一种血液细胞检测方法及分析系统技术方案

本申请公开了一种血液细胞检测方法及分析系统。本申请方法包括，将待测血液样本、第一试剂和第二试剂混合，进行溶血和染色处理，第一试剂为溶血试剂，第二试剂为糖蛋白特异性染料；使经过处理的血液样本的细胞粒子，逐个通过光学检测系统的检测区，获得血液样本的光学信息，光学信息包括荧光强度信息；根据荧光强度信息从血液样本的细胞粒子中区分出血小板；根据血小板的光学信息获取血液样本中血小板的检测结果。本申请方法，在溶血情况下进行血小板检测，能根据荧光强度信息有效区分溶血后的红细胞碎片与血小板，提高血小板检测准确性。溶血情况下，在同一通道的一次测试中，还能同时实现白细胞的区分和检测，简化血液检测、降低检测成本。降低检测成本。降低检测成本。

【技术实现步骤摘要】
一种血液细胞检测方法及分析系统


[0001]本申请涉及血液细胞检测
，特别是涉及一种血液细胞检测方法及分析系统。

技术介绍

[0002]人血液中含有红细胞、白细胞、血小板等各种细胞。其中血小板是直径为2
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3微米的无核细胞，正常人的血液中每微升含有15万
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35万个血小板。
[0003]众所周知，血小板的常用测定方法之一是电阻抗法。该方法是测定待测血液样本从两个电极间通过时的电阻脉冲，将其绘制成直方图进行分析。原则上，电阻脉冲的强度与待测血液样本中细胞的体积相关；因此可以通过分析电阻脉冲的直方图判断待测血液样本中是否含有血小板，从而实现血小板检测。然而，电阻抗法在测试某些特殊样本时会影响血小板的测试准确性和精确度；例如，含大血小板和小红细胞的样本，这种样本中大血小板的体积与小红细胞体积类似，因此难以通过电阻抗法进行区分。
[0004]针对电阻抗法无法进行区分的情况，有研究提出用对血小板的表面抗原有特异性的标记抗体对血小板进行计数的方法，例如美国临床病理学杂志(2001):115,p460
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464。但是，这种方法在测试过程中需要使用抗原抗体反应，一般需要花很长时间才能得到结果；因此，该方法不能满足临床上需要紧急检测血小板进行判断的使用需求，例如判断是否需要输血等需紧急情况。
[0005]流式细胞技术可以迅速测定血液中的细胞，已广泛用于血液细胞的检测，比如美国专利6114173号、4882284号及5891731号都公开了在非溶血条件下，利用染料对血细胞进行染色区分，然后采用流式细胞技术进行血小板或其它血细胞检测。但是，在血液中有时会出现破碎红细胞和脂质等，其大小与血小板类似，因此会在测定时作为杂质影响血小板测定，特别是在测定需要输血的血小板低的样本，这些杂质的影响会更大。
[0006]针对以上问题，SYSMEX公司的专利CN 101173921公开了一种能够有效的从血细胞和脂质颗粒等血液中的杂质中区分出血小板加以测定的技术，其中记述了一类对血小板具有较好特异性的染料，能够在荧光方向有效的区分血小板和血细胞中的杂质。但这种方法需要在单独的测试通道中进行，并且其对红细胞碎片和血小板不能够有效的区分，在临床上检验一些红细胞易碎样本就会产生较大的干扰。因此在检验血小板时，有效的区分血小板和红细胞碎片及其它可能的杂质就显得尤为重要。
[0007]综上所述，开发一种便捷、快速、准确的血小板检测技术，仍然是临床检验的迫切需要。

技术实现思路

[0008]本申请的目的是提供一种新的血液细胞检测方法，以及相应的血液细胞分析系统。
[0009]为了实现上述目的，本申请采用了以下技术方案：
[0010]本申请的一方面公开了一种血液细胞检测方法，包括将待测血液样本、第一试剂和第二试剂混合，进行溶血和染色处理，其中，第一试剂为溶血试剂，用于裂解待测血液样本中的红细胞，第二试剂为糖蛋白特异性染料，用于对待测血液样本中细胞粒子进行染色；使经过溶血和染色处理的待测血液样本中的细胞粒子，逐个通过光学检测系统的检测区，获得待测血液样本的光学信息，光学信息包括荧光强度信息；根据荧光强度信息从待测血液样本的细胞粒子中区分出血小板；根据血小板的光学信息获取待测血液样本中血小板的检测结果。
[0011]需要说明的是，本申请的血液细胞检测方法，直接采用糖蛋白特异性染料对溶血后的血液样本进行染色和检测，通过一种光学信号，即荧光强度信息，就能够区分红细胞碎片、白细胞与血小板，实现血小板的全区分和计数。
[0012]本申请的一种实现方式中，根据血小板的光学信息获取待测血液样本中血小板的检测结果，包括：根据血小板的光学信息获取待测血液样本中血小板的计数。
[0013]本申请的一种实现方式中，根据血小板的光学信息获取待测血液样本中血小板的检测结果，包括：根据血小板的荧光强度信息获取待测血液样本中血小板的计数。
[0014]本申请的一种实现方式中，本申请的血液细胞检测方法还包括获取待测血液样本的散射光强度信息，根据血小板的光学信息获取待测血液样本中血小板的检测结果，包括：根据血小板的荧光强度信息和散射光强度信息获取待测血液样本中血小板的计数。
[0015]本申请的一种实现方式中，本申请的血液细胞检测方法还包括根据荧光强度信息从待测血液样本的细胞粒子中区分出白细胞；根据白细胞的光学信息获取待测血液样本中白细胞的检测结果。
[0016]本申请的一种实现方式中，根据白细胞的光学信息获取待测血液样本中白细胞的检测结果，包括：根据白细胞的光学信息获取待测血液样本中白细胞的计数。
[0017]本申请的一种实现方式中，根据白细胞的光学信息获取待测血液样本中白细胞的检测结果，包括：根据白细胞的荧光强度信息获取待测血液样本中白细胞的计数。
[0018]本申请的一种实现方式中，本申请的血液细胞检测方法还包括获取待测血液样本的散射光强度信息，根据白细胞的光学信息获取待测血液样本中白细胞的检测结果，包括：根据白细胞的荧光强度信息和散射光强度信息获取待测血液样本中白细胞的计数。
[0019]本申请的一种实现方式中，本申请的血液细胞检测方法还包括获取待测血液样本的散射光强度信息，根据散射光强度信息和荧光强度信息对白细胞进行分类，并对分类的白细胞分别进行计数。
[0020]需要说明的是，本申请的血液细胞检测方法，采用糖蛋白特异性染料，不仅能够实现血小板的区分和计数，还能够根据荧光强度信息区分白细胞并对其进行计数。因此，本申请的血液细胞检测方法能够在一个通道内通过一次测试、且只采用一种光学信号同时区分并检测血小板和白细胞。
[0021]本申请中，散射光强度信息包括前向散射光强度信息和侧向散射光强度信息中的至少一种或两种。
[0022]需要说明的是，虽然本申请的血液细胞检测方法，仅采用一种荧光强度信息就能够实现白细胞的区分和计数；但是，如果进一步的需要对白细胞进行分类，并分别对各类白细胞进行计算，则需要结合散射光强度信息和荧光强度信息。可以理解，在结合散射光强度
信息和荧光强度信息的情况下，同样也可以实现血小板的区分和计数。
[0023]本申请的一种实现方式中，待测血液样本的体积与第一试剂和第二试剂的总体积之比为1:40至1:60。
[0024]本申请的一种实现方式中，溶血染色处理的反应时间为15
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100秒，优选为40
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80s。
[0025]本申请的一种实现方式中，溶血染色处理的反应温度为40℃
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60℃。
[0026]需要说明的是，原则上，较高的反应温度和较长的反应时间，可以使细胞进行更深程度的裂解；本申请的方法主要是为了裂解红细胞，并是血小板和白细胞保持细胞形态；因此，优选在40℃
‑
60℃的反应温度反应15
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100秒。
[0027]本申请的一种实现方式中，糖蛋白特异性本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血液细胞检测方法，其特征在于：包括将待测血液样本、第一试剂和第二试剂混合，进行溶血和染色处理，其中，所述第一试剂为溶血试剂，用于裂解待测血液样本中的红细胞，所述第二试剂为糖蛋白特异性染料，用于对待测血液样本中细胞粒子进行染色；使经过溶血和染色处理的待测血液样本中的细胞粒子，逐个通过光学检测系统的检测区，获得所述待测血液样本的光学信息，所述光学信息包括荧光强度信息；根据所述荧光强度信息从所述待测血液样本的细胞粒子中区分出血小板；根据血小板的光学信息获取所述待测血液样本中血小板的检测结果。2.根据权利要求1所述的血液细胞检测方法，其特征在于：根据血小板的光学信息获取所述待测血液样本中血小板的检测结果，包括：根据血小板的光学信息获取所述待测血液样本中血小板的计数。3.根据权利要求1所述的血液细胞检测方法，其特征在于：根据血小板的光学信息获取所述待测血液样本中血小板的检测结果，包括：根据血小板的荧光强度信息获取所述待测血液样本中血小板的计数；任选地，所述方法还包括获取所述待测血液样本的散射光强度信息，根据血小板的光学信息获取所述待测血液样本中血小板的检测结果，包括：根据血小板的荧光强度信息和散射光强度信息获取所述待测血液样本中血小板的计数。4.根据权利要求1所述的血液细胞检测方法，其特征在于：所述方法还包括根据所述荧光强度信息从所述待测血液样本的细胞粒子中区分出白细胞；根据白细胞的光学信息获取所述待测血液样本中白细胞的检测结果；任选地，根据白细胞的光学信息获取所述待测血液样本中白细胞的检测结果，包括：根据白细胞的光学信息获取所述待测血液样本中白细胞的计数；任选地，根据白细胞的光学信息获取所述待测血液样本中白细胞的检测结果，包括：根据白细胞的荧光强度信息获取所述待测血液样本中白细胞的计数；任选地，所述方法还包括获取待测血液样本的散射光强度信息，根据白细胞的光学信息获取所述待测血液样本中白细胞的检测结果，包括：根据白细胞的荧光强度信息和散射光强度信息获取所述待测血液样本中白细胞的计数。5.根据权利要求1所述的血液细胞检测方法，其特征在于：所述方法还包括获取所述待测血液样本的散射光强度信息，根据所述散射光强度信息和所述荧光强度信息对白细胞进行分类，并对分类的白细胞分别进行计数。6.根据权利要求3
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5任一项所述的血液细胞检测方法，其特征在于：所述散射光强度信息包括前向散射光强度信息和侧向散射光强度信息中的至少一种或两种。7.根据权利要求1
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5任一项所述的血液细胞检测方法，其特征在于：所述糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈庚文，张子千，
申请(专利权)人：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，
类型：发明
国别省市：