本发明专利技术公开了一种用于分光光度法检测茶多酚和抗坏血酸的纳米材料，属于化学分析领域。该纳米材料由如下方法制得：首先利用微生物质作为吸附剂吸附钯离子溶液中的钯离子，其次使用孔径0.22μm或0.45μm滤膜分离吸附钯离子的微生物质，随后向悬浮有微生物质的去离子水中逐滴加入还原剂进行还原，清洗后得到钯纳米材料。制得的纳米材料用于分光光度法检测茶多酚和抗坏血酸浓度，稳定性好，操作简单，无需借助高效液相色谱等复杂仪器，减少了滴定法肉眼确定反应终点的误差。肉眼确定反应终点的误差。肉眼确定反应终点的误差。
【技术实现步骤摘要】
一种用于分光光度法检测茶多酚和抗坏血酸的纳米材料
[0001]本专利技术涉及化学分析检测
，尤其涉及一种用于分光光度法检测茶多酚和抗坏血酸的纳米材料。
技术介绍
[0002]茶多酚是茶叶的次生代谢物，由多种类黄酮化合物组成。茶多酚通过清除自由基和调节体内不同类型氧化酶的活性来预防和治疗疾病。已报道茶多酚对癌症、糖尿病、阿尔茨海默症、帕金森氏病和心血管等疾病的治疗都具有积极作用。抗坏血酸(维生素C，Vc)是人类饮食中必需的微量营养素，通常需要通过摄入新鲜水果、蔬菜来维持人体Vc水平。Vc具有增强机体免疫力、预防慢性病、美容护肤、抗衰老等作用。Vc缺乏会导致牙龈炎、骨骼疾病、心肌衰退、坏血病等疾病发生，而Vc过量可能会造成尿酸盐增多、尿酸结石、皮疹等问题。此外，Vc作为一种天然的抗氧化剂，在饮料或膳食补充剂中添加Vc已被广为应用。因此，对样品中茶多酚和Vc浓度的定量检测极为重要。
[0003]目前对于茶多酚和Vc的含量测量方法有高效液相色谱法、荧光分析法、滴定法、分光光度法等。以上方法虽然都具有各自优点，但仍存在检测仪器昂贵、操作复杂、试剂稳定性差，检测速度慢和准确度欠佳等问题。
技术实现思路
[0004]本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种用于分光光度法检测茶多酚和抗坏血酸的纳米材料。本专利技术是通过如下手段实现的：
[0005]一种用于分光光度法检测茶多酚和抗坏血酸的纳米材料的制备方法，包括：
[0006](1)使用微生物质作为吸附剂，在钯离子溶液中进行吸附；
[0007](2)使用孔径0.22μm或0.45μm滤膜将吸附钯离子的微生物质固液分离；
[0008](3)将分离得到的微生物质重新悬浮于去离子水中，并逐滴加入还原剂进行还原，还原反应在摇床中进行，清洗后得到一种用于分光光度法检测茶多酚和抗坏血酸的纳米材料。
[0009]进一步的，步骤(1)所述吸附剂包括但不限于：微生物菌体、微生物菌渣、改性微生物；所述钯离子溶液浓度为100～1000mg/L，体积为10～1000mL；所述吸附剂的用量为1～10g/L；所述吸附条件为：在摇床中进行或使用搅拌器搅拌，转速100～300rpm，温度10～50℃，时间3～12h。
[0010]进一步的，所述吸附剂对钯离子的吸附量＞100mg/g，钯离子溶液初始浓度为500mg/L，体积为100mL；所述吸附剂的用量为1g/L；所述吸附条件为：转速180rpm，温度30℃，时间6h。
[0011]进一步的，步骤(3)所述还原剂包括但不限于：甲酸钠、乙酸钠、硼氢化钠；所述去离子水的体积为10～1000mL；所述还原剂终浓度为1～100mmol/L。
[0012]进一步的，所述去离子水体积为100mL；所述还原剂为终浓度为20mmol/L的甲酸
钠。
[0013]本专利技术还公开了一种根据上述任一制备方法制得的用于分光光度法检测茶多酚和抗坏血酸的纳米材料。
[0014]本专利技术还公开了一种根据上述纳米材料在茶多酚和抗坏血酸检测中的应用，包括：
[0015](1)将1mg纳米材料加入到含有3,3',5,5'
‑
四甲基联苯胺(TMB)的pH为3.5～5的乙酸钠
‑
乙酸缓冲溶液中，反应体系体积为2800μL，避光反应0.1
‑
1h后，分别加入200μL已知浓度梯度的茶多酚或抗坏血酸溶液，使用紫外
‑
可见光分光光度计测试652nm下吸光度，以茶多酚或抗坏血酸浓度的吸光度值做标准曲线；
[0016](2)取含茶多酚或Vc的样品溶液加入到含有TMB的乙酸钠
‑
乙酸缓冲溶液中，避光反应0.1
‑
1h后使用紫外
‑
可见光分光光度计测试652nm下吸光度，TMB浓度、乙酸钠
‑
乙酸缓冲溶液pH及反应时间同步骤(1)中建立标准曲线反应体系，根据上述标准曲线可得到待测样品中茶多酚或抗坏血酸浓度。
[0017]进一步的，步骤(1)所述TMB终浓度为10mmol/L、体积为30～2000μL；所述已知浓度梯度的茶多酚和抗坏血酸浓度范围为0.1～300μmol/L。
[0018]进一步的，所述TMB体积为1500μL。
[0019]进一步的，步骤(1)所述乙酸钠
‑
乙酸缓冲溶液pH为4.0，体积为1300μL；
[0020]所述避光反应时间为0.5h。
[0021]与现有技术相比，本专利技术的优点在于：
[0022]本专利技术以微生物质做载体制备得到钯纳米材料为检测催化剂，用于分光光度法检测溶液中茶多酚和抗坏血酸Vc含量。该方法稳定性好，操作简单，无需借助高效液相色谱等复杂仪器，减少了滴定法肉眼确定反应终点的误差。
附图说明
[0023]图1为实施例1、2中钯纳米材料的TEM图。
[0024]图2为实施例1、2中钯纳米材料XRD图。
[0025]图3为实施例1中钯纳米材料茶多酚检测标准曲线图。
[0026]图4为实施例2中钯纳米材料抗坏血酸检测标准曲线图。
具体实施方式
[0027]为了便于理解本专利技术，下文将结合较佳的实施例对本专利技术作更全面、细致地描述，但本专利技术的保护范围并不限于以下具体的实施例。
[0028]除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解的含义相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本专利技术的保护范围。
[0029]实施例1
[0030](1)使用毕赤酵母作为吸附剂，加入钯离子浓度为500mg/L，体积为100mL的氯化钯溶液中，吸附剂添加量为1g/L，在30℃下，转速为180rpm的摇床震荡吸附6h。
[0031](2)使用孔径0.45μm滤膜将吸附钯离子的微生物质分离。
[0032](3)向100mL去离子水中逐滴加入甲酸钠溶液进行还原，使甲酸钠终浓度为20mmol/L，还原反应在摇床中进行，清洗后得到钯纳米材料，由图1的TEM图可知，微生物质表面负载有2.0
‑
4.0nm的纳米颗粒，并通过图2的XRD检测图进一步得知，表面纳米颗粒为钯纳米颗粒，证实该方法形成了钯纳米颗粒。
[0033](4)取1mg钯纳米材料，加入1300μL的pH为4.0的乙酸钠
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乙酸缓冲溶液，再加入1500μL浓度为10mmol/L的TMB，避光反应0.5h后，分别加入200μL浓度为10、20、40、60、80、100、120、150、180、200μmol/L的茶多酚溶液，使用紫外
‑
可见光分光光度计测试652nm下吸光度，以茶多酚浓度和吸光度值做标准曲线，如图3所示，得到一条标准曲线Y＝1.2829
‑
0.00586X。其中，Y为吸光度，X为茶多酚溶液浓度，单位为μmol/L。
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于分光光度法检测茶多酚和抗坏血酸的纳米材料的制备方法，包括：(1)使用微生物质作为吸附剂，在钯离子溶液中进行吸附；(2)使用孔径0.22μm或0.45μm滤膜将吸附钯离子的微生物质固液分离；(3)将分离得到的微生物质重新悬浮于去离子水中，并逐滴加入还原剂进行还原，还原反应在摇床中进行，清洗后得到一种用于分光光度法检测茶多酚和抗坏血酸的纳米材料。2.根据权利要求1所述的制备方法，其中：步骤(1)所述吸附剂包括：微生物菌体、微生物菌渣、改性微生物；所述钯离子溶液浓度为100～1000mg/L，体积为10～1000mL；所述吸附剂的用量为1～10g/L；所述吸附条件为：转速100～300rpm，温度10～50℃，时间3～12h。3.根据权利要求2所述的制备方法，其中：所述钯离子溶液浓度为500mg/L，体积为100mL；所述吸附剂的用量为1g/L；所述吸附条件为：转速180rpm，温度30℃，时间6h。4.根据权利要求1所述的制备方法，其中：步骤(3)所述还原剂包括：甲酸钠、乙酸钠、硼氢化钠；所述去离子水的体积为10～1000mL；所述还原剂终浓度为1～100mmol/L。5.根据权利要求4所述的制备方法，其中：所述去离子水体积为100mL；所述还原剂为终浓度为20mmol/L的甲酸钠。6.一种根据权利要求1～5所述任一制备方法制得的用于分光光度法检测茶多酚和抗坏血酸的纳米材料。7.一种根据权利要求6所述的纳米材料在茶多酚和抗坏血酸检测中的应用，包括：(1)将1mg纳米材料加入到含有3,3',5,5'
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四甲...
【专利技术属性】
技术研发人员：谢建平，王国祯，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：
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