一种链霉菌生防菌株及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术的微生物领域，具体涉及一种用于水稻稻瘟病的生物防治的链霉菌（Streptomycessp.QJK

【技术实现步骤摘要】
一种链霉菌生防菌株及其应用


[0001]本专利技术属于生物技术的微生物领域，具体涉及一种高效防治水稻稻瘟病的链霉菌（Streptomycessp.QJK
‑
30）生防菌株及其应用。

技术介绍

[0002]稻瘟病是一种毁灭性的水稻真菌病害，每年造成水稻产量损失10％
‑
30％，严重时产量损失可达到50％，甚至绝收，全世界每年因稻瘟病损失的水稻足以养活6000万人。稻瘟病在水稻3
‑
4叶期、分蘖盛期和始穗期容易发生。病原为稻瘟菌（Magnaportheoryzae），生理小种繁多，高度可变，且受地理和气候影响影响较大，因而治理难度较大。
[0003]目前，水稻稻瘟病的防治方法主要包括：抗病品种选育与利用、农业栽培管理以及化学农药施用。抗病品种选育难度大，周期长。传统的农业在栽培措施防治稻瘟病，需要大量的人力物力，而且为了追求水稻的高产，采用了高产、多蘖良种以及推广抛秧、高密度、施用高氮肥的栽培技术，为病原菌创造了适宜的生长环境，致使农业栽培措施防治困难重重。化学农药高残留，对人畜有害，污染环境，具有环境风险，且长期使用导致抗药性。利用拮抗微生物防治植物病害，因选择性好、易降解和对环境友好等特点，在植物病害绿色防控方面越来越受到重视。研究表明，根际有益微生物对植物具有较好的亲和性，施用后易在植物体表或体内存活、定殖，防治效果持久稳定。虽然目前已发现了一些对稻瘟病菌的拮抗菌株或潜在的生防菌株，如假单胞菌（Pseudomonassp.）、芽孢杆菌（Bacillussp.）和某些链霉菌（Streptomycessp.），但不同的拮抗微生物作用机理及使用方法不同。不同的生产应用需求不同的生防菌株，因此筛选更多更有效的生防菌非常必要。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种链霉菌（Streptomycessp.QJK
‑
30）生防菌株，可以用作生物农药，防治水稻稻瘟病。
[0005]本专利技术的链霉菌（Streptomycessp.QJK
‑
30）是从水稻根际土壤中采用土壤连续梯度稀释法，并结合室内对峙试验分离筛选获得。该链霉菌保藏在中国典型培养物保藏中心（武汉大学），保藏单位简称为CCTCC，保藏编号为CCTCCNO：M2019376，保藏日期为2019年5月20日。其具有以下的微生物学特性：革兰氏阳性菌，孢子链呈紧密的螺旋形，液化明胶，牛奶胨化阳性，接触酶阳性，氧化酶阳性，酯酶阳性，淀粉水解阳性，纤维素水解阴性，不产生H2S；能利用D
‑
葡萄糖、D
‑
果糖、蔗糖、蜜二糖、D
‑
木糖、D
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棉子糖、L
‑
鼠李糖等碳源，不能利用甘油、肌醇、L
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树胶醛糖、D
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甘露醇、D
‑
半乳糖和α
‑
乳糖；氮源利用广泛（除D
‑
丝氨酸和L
‑
精氨酸不能利用以外）。在NA培养基上培养7d后，菌落圆滑，基内菌丝体黄褐的橄榄色，气生菌丝体丰富，白色，无可溶性色素。在NB液体培养基中培养3d，发酵液呈金黄色，澄清透明，菌体生长旺盛，菌球细小。
[0006]本专利技术的链霉菌（Streptomycessp.QJK
‑
30）的培养方法（或繁殖方法）、检测存活性条件：（1）营养琼脂（NA）培养基，10g蛋白胨，5g氯化钠，5g牛肉膏，15g琼脂粉，1L蒸
馏水，pH 7.2
‑
7.4，28℃下培养。实验室液体培养采用营养肉汤（NB）培养基。（2）大量发酵培养基为小米培养基：葡萄糖10 g、蛋白胨3 g、2.5 g
ꢁ
NaCl、CaCO32 g
ꢁ
，小米10g，蒸馏水1000 mL，pH值7.2
‑
7.4
ꢁ
。
[0007]该微生物制剂可以作为生物农药，防治水稻稻瘟病，防治效果可达70.9%。
[0008]本专利技术的有益效果：（1）本专利技术的链霉菌QJK
‑
30为植物根际有益放线菌，能在植物体表和体内定殖，防治效果持久稳定。
[0009]（2）本专利技术的链霉菌QJK
‑
30对环境友好。
[0010]（3）本专利技术的链霉菌QJK
‑
30对稻瘟病的防治效果显著。
[0011]（4）本专利技术的链霉菌QJK
‑
30培养条件简单，易保存，易于工业化生产，具有良好的开发应用潜力。
[0012]附图说明：图1 本专利技术实施例的链霉菌（Streptomyces sp. QJK
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30）在高氏一号培养基上的单菌落形态；图2本专利技术实施例的链霉菌（Streptomyces sp. QJK
‑
30）的系统进化树（基于16S rDNA序列）；图3 本专利技术实施例的链霉菌（Streptomyces sp. QJK
‑
30）对稻瘟病菌菌丝生长的抑制作用。
[0013]具体实施方式：下面结合具体实验实例及附图对本专利技术作进一步详细的描述。
[0014]实施例1：链霉菌QJK
‑
30的分离筛选。
[0015]本专利技术的链霉菌，其属名为Streptomyces，种名为Streptomyces sp.，株名为QJK
‑
30，从湖南省娄底市娄星区水稻种植区水稻根际土壤中分离，通过土壤连续梯度稀释法和平板对峙试验筛选获得，所述筛选方法属于本领域常规实验方法。
[0016]具体方法及过程描述如下：取根际土样（距土表层约10 cm深）1 g于99 mL无菌水中制成10
‑2的土壤悬液，28℃，180 rpm摇瓶30 min，静置30 min后取上清液，连续梯度稀释后，涂布在高氏一号培养基平板上，置于28℃培养。挑取单菌落，在高氏一号培养基平板上进行划线培养，获得一株链霉菌，编号为QJK
‑
30。
[0017]所述高氏一号培养基配方为：20 g可溶性淀粉，1 g KNO3，0.5 g NaCl，0.5 g K2HPO4·
3H2O，0.5 g MgSO4·
7H2O，0.01 g FeSO4·
7H2O，16 g琼脂，蒸馏水1000 mL，pH 7.4
‑
7.6。
[0018]实施例2：链霉菌（Streptomyces sp. QJK
‑
30）的鉴定1、形态学鉴定QJK
‑
30菌株在高氏一号培养基上28℃恒温培养7d后，菌落圆形，质地紧致，气生菌丝白色，如图1显示。
[0019]2、生理生化鉴定QJK
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30菌株革兰氏染色、氧化酶、接触酶、酯酶、脲酶和硝酸盐还原试验阳性；甲基红试验、V
‑
P试验和吲哚产生试验阴性，不产生H2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种链霉菌（Streptomycessp.QJK
‑
30）生防菌株，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏单位简称为CCTCC，保藏编号为CCTCCNO：MM2019376。2.如权利要求1所述的链霉菌（Streptomycessp.QJK
‑
30）生防菌株，其特征是，所述链霉菌（Streptomycessp.QJK
‑
30）是从水稻根际土壤中采用土壤连续梯度稀释法，并结合室内对峙试验分离筛选获得。3.如权利要求1所述的链霉菌（Streptomycessp.QJK
‑
30）生防菌株，其特征是，所述链霉菌（Streptomycessp.QJK
‑
30）具有以下的微生物学特性：革兰氏阳性菌，孢子链呈紧密的螺旋形，液化明胶，牛奶胨化阳性，接触酶阳性，氧化酶阳性，酯酶阳性，淀粉水解阳性，纤维素水解阴性，不产生H2S；能利用D
‑
葡萄糖、D
‑
果糖、蔗糖、蜜二糖、D
‑
木糖、D
‑
棉子糖、L
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鼠李糖等碳源，不能利用甘油、肌醇、L
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【专利技术属性】
技术研发人员：王海华，彭喜旭，陶宗，邬姝欣，
申请(专利权)人：湖南科技大学，
类型：发明
国别省市：