原纤维蛋白-2重组蛋白在制备预防或治疗原纤维蛋白-2缺陷型眼病的产品中的用途制造技术

本发明专利技术公开了原纤维蛋白

【技术实现步骤摘要】
原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在制备预防或治疗原纤维蛋白
‑
2缺陷型眼病的产品中的用途


[0001]本专利技术涉及生物制药领域，具体涉及原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在制备预防或治疗原纤维蛋白
‑
2缺陷型眼病的产品中的用途。

技术介绍

[0002]原纤维蛋白
‑
2(Fibrillin
‑
2，FBN2)基因变异已经被证明是早发型黄斑变性(Early
‑
onsetmaculardegeneration,EOMD)、年龄相关性黄斑变性(Agerelatedmaculardegeneration，AMD)形成的重要原因，2014年在AMD家系中发现了FBN2基因突变为常染色体显性遗传，2016年发现FBN2基因突变的AMD患者有玻璃膜疣的临床表现；有越来越多的人患有AMD，严重情况下会丧失视力。FBN2蛋白参与形成微纤维并对ECM的形成和重塑至关重要，参与全身结缔组织中弹性纤维的形成。FBN2基因变异的AMD患者眼中的FBN2蛋白表达降低或者功能丧失，这改变了其渗透性、弹性蛋白纤维的包装、以及柔韧性，这是诱发了视网膜病变的重要原因，但是FBN2基因缺陷在视网膜病变疾病中发生发展的作用机制尚不明确。
[0003]腺相关病毒(Adeno
‑
associatedvirus，AAV)具有宿主范围广、有多种血清型、滴度高、安全性高、准确性高、表达稳定、免疫原性低等优点，已被广泛地应用于基础医学研究和临床试验中，被视为最有前途的研究基因治疗载体之一。
[0004]蛋白靶向干预广泛用于眼科疾病的治疗，如抗体(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)等，但是针对FBN2基因缺陷型视网膜病变和近视的靶向药物研究上尚未见报道。所以，本申请为FBN2基因缺陷型眼病的临床诊断和治疗提供新策略。

技术实现思路

[0005]针对现有技术中存在的缺陷，本专利技术的主要目的在于提供原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在制备预防或治疗原纤维蛋白
‑
2缺陷型眼病的产品中的用途。
[0006]本申请通过AAV为载体进行RNAi构建的基因缺陷型眼病，通过注射重组蛋白进行靶向干预治疗，为视网膜病变的靶向治疗提供新的方法。本申请研究发现，通过AAV为载体进行RNAi可以构建的基因缺陷型视网膜疾病模型，主要表现为眼底出现玻璃膜疣样渗出物，视网膜相干光学断层扫描出现不光滑反射区，视网膜外颗粒层变薄，这些均为视网膜病变的临床表现。经过注射重组蛋白进行靶向干预治疗后，眼底渗出减少，视网膜外颗粒层增厚，对视网膜病变起到了一定的治疗作用。
[0007]一方面，本专利技术提供了一种原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在制备预防或治疗原纤维蛋白
‑
2缺陷型眼病的产品中的用途。
[0008]进一步的，所述原纤维蛋白
‑
2缺陷型眼病选自遗传性视网膜病变、轴性近视和先天性黄斑变性中的至少一种。
[0009]进一步的，所述产品为药物、试剂或疫苗。
[0010]在一个实施方式中，本专利技术提供了原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在非治疗目的调控视网膜电图波形振幅的用途；
[0011]优选的，所述调控视网膜电图波形振幅为将视网膜电图波形振幅恢复至正常；
[0012]优选的，所述视网膜电图波形振幅选自暗适应视杆细胞反应波形振幅、暗适应最大混合反应波形振幅、暗适应震荡电位反应波形振幅和明适应视锥细胞反应波形振幅中至少一种。
[0013]在一个实施方式中，本专利技术提供了原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在非治疗目的减少视网膜渗出及眼底沉积物的用途。
[0014]在一个实施方式中，本专利技术提供了原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在非治疗目的增加视网膜外核层厚度的用途。
[0015]在一个实施方式中，原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在非治疗目的降低眼轴长度的用途。
[0016]本专利技术提供了原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在非治疗目的提高原纤维蛋白
‑
2的表达的用途；
[0017]优选的，所述原纤维蛋白
‑
2的表达选自原纤维蛋白
‑
2基因的表达或原纤维蛋白
‑
2蛋白的表达；
[0018]优选的，所述原纤维蛋白
‑
2基因的表达为原纤维蛋白
‑
2基因mRNA的表达。
[0019]另一方面，本专利技术提供了一种预防或治疗原纤维蛋白
‑
2缺陷型眼病的产品，所述产品是以原纤维蛋白
‑
2重组蛋白作为唯一活性成分，或包含原纤维蛋白
‑
2重组蛋白的组合物。
[0020]进一步，所述产品为药物，所述组合物还包括药用辅料；
[0021]优选的，所述药用辅料选自稀释剂、赋形剂、香味剂和甜味剂中的至少一种；
[0022]优选的，所述药物的制剂是混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂或注射剂中的至少一种；
[0023]优选的，所述药物的给药方式为滴注或注射；
[0024]优选的，所述药物的给药方式为玻璃体腔注射。
[0025]进一步，所述产品中原纤维蛋白
‑
2重组蛋白的含量为0.01～5.0μg/μL；优选的，所述产品中原纤维蛋白
‑
2重组蛋白的含量为0.1～1.0μg/μL；优选的，所述产品中原纤维蛋白
‑
2重组蛋白的含量为0.2～0.5μg/μL。
[0026]本专利技术的有益效果如下：
[0027]1、本专利技术在FBN2基因缺陷型眼病模型构建以及注射FBN2蛋白的实验中证明，外源性FBN2重组蛋白可以改善FBN2基因缺陷引起的视网膜病变和近视性眼轴增长。
[0028]2、本专利技术通过注射FBN2基因干扰载体AAV后，可以构建FBN2基因缺陷型眼病小鼠模型，主要表现为眼底黄白色似玻璃膜疣沉积物、ONL变薄、眼轴增长、ERG波形振幅降低呈熄灭型，以及FBN2的mRNA和蛋白表达降低。
[0029]3、本专利技术通过注射外源性FBN2重组蛋白可以有效治疗FBN2基因缺陷型视网膜病变，可以减少眼底黄白色似玻璃膜疣沉积物的产生、增加ONL厚度、恢复ERG波形振幅、以及增加FBN2的mRNA和蛋白表达。
[0030]4、本专利技术首次通过用玻璃体腔注射FBN2基因干扰载体AAV构建FBN2 基因缺陷型动物模型的方法，且首次发现玻璃体腔注射FBN2重组蛋白对FBN2 基因缺陷型眼病有治疗作用。本专利技术研究进一步证明了FBN2基因缺陷在视网膜病变和近视发生发展中一系列病理
生理改变，以及玻璃体腔注射外源性 FBN2重组蛋白可以弥补FBN2基因缺陷型眼病FBN2内源性缺失的问题，从而达到治疗疾病的作用，为下一本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在制备预防或治疗原纤维蛋白
‑
2缺陷型眼病的产品中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述原纤维蛋白
‑
2缺陷型眼病选自遗传性视网膜病变、轴性近视和先天性黄斑变性中的至少一种。3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述产品为药物、试剂或疫苗。4.原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在非治疗目的减少视网膜渗出及眼底沉积物的用途。5.原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在非治疗目的调控视网膜电图波形振幅的用途；优选的，所述调控视网膜电图波形振幅为将视网膜电图波形振幅恢复至正常；优选的，所述视网膜电图波形振幅选自暗适应视杆细胞反应波形振幅、暗适应最大混合反应波形振幅、暗适应震荡电位反应波形振幅和明适应视锥细胞反应波形振幅中至少一种。6.原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在非治疗目的增加视网膜外核层厚度的用途；原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在非治疗目的降低眼轴长度的用途。7.原纤维蛋白
‑
2重组蛋白在非治疗目的提高原纤维蛋白
‑
2的表达的用途；优选的，所述原纤维蛋白
‑
2的...

【专利技术属性】
技术研发人员：毕宏生，蒋文君，温莹，
申请(专利权)人：山东中医药大学附属眼科医院山东施尔明眼科医院，
类型：发明
国别省市：