本发明专利技术公开了一种桑仁清肺口服液中活性成分的同时测定方法，包括如下步骤：采用萃取剂对桑仁清肺口服液样品进行超声萃取，离心、过滤，得提取液；采用超高效液相色谱法对甘草苷、甘草酸、白花前胡甲素、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、连翘苷、连翘酯苷和橙皮苷同时进行检测；色谱柱为HSS T3色谱柱；流动相A为乙腈+0.2％磷酸，流动相B为0.2％磷酸，并对梯度洗脱程序进行了摸索。方法简便快速、分离效果好，测定精度高，结果重现性好，易于观察，专属性强，色谱峰峰形良好，既达到中国兽药典的要求，又节省时间、试剂。试剂。试剂。
【技术实现步骤摘要】
桑仁清肺口服液中活性成分的同时测定方法
[0001]本专利技术涉及一种桑仁清肺口服液中活性成分的同时测定方法，属于兽药中有效成分检测领域。
技术介绍
[0002]这里的陈述仅提供与本专利技术相关的
技术介绍
，而不必然地构成现有技术。桑仁清肺口服液为中兽药成方制剂，收载于《兽药国家标准(2017年版)中药卷》p233
‑
234，处方为：桑白皮100g，知母80g，苦杏仁80g，前胡100g，石膏120g，连翘120g，枇杷叶60g，海浮石40g，甘草60g，橘红100g，黄芩140g；以上11味，加水煎煮2次，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.02，冷藏24小时，滤过，滤液加苯甲酸适量，加水至1000mL，搅匀，分装，灭菌即得，为棕黄色至棕褐色的液体。具有清肺止咳平喘的功效，主治肺热咳喘。广泛应用于集约化养禽企业。
[0003]桑仁清肺口服液质量标准中有11味药，主要对甘草(甘草酸铵)、黄芩(黄芩苷)、连翘(连翘苷)、前胡(白花前胡甲素)进行薄层色谱鉴别，对黄芩进行含量测定。
[0004]国家标准方法的薄层色谱检测方法中，斑点受环境温湿度和人为操作的影响大，斑点常常不清晰，结果不易判定，而且费时、费试剂，在实际检验工作中发现层析用的展开剂毒性大，例如：石油醚，乙酸乙酯，丁酮，甲醇，三氯甲烷等，对实验人员的伤害比较大。而且操作繁琐，用时较多。
[0005]另外，桑仁清肺口服液的薄层色谱检测前期准备复杂，需要展开，晾干，检视查看结果等多个步骤，费时费力，而且受环境温湿度等因素的干扰比较大，边缘效应等，薄层斑点有时方法难以判别，重现性差。
技术实现思路
[0006]针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的是提供一种桑仁清肺口服液中有效成分的同时测定方法。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术是通过如下的技术方案来实现：
[0008]一种桑仁清肺口服液中有效成分的同时测定方法，包括如下步骤：采用萃取剂对桑仁清肺口服液样品进行超声萃取，离心、过滤，得提取液；采用超高效液相色谱法对甘草苷、甘草酸、白花前胡甲素、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、连翘苷、连翘酯苷和橙皮苷同时进行检测；
[0009]超高效液相色谱的检测波长为205nm、229nm、252nm、277nm和348nm；色谱柱为HSS T3色谱柱；流动相A为乙腈+0.2％磷酸，流动相B为0.2％磷酸；
[0010]梯度洗脱程序为：0
‑
2min，A的体积分数维持在10％；2
‑
3min，A的体积分数由10％变为12％；3
‑
9min，A的体积分数维持在12％；9
‑
12min，A的体积分数由12％变为20％；12
‑
20min，A的体积分数维持在20％；20
‑
26min，A的体积分数由20％变为30％；26
‑
30min，A的体积分数维持在30％；30
‑
33min，A的体积分数由30％变为38％；33
‑
36min，A的体积分数维持
在38％；36
‑
38min，A的体积分数由38％变为45％；38
‑
42min，A的体积分数由45％变为65％；42
‑
44min，A的体积分数维持在65％；44
‑
45min，A的体积分数由65％变为10％；45
‑
48min，A的体积分数维持在10％。
[0011]上述本专利技术的一种或多种实施例取得的有益效果如下：
[0012]1、本专利技术中通过液相色谱法同时把桑仁清肺口服液中甘草中甘草苷和甘草酸，黄芩中的黄芩苷、汉黄芩素和黄芩素，连翘中的连翘苷和连翘酯苷，前胡中的白花前胡甲素，橘红中的橙皮苷等9种主要成分一次测定出来，方法简便快速、分离效果好，测定精度高，结果重现性好，易于观察，专属性强，色谱峰峰形良好，既达到中国兽药典的要求，又节省时间、试剂。
[0013]2、本专利技术的测定方法，可以选用无水乙醇为提取溶剂对供试品进行提取，毒性小，化合物的峰面积响应值适中，样品处理简便、省试剂、省时间，使用的溶剂，毒性小，操作安全环保，对人和环境危害小。
[0014]3、本专利技术的测定方法使用高效液相色谱仪，以色谱图和光谱图的方式呈现结果，方便快捷，结果直观，容易判断，检测限低，大大缩短了检验时间(从样品处理到上机检测品判定结果，约2个小时可以检测完成，而薄层检测方法，一个样品需要约8
‑
10小时)，提升了检验效率、检测灵敏度和检验效果。
附图说明
[0015]构成本专利技术的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。
[0016]图1为本专利技术实施例1中甘草苷，甘草酸，白花前胡甲素，黄芩苷，黄芩素，汉黄芩素，连翘苷，连翘酯苷，橙皮苷对照品的光谱图；光谱图中排列顺序自上而下为：峰1：甘草苷；峰2：连翘酯苷；峰3：橙皮苷；峰4：黄芩苷；峰5：连翘苷；峰6：黄芩素；峰7：汉黄芩素；峰8：甘草酸；峰9：白花前胡甲素；
[0017]图2为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液混合对照色谱图229nm，进样量2μL；
[0018]图3为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液混合对照色谱图225nm，进样量2μL；
[0019]图4为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液混合对照色谱图277nm，进样量2μL；
[0020]图5为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液混合对照色谱图324nm，进样量2μL；
[0021]图6为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液混合对照色谱图330nm，进样量2μL；
[0022]图7为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液混合对照色谱图348nm，进样量2μL；
[0023]图8为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液混合对照色谱图252nm，进样量2μL；
[0024]图9为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液混合对照色谱图205nm，进样量2μL；
[0025]图10为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液百鸣样品无水乙醇2/10处理色谱图229nm，进样量1μL；
[0026]图11为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液百鸣样品甲醇5/10处理色谱图229nm，进样量1μL；
[0027]图12为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液百鸣样品无水乙醇5/10处理色谱图229nm进样量1μL；
[0028]图13为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液华骏样品无水乙醇5/10处理色谱图
229nm，进样量1μL；
[0029]图14为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液和美欣样品无水乙醇5/10处理色谱图229nm进样量1μL；
[0030]图15为本专利技术实施例1中桑仁清肺口服液云湖样品无水乙醇5/10处理色谱图229nm，进样量1μL；
[0031本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种桑仁清肺口服液中活性成分的同时测定方法，其特征在于：包括如下步骤：采用萃取剂对桑仁清肺口服液样品进行超声萃取，离心、过滤，得提取液；采用超高效液相色谱法对甘草苷、甘草酸、白花前胡甲素、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、连翘苷、连翘酯苷和橙皮苷同时进行检测；色谱柱为HSS T3色谱柱；流动相A为乙腈+0.2％磷酸，流动相B为0.2％磷酸；梯度洗脱程序为：0
‑
2min，A的体积分数维持在10％；2
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3min，A的体积分数由10％变为12％；3
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9min，A的体积分数维持在12％；9
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12min，A的体积分数由12％变为20％；12
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20min，A的体积分数维持在20％；20
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26min，A的体积分数由20％变为30％；26
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30min，A的体积分数维持在30％；30
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33min，A的体积分数由30％变为38％；33
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36min，A的体积分数维持在38％；36
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38min，A的体积分数由38％变为45％；38
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42min，A的体积分数由45％变为65％；42
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44min，A的体积分数维持在65％；44
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45min，A的体积分数由65％变为10％；45
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48min，A的体积分数维持在10％。2.根据权利要求1所述的桑仁清...
【专利技术属性】
技术研发人员：邹明，魏秀丽，张志民，刘华阳，李有志，战余铭，陈志强，
申请(专利权)人：山东省饲料兽药质量检验中心，
类型：发明
国别省市：
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