pieroni L,Charlotte F,Benhamou Y,Poynard T.Biochemical markers本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种受试者的肝脏疾病状态的诊断方法，所述方法包括:a.从所述受试者获得生物样本；测量所述样本中生物标志物组合的每种生物标志物的水平，其中所述组合包括表1所列的至少一种生物标志物，可选择地，其中所述组合是表3A或3B中所列的任何组合；b.将测量水平与肝脏疾病状态相关联；以及c.基于相关性确定所述受试者患有肝脏疾病状态；以及d.可选择地向所述受试者实施治疗。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述组合包括下列中的每一者:棕榈酸(C16:0)，棕榈酸(C16:0)/棕榈油酸(C16:1n7)比值，酪氨酸，果糖，果糖/葡萄糖比值，甘氨鹅脱氧胆酸(GCDCA)和甘氨胆酸(GCA)，如组合AU中所阐述的。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述肝脏疾病状态是存在肝脏疾病，或存在肝脏疾病期或肝脏疾病严重程度。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述肝脏疾病状态选自肝炎，脂肪性肝炎，NASH，肝纤维化和肝硬化。5.根据前述权利要求中的任一项所述的方法，其中确定所述受试者患有肝脏疾病状态的步骤包括为通过质谱(MS)进行的测量步骤准备所述样本。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述MS包括飞行时间MS，离子阱MS，四极杆MS，扇形磁场MS，离子回旋共振MS和静电扇形分析MS中的一个或多个；其中所述方法包括从所述样本中提取所述至少一种生物标志物；其中所述提取包括过滤所述样本以提供滤液，并测量所述滤液中的至少一种生物标志物；其中所述方法包括在过滤前蛋白质沉淀的步骤；其中所述方法包括将所述至少一种生物标志物与一种或多种其他生物标志物分离；中分离步骤包括气相色谱法(
‘
GC
’
)或液相色谱法(
‘
LC
’<...

【专利技术属性】
技术研发人员：伟，
申请(专利权)人：深圳市绘云生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：